Generierung eines Rattenmodells der Tibianeurom-Transposition

Nimm eine betäubte Ratte, bei der ein Hinterbein rasiert ist. Von der Mitte der Wade bis zum Knöchel einschneiden und den Muskel freilegen.

Präpariere die Bindegewebsschicht, um den Schienbeinnerv freizulegen.

Erstelle einen subkutanen Tunnel unter der Haut. Durchschneiden Sie den Nerv, um eine Verletzung herbeizuführen.

Fädele das proximale Ende des durchtrennten Nervs durch den Tunnel und nähe es an das distale Ende des Tunnels, wobei du den Nerv subkutan positionierst.

Schließen Sie den Schnitt, reinigen Sie den Bereich und lassen Sie die Ratte sich erholen.

Nach der Durchtrennung degeneriert der Nerv, da Axone und Myelinscheiden zusammenbrechen.

Denervierte Schwann-Zellen setzen Signalmoleküle frei, um Makrophagen für die Beseitigung von Trümmern anzulocken, woraufhin der durchtrennte Nerv axonale Auswüchse aussendet, um die Regeneration zu fördern.

Ohne geeignete Zielstrukturen zur Reinnervierung bilden unorganisierte Axone ein Neurom, eine Masse von Axonen, Schwann-Zellen, Kollagenfasern und Blutgefäßen.

Regenerierende Axone setzen Moleküle frei, die nahegelegene Nozizeptoren, schmerzsignalisierende sensorische Neuronen, anregen, was zu Neurom-assoziierten Schmerzsignalen führt.

Lokalisieren Sie das Knie und machen Sie vorsichtig einen Längsschnitt von 2 bis drei Zentimetern über die mediale Seite der Hinterpfote von der Mitte der Wade bis zum Knöchel mit einem Skalpell. Bei Bedarf die Haut und die Unterhaut mit einer Mikroschere weiter öffnen, bis die Muskelschichten sichtbar sind. Identifizieren Sie das oberflächliche neurovaskuläre Bündel als zwei bis drei weiße, violette oder rote Linien, die sich frei über die Muskelschichten bewegen können. Halten Sie das neurovaskuläre Bündel intakt. Präparieren Sie den hinteren Teil dieses Bündels.

Als nächstes präparieren Sie, um die Faszie zwischen den Gastrocnemius-Muskeln zu öffnen. Zwischen den Faszien der Muskeln befindet sich das tiefere neurovaskuläre Bündel mit dem Nervus tibialis, das etwa dreimal so groß ist wie das oberflächliche neurovaskuläre Bündel. Verwenden Sie den Tibiaknochen als zusätzlichen Orientierungspunkt, da der Nervus tibialis direkt hinter dem Tibiaknochen liegt. Um den Nervus tibialis von den umgebenden Gefäßbündeln zu befreien, bewegen Sie den Nervus tibialis stumpf und schneiden Sie das freiliegende Gewebe durch, das bei der Bewegung des Nervus tibialis eine gewisse Dehnung zeigt.

Sobald der gesamte Schienbeinnerv freigelegt ist, lege die Muskelschichten zurück, um eine Austrocknung des Nervs zu vermeiden, bis die prätibiale Haut vom subkutanen Muskel getrennt ist. Um die prätibiale Haut von der subkutanen Muskelschicht zu trennen und einen subkutanen Tunnel zu bilden, halten Sie die Haut hoch und schieben Sie die stumpfe Spitze mit einem stumpfen mikrochirurgischen Werkzeug parallel zur Haut in das Gewebe. Stellen Sie sicher, dass sich das Ende des Tunnels prätibiell oder lateral befindet, um den Bereich für die Untersuchung des Neuroms leicht zugänglich zu machen.

Nach dem Durchtrennen des Nervus tibialis am distalen Ende in der Nähe des Knöchels, ändere die Vergrößerung des Mikroskops auf 10x oder 16x und identifiziere das Epineurium des Nervus tibialis proximal zu dem Schnitt in der Nähe des Knöchels, oder im Falle einer proximalen Bifurkation des Nervus tibialis, identifiziere das Epineurium sowohl des medialen als auch des lateralen Plantarastes proximal des Schnitts in der Nähe des Knöchels. Platzieren Sie vorsichtig einen 8-0 Nylon näht durch das Epineurium des proximalen Nervenendes, indem man das Epineurium mit einer Pinzette festhält und die Nadel mit einem Biss von etwa 0,5 Millimetern zwischen Nerv und Epineurium steckt.

Beißen Sie mit der Nadel subkutan am Ende des Unterhauttunnels und ziehen Sie die Naht, um den Nerv seitlich in den Unterhauttunnel zu transponieren. Fixiere die Naht, indem du einen Knoten machst. Platzieren Sie eine dickere Naht von 4-0 mit dunkler Farbe bündig mit dem fixierten Nervenende, ohne in die Haut einzudringen. Stellen Sie sicher, dass die Naht außerhalb der Haut sichtbar ist.

Prüfe, ob der Nerv an Ort und Stelle bleibt, nachdem du die Pfote und die Muskeln bewegt hast. Schneiden Sie die Nahtanden mit einem etwas längeren Nahtende an der Furche ab als bei der 8-0 Naht. Ändern Sie die Vergrößerung des Mikroskops wieder auf 6x und verschließen Sie die Haut mit intraepidermalen Nähten mit dem 8-0 Naht. Reinigen Sie die Haut sanft mit 0,9 % Natriumchlorid mit einem Wattestäbchen.

Wenn der Raum kalt ist, lege ein Heizkissen unter einen Teil eines sauberen Käfigs und setze die Ratte in den Käfig unter einem Papiertuch in eine bequeme Position. Sorgen Sie für einen einfachen Zugang zu Futter und Wasser.