JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 1:48 Min. • April 28th, 2025
Nehmen Sie einen Mehrkammer-Objektträger mit proteinbeschichteten Deckgläsern, die fixierte und permeabilisierte periphere Blut-abgeleitete Nervenzellen enthalten, einschließlich neuronaler Vorläuferzellen, Astrozyten und Neuronen.
Füge eine Blockierungslösung hinzu, um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren.
Inkubieren Sie mit fluoreszierenden Farbstoff-konjugierten Antikörpern, die an spezifische zelluläre Proteine binden und so die Identifizierung von neuronalen Zelltypen ermöglichen.
Mit Puffer waschen, um ungebundene Antikörper zu entfernen.
Inkubieren Sie mit einem fluoreszierenden Kernfarbstoff, um die Kerne zu färben.
Übertragen Sie das Deckglas auf ein Dia mit Montagemedium. Legen Sie dann den vorbereiteten Objektträger unter ein Fluoreszenzmikroskop, das mit entsprechenden Filtern ausgestattet ist.
Unter Verwendung bestimmter Lichtwellenlängen regen Sie die Fluoreszenzfarbstoffe an, wodurch sie Licht bei längeren Wellenlängen emittieren.
Die emittierten Fluoreszenzsignale entsprechen den markierten zellulären Proteinen, wobei verschiedene neuronale Zelltypen deutlich hervorgehoben und die Differenzierung der reprogrammierten Blutzellen bestätigt wird.
Fügen Sie eine Blocki
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