Eine stereotaktisch gesteuerte Ablationstechnik zur Entfernung der auditorischen Hirnrinde bei Ratten

Nehmen wir eine anästhesierte Ratte, die in einem stereotaktischen Rahmen gesichert ist.

Rasieren und desinfizieren Sie die Kopfhaut und machen Sie dann einen Schnitt, um den Schädel freizulegen.

Identifizieren Sie die anatomischen Referenzen, das Bregma, das Lambda und die interaurale Linie, um den auditorischen Kortex zu lokalisieren, die Gehirnregion, die Schallsignale verarbeitet.

Den Schläfenmuskel einschneiden und zurückziehen, wodurch das Schläfenbein freigelegt wird.

Positionieren Sie eine Nadel in der Mitte der interauralen Linie. Bestimmen Sie anhand dieses Orientierungspunkts die Koordinaten über dem auditorischen Kortex.

Bohren Sie die markierte Region und entfernen Sie den Knochen, um das Gehirn freizulegen.

Durchtrennen Sie die Hirnhäute, die Schichten, die das Gehirn bedecken.

Führen Sie die Ablation durch, indem Sie die kortikalen Schichten aspirieren, während die weiße Substanz erhalten bleibt. Die Entfernung des auditorischen Kortex stört die Fähigkeit zur Verarbeitung von Schallsignalen.

Ersetzen Sie den herausgeschnittenen Knochen, tragen Sie Gaze auf, um die Blutung zu kontrollieren, und nähen Sie die Haut.

Tragen Sie eine antibiotische Salbe auf, um Infektionen vorzubeugen, und verabreichen Sie subkutane Analgetika, um die Schmerzen zu lindern.

Lassen Sie die Ratte sich erholen, um die Auswirkungen der Ablation zu beurteilen.

Um diesen Vorgang zu starten, legen Sie die betäubte Ratte auf ein Heizkissen, um ihre Körpertemperatur zu halten. Stabilisieren Sie dann den Kopf des Tieres in einem stereotaktischen Rahmen mit zwei Ohrstangen und einer Beißstange. Rasieren Sie die Kopfhaut und desinfizieren Sie den Operationsbereich mit Povidon-Jod.

Machen Sie mit einem Skalpell einen Schnitt entlang der Mittellinie, um den Schädel freizulegen, und ziehen Sie das Periost zurück, das die Oberfläche des Schädels bedeckt. Verwenden Sie danach ein steriles Wattestäbchen, um vorsichtig das Blut zu entfernen, das die Oberfläche des Schädels bedeckt, um Bregma, Lambda und die interaurale Linie sichtbar zu machen. Machen Sie mit einem Skalpell einen Schnitt in den Schläfenmuskel in der Nähe seines dorsalen Ansatzes am Schädel. Danach ziehen Sie den Muskel mit einer Nadel und Nahtmaterial heraus und fixieren das Nahtmaterial am stereotaktischen Rahmen, um das Schläfenbein freizulegen.

Senken Sie eine sterile gerade Nadel langsam ab, bis sie sich direkt über der Schädeloberfläche befindet, so dass die Spitze der Nadel auf interauraler Null eingestellt ist. Legen Sie diesen Punkt auf Null fest. Zielen Sie danach mit vier Punkten auf das AC. Senken Sie dann die Nadel nach rechts über das Schläfenbein, um jeden dieser vier Punkte zu visualisieren. Markieren Sie die Punkte mit einem Marker auf dem Schläfenbein und verbinden Sie sie, um ein Rechteck zu zeichnen. Das Rechteck dient als Orientierungshilfe zum Öffnen eines Fensters im Knochen.

Öffnen Sie bei diesem Vorgang das Fenster mit einer elektrischen Bohrmaschine und einem kleinen Bohrer. Bohren Sie den Umfang des Rechtecks mit 8.000 U/min, bis der Knochen nachgibt. Kühlen Sie die Bohrfläche, indem Sie sie mit kalter, steriler Kochsalzlösung abspülen, um eine Beschädigung der subkortikalen Strukturen zu vermeiden. Wenn der Knochen nachgibt, achten Sie darauf, dass Sie nicht in das Gehirn bohren.

Wenn die Ränder locker sind, ziehen Sie den Deckknochen mit einer feinen Pinzette nach oben und lagern Sie ihn in kalter, steriler Kochsalzlösung. Schneiden Sie mit einem Operationsmikroskop die Hirnhäute vorsichtig mit einem mikrochirurgischen Messer ab und entfernen Sie sie mit zwei fein zugespitzten Pinzetten. Wenn Blutungen auftreten, spülen Sie die Operationsstelle mit kalter, steriler Kochsalzlösung aus.

Saugen Sie anschließend die Klimaanlage vorsichtig mit einem chirurgischen Absauggerät ab, das mit einer sterilen 20-Gauge-Nadel mit stumpfer Spitze gekoppelt ist. Aspirieren Sie nur die sechs kortikalen Schichten und nicht die darunter liegende weiße Substanz. Dieser Punkt ist kritisch und muss sehr sorgfältig durchgeführt werden. Wenn die Aspiration abgeschlossen ist, bedecken Sie die Operationsstelle mit dem extrahierten Knochen und tragen Sie eine resorbierbare hämostatische Gaze auf.

Lassen Sie den Schläfenmuskel seine ursprüngliche Position wiederherstellen und nähen Sie die Haut dann mit Wundklammern. Tragen Sie danach eine antibiotische Salbe auf die Wunde auf. Injizieren Sie anschließend Buprenorphin subkutan als Analgetikum in den Rücken der Ratte, eine Stunde und acht Stunden nach Beendigung der Operation. Lassen Sie das Tier auf dem Heizkissen, bis es aufwacht, und bringen Sie es zur Genesung in seinen Stallkäfig zurück.