Bewertung der motorischen Beeinträchtigung in C. elegans-Modellen mit dem Radial Locomotion Assay

Nehmen Sie Petrischalen mit einer gleichmäßigen Verteilung von Wurmnahrung auf Nematoden-Wachstumsmedien.

Drehen Sie jede Platte um und markieren Sie die Mitte.

Führen Sie Caenorhabditis elegans-Würmer mit einem Mikroskop an die mittig markierte Stelle ein.

Geben Sie dann altersgerechte Würmer auf die restlichen Platten.

Diese Würmer exprimieren entweder die Wildtyp- oder die mutierte Form eines humanen RNA-bindenden Proteins, das im neuronalen Zytoplasma toxische Aggregate bildet und zum neuronalen Tod führt.

Dies verringert die Fähigkeit der Würmer, Muskelbewegungen zu kontrollieren, was zu einer Beeinträchtigung der motorischen Funktion führt.

Lassen Sie die Würmer für eine bestimmte Zeit kriechen.

Markieren Sie mit einem Mikroskop die endgültige Position jedes Wurms.

Messen Sie die radiale Strecke, die die Würmer vom zentralen Punkt bis zu ihren endgültigen Positionen zurückgelegt haben.

Im Vergleich zu Kontrollen zeigen Würmer, die niedrigere Spiegel des Wildtyp-Proteins exprimieren, eine leichte motorische Beeinträchtigung, Würmer mit höheren Spiegeln des Wildtyp-Proteins eine moderate Beeinträchtigung und Würmer mit dem mutierten Protein eine schwere Beeinträchtigung.

Drehen