JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:55 Min. • July 8th, 2025
Tauen Sie einen Teil des gefrorenen Gehirngewebes der Ratte auf.
Puffer hinzufügen und das Gewebe fein hacken. Übertragen Sie es dann in ein Röhrchen mit Puffer und Mix.
Die Mischung zentrifugieren und den Überstand verwerfen.
Geben Sie eine proteolytische Enzymlösung in das Gewebe und resuspendieren Sie es mit einer Pipette mit großem Durchmesser.
Inkubieren Sie die Mischung, um die extrazelluläre Matrix aufzubrechen und die Nervenzellen zu lockern.
Die Mischung zentrifugieren und den Überstand verwerfen.
Resuspendieren Sie die Gewebefragmente in einem gekühlten Puffer und pipettieren Sie sie wiederholt, um die Zellen zu dissoziieren.
Lassen Sie die Trümmer und undissoziierten Zellen sich absetzen, und übertragen Sie dann die einzellige Suspension in ein neues Röhrchen.
Die Zellen in eiskaltes Ethanol überführen und mischen. Inkubieren Sie sie, um die Zellen zu fixieren und zu permeabilisieren.
Die Suspension wird zentrifugiert und der Überstand wird verworfen.
Suspendieren Sie die Nervenzellen für die weitere Analyse in einem kalten Puffer.
Um das Gewebe zu zerkleinern, lassen Sie die Proben nicht länger als 1 Minute auf einer kalten Glasplatte auftauen, bevor Sie die Proben mit
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