Eine Methode zur Zufügung eines geschlossenen Kopf-Schädel-Hirn-Traumas bei Drosophila

Nehmen Sie betäubte adulte Drosophila-Fliegen in einem leeren Fläschchen.

Führen Sie einen Wattebausch in das Fläschchen ein, um die Fliegen am Boden einzuschließen, um einen stärkeren Aufprall bei Verletzungen zu gewährleisten.

Sobald sich die Fliegen von der Narkose erholt haben, befestigen Sie das Fläschchen an der Feder des hochwirksamen Traumageräts.

Legen Sie das Ende des Fläschchens auf eine erhöhte Plattform. Ziehen Sie dann die Feder in einem Winkel zurück und lassen Sie sie los.

Die Phiole schlägt gegen die Plattform, wodurch die Fliegen wiederholt gegen die Wände der Phiole prallen.

Das Drosophila-Gehirn schlägt gegen die Kopfkapsel und ahmt ein Schädel-Hirn-Trauma (SHT) mit geschlossenem Kopf nach, ohne äußere Schäden zu verursachen.

Lassen Sie die Fliegen sich erholen und geben Sie sie in ein Fläschchen mit Futter.

Die Verletzung führt zu einer Schädigung der Neuronenmembranen, wodurch die neuronale Funktion beeinträchtigt wird.

Signalmoleküle aus den geschädigten Neuronen rekrutieren Immunzellen, was zu einem fortschreitenden Abbau von Hirngewebe führt, was schließlich zum Tod der Fliegen führt.

Legen Sie zwischen 1 und 60 Kohlendioxid-betäubte Fliegen in ein leeres Fläschchen und verschließen Sie das Fläschchen mit einem eng anliegenden Wattebausch. Zeichnen Sie dann eine Linie auf das Fläschchen, 1 Zoll von der Basis entfernt. Schlagen Sie die Fliegen von den Seiten des Fläschchens nach unten und schieben Sie den Wattebausch hinein, bis er mit der neu gezeichneten Linie übereinstimmt.

Warten Sie fünf Minuten, bis die Fliegen ihre Beweglichkeit durch das Kohlendioxid wiedererlangt haben. Führen Sie dann das Ende der Feder in das Fläschchen ein, bis die Innenkante des Velcro bündig mit der Oberseite des Fläschchens abschließt. Dadurch wird das Fläschchen an der Feder befestigt, indem eine dichte Klemmverschraubung geschaffen wird. Achten Sie bei flach aufliegender Feder darauf, dass 1 Zoll des Fläschchens den erhabenen Bereich des Eiskübeldeckels überlappt.

Setzen Sie zu diesem Zeitpunkt einen Gehörschutz auf, da der Aufprall des Fläschchens auf den Eiskübeldeckel ein lautes Geräusch erzeugt. Halten Sie anschließend das Fläschchen mit Daumen und Zeigefinger der linken Hand in den Velcro-Bereich. Halten Sie das Brett mit der rechten Hand fest an der Tischplatte.

Ziehen Sie dann die Feder perfekt gerade in den gewünschten Winkel zurück und lassen Sie die Feder dann los. Warten Sie, bis die Feder vollständig zum Stillstand gekommen ist, und nehmen Sie dann das Fläschchen aus der Feder. Stellen Sie das Fläschchen auf die Tischplatte und lassen Sie die Fliegen mindestens fünf Minuten lang sich erholen. Während dieser Zeit finden die Fliegen langsam wieder zu ihrer normalen Bewegung zurück. Übertragen Sie anschließend die Fliegen zur späteren Analyse in ein Fläschchen mit Fliegenfutter.