Vernetzung neuronaler Oberflächenproteine im Gehirn von Mäusen mit einem chemischen Vernetzungsassay
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:47 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einem isolierten Mäusegehirn in einem eiskalten Puffer.
Übertragen Sie das Gehirn in eine Gehirnmatrix, wobei die Bauchseite nach oben zeigt.
Führen Sie Rasierklingen ein, um den vorderen Teil des Gehirns nacheinander zu schneiden.
Hebe die Scheiben an, indem du die Klingen zusammenhältst und den hinteren Teil zurücklässt. Trennen Sie die Rasierklingen und legen Sie sie mit den Hirnscheiben nach oben auf eine gekühlte Oberfläche.
Wählen Sie das gewünschte Segment aus und extrahieren Sie den gewünschten Bereich.
Das Gewebe teilen und fein hacken.
Übertragen Sie das zerkleinerte Gewebe in ein Röhrchen mit Liquor, das mit der Chemikalie BS3 versetzt ist.
Drehen Sie das Röhrchen um und mischen Sie es, um das Gewebe in kleinere Stücke zu brechen, und inkubieren Sie es dann mit Rotation.
BS3, eine zellmembranundurchlässige Chemikalie, vernetzt neuronale Oberflächenproteine wie GABA-Rezeptoren, während interne GABA-Rezeptoren unverändert bleiben.
Fügen Sie Glycin hinzu, um die Vernetzungsreaktion zu löschen.
Die Probe ist bereit für die Bewertung der GABA-Rezeptorspiegel an der Oberfläche.
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