Induktion eines leichten Schädel-Hirn-Traumas in einem Mausmodell

Sichere eine betäubte, vorbereitete Maus in einem stereotaktischen Rahmen, wobei ihr Schädel freigelegt ist.

Identifiziere die Schädel-Referenzpunkte. Positionieren Sie dann eine Kopfstütze unter dem Kopf des Tieres und blasen Sie sie auf, um Gehörschäden zu vermeiden.

Richten Sie einen stereotaktisch geführten elektromagnetischen Impaktor über dem Kopf aus.

Setzen Sie die stereotaktischen Koordinaten zurück, um die Impaktorsonde genau über dem Ziel auszurichten. Befestigen Sie einen Kontaktsensor am Ohr des Tieres.

Sobald die Sonde den Schädel berührt, ziehe sie zurück. Stellen Sie die gewünschte Aufpralltiefe ein und initiieren Sie den Aufprall mit den entsprechenden Parametern.

Die Sonde übt eine kontrollierte Kraft auf den Schädel aus, wodurch eine axonale Dehnung und Scherung in kortikalen Neuronen induziert wird, was zu einer leichten traumatischen Hirnverletzung führt.

Misst die Aufrichtzeit des Tieres, die Zeit, die benötigt wird, um nach der Verletzung wieder eine normale Körperposition einzunehmen.

Untersucht die Maus auf sichtbare Schädelfrakturen.

Entfernen Sie dann die Maus aus dem Rahmen, schließen Sie den Einschnitt und tragen Sie Antibiotika auf.

Lassen Sie die Maus wiederherstellen.

Befestigen Sie die Maus im stereotaktischen Rahmen mit leichtem Acetalharz, spitz zulaufenden Ohrstangen, einer Beißstange und einer Mausanästhesiemaske. Überwachen Sie dann sorgfältig die Atmung der Maus, um die Tiefe der Anästhesie sicherzustellen. Tragen Sie steriles Augengleitmittel auf die Augen auf, um ein Austrocknen der Hornhaut zu verhindern. Sterilisieren Sie die Kopfhaut mit Povidon-Jod-Tupfern.

Nachdem du die Tiefe der Anästhesie sichergestellt hast, mache mit einem Skalpell einen etwa 1 Zentimeter langen Schnitt in der Kopfhaut zwischen den Augen und dem Hals, wobei der Schädel freigelegt wird. Lassen Sie den Schädel 1 bis 2 Minuten trocknen und identifizieren Sie dann das Bregma und Lambda. Platzieren Sie als Nächstes die Kopfstütze unter dem Kopf und blasen Sie die Glühbirne mit Wasser auf, bis sie gegen die Unterseite des Mauskopfes drückt, aber den Kopf nicht von der Beißstange weghebt.

Bewegen Sie den Impaktor über dem Kopf der Maus an seinen Platz. Verlängern Sie den Schlagmotor, indem Sie den Aus- und Einfahrkippschalter auf Ausfahren stellen. Richte dann den Schlagkörper so aus, dass er mittig über dem Bregma ist. Setzen Sie die digitalen stereotaktischen x- und y-Koordinaten im stereotaktischen Reader auf 0 zurück. Richten Sie dann die Sonde über der Aufprallstelle aus, indem Sie die Sonde vom Bregma zu den Zielkoordinaten als medial lateral bis 0 Millimeter und anterior posterior bis minus 1,6 Millimeter bewegen.

Klicken Sie den Kontaktsensor an das Mausohr. Senken Sie die Sondenspitze mit der ausgefahrenen Sonde langsam ab, bis der erste Kontakt mit der Oberfläche hergestellt ist. Stoppen Sie beim Piepton. Setzen Sie dann die digitalen stereotaktischen Z-Koordinaten im stereotaktischen Reader auf 0 zurück.

Prüfen Sie sorgfältig, ob die Spitze bündig mit dem Schädel abschließt. Ziehen Sie dann den Prallbrecher ein, indem Sie den Kippschalter an der Steuerbox in die Einfahrposition bringen. Die Spitze zieht sich zurück und hat bis zum Zeitpunkt des Aufpralls keinen Kontakt mehr mit dem Kopf. Stellen Sie die Aufpralltiefe ein, indem Sie die dorsale ventrale Tiefe auf minus 1,2 Millimeter einstellen. Überwachen Sie die Atmung der Maus sorgfältig, um die Anästhesietiefe sicherzustellen und den Gasgehalt nach Bedarf anzupassen.

Den Aufprall auslösen, indem du den rechten Kippschalter auf Aufprall drückst. Die Sondenspitze geht mit der angezeigten Geschwindigkeit nach unten, bleibt für die eingestellte Verweilzeit unten und zieht sich zurück. Starten Sie den Timer sofort nach der nahen Kopfverletzung oder dem CHI-Aufprall, um die Aufrichtzeiten aufzuzeichnen. Die durchschnittliche Zeit des Aufrichtreflexes beträgt 5 bis 15 Minuten.

Bewerten Sie die Maus auf sichtbare Schädelfrakturen, Blutungen und Apnoe. Entfernen Sie die Maus aus dem stereotaktischen Rahmen. Schließen Sie die Kopfhaut, indem Sie die Haut zusammenheften. Tragen Sie dann eine dreifache antibiotische Salbe mit einem sterilen Applikator mit Wattespitze auf den geschlossenen Schnitt auf. Setzen Sie die Maus zur Wiederherstellung wieder in einen sauberen Haltekäfig ein.