Generierung eines Glioblastom-Rattenmodells

Nimm eine betäubte Ratte.

Rasieren Sie die Kopfhaut. Tragen Sie dann Augengel auf, um die Hornhautfeuchtigkeit aufrechtzuerhalten.

Sichern Sie das Tier auf einem stereotaktischen Rahmen und desinfizieren Sie die Operationsstelle. Machen Sie einen Schnitt in der Mittellinie und ziehen Sie ihn zurück, um den Schädel freizulegen.

Bohre ein Loch in die rechte vordere Hemisphäre, um Zugang zum präfrontalen Kortex zu erhalten.

Positionieren Sie eine stereotaktisch geführte Spritze mit einer Suspension von Glioblastom- oder Hirntumorzellen über der gebohrten Stelle.

Injizieren Sie mit einem Pumpenregler die Zellsuspension in den präfrontalen Kortex.

Ziehen Sie die Nadel langsam zurück, um einen Rückfluss der injizierten Zellen zu verhindern. Versiegeln Sie dann die Bohrstelle mit Knochenwachs.

Naht den chirurgischen Schnitt und desinfiziert die Stelle.

Setze die Ratte in ihren Käfig zurück und benutze eine rote Lampe, um die Körpertemperatur zu halten.

Nach der Injektion vermehren sich die Hirntumorzellen, infiltrieren das umgebende Gewebe und induzieren die Angiogenese, wodurch die normale Gehirnfunktion gestört und ein Glioblastom-Modell entsteht.

Um das Gehirn einer anästhesierten 170 Gramm schweren, weiblichen Fischer F344 Ratte mit Gliomzellen zu impfen, bestätigen Sie zunächst die Sedierung durch fehlendes Ansprechen auf das Einklemmen der Zehen. Entfernen Sie die Haare von Augenhöhe bis zum hinteren Teil des Schädels und tragen Sie Salbe auf die Augen des Tieres auf. Legen Sie das Tier in einem stereotaktischen Gerät ruhig. Desinfizieren Sie die exponierte Haut mit Povidon-Jod und legen Sie den Schädel mit einem 2 Zentimeter langen Schnitt in der Mittellinie der Kopfhaut frei. Machen Sie mit einem Diamantbohrer ein 1-Millimeter-Loch, 2 Millimeter hinten und 2 1/2 Millimeter lateral des Bregmas in der rechten vorderen Hemisphäre.

Laden Sie anschließend die Nadel einer 29-Gauge-Insulinspritze mit 5 Mikrolitern Zellsuspension. Und verwenden Sie eine Mikrospritzenpumpensteuerung, um die Zellen unter stereotaktischer Anleitung drei Millimeter tief in den Schädel zu injizieren und die Nadel langsam zurückzuziehen. Verschließen Sie den Schnitt mit Knochenwachs. Dann vernähen und desinfizieren Sie die Haut mit mehr Povidon-Jod. Und verwenden Sie eine rote Lampe, um die Körpertemperatur des Tieres nach der Operation zu stabilisieren und bis zur vollständigen Genesung zu überwachen.