Zika-Virus-Infektion von fötalen neuralen Stammzellen
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:21 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Suspension des Zika-Virus, eines pathogenen Virus, das die gewünschte Infektionsvielfalt aufweist, das Verhältnis von Viruspartikeln zu Zellen.
Mischen Sie die Virussuspension mit neuralen Stammzellen des menschlichen fötalen Gehirns.
Inkubieren Sie die Mischung, damit das Virus an Rezeptoren auf den Zellen binden kann, was die virale Endozytose erleichtert.
Als nächstes zentrifugieren Sie die Mischung und verwerfen den Überstand mit nicht internalisierten Viruspartikeln.
Resuspendieren Sie die virusinfizierten Zellen in Medien und säen Sie sie in eine mit extrazellulären Matrixproteinen beschichtete Multi-Well-Platte, die die Zelladhäsion ermöglicht.
Inkubieren Sie die Platte.
Das internalisierte Zika-Virus nutzt die Maschinerie der Wirtszelle, um neue Viruspartikel zu produzieren.
Die virale Replikation verändert die Zellmorphologie erheblich, verursacht zelluläre Schäden und erleichtert die Ausbreitung der Infektion auf benachbarte Zellen.
Die mit dem Zika-Virus infizierten Zellen können für die weitere Analyse verwendet werden.
Resuspendieren Sie das Pellet im ZIKV-Vorrat bei einer Multiplizität der Infektion (MOI) zwischen 1 und 10. Das Volumen der ZIKV-Lösung
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos