Immunhistochemische Färbung von Kryoschnitten aus koronalem Gewebe der Ratte auf Mikroglia und Neuronen

Nehmen Sie einen Objektträger mit fixierten und permeabilisierten Kryosektionen aus koronalem Gewebe der Ratte.

Umrande die Abschnitte mit einem hydrophoben Stift, um eine kontrollierte Färbeumgebung zu schaffen.

Übertragen Sie die Schnitte in eine Feuchtigkeitskammer, um ein Austrocknen von Reagenzien und Gewebe während der nachfolgenden Schritte zu verhindern.

Behandeln Sie die Schnitte mit Serumproteinen, um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren.

Mit Puffer abspülen, um überschüssige Serumproteine zu entfernen.

Inkubieren Sie mit Primärantikörpern, die auf spezifische Proteine auf Mikroglia und Neuronen abzielen.

Mit Puffer waschen, um ungebundene Primärantikörper zu entfernen.

Inkubieren Sie mit Fluorophor-konjugierten Sekundärantikörpern, die an die Primärantikörper binden.

Mit Puffer waschen, um ungebundene Sekundärantikörper zu entfernen. Dann mit doppelt destilliertem Wasser abspülen.

Tragen Sie wässrige Eindeckmedien auf, um das Fluoreszenzsignal zu schützen, platzieren Sie ein Deckglas und versiegeln Sie es.

Bilden Sie die Schnitte unter einem Fluoreszenzmikroskop ab, um immunmarkierte Mikroglia und Neuronen sichtbar zu machen.

Trocknen Sie die Ränder der Objektträger und mac