JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:02 Min. • April 28th, 2025
Beginnen Sie mit einer anästhesierten transgenen Maus mit einem kreisförmigen Glasfenster und einer Kopfplatte, die auf ihrem Schädel implantiert ist.
Die Mikroglia- oder Immunzellen und Neuronen werden mit fluoreszierenden Proteinen markiert.
Als nächstes befestigen Sie die Maus auf dem Zwei-Photonen-Mikroskoptisch.
Injizieren Sie dann intraperitoneal einen Fluoreszenzfarbstoff, um die Blutgefäße rot zu färben.
Reinigen Sie das Glasabbildungsfenster, tragen Sie einen Kochsalztropfen auf und senken Sie das Mikroskopobjektiv ab.
Als nächstes stellen Sie das Laserlicht so ein, dass es ein Bild der Blutgefäße aufnimmt. Notieren Sie das Verzweigungsmuster und die Koordinaten, um denselben Bereich später zu lokalisieren und abzubilden.
Stellen Sie nun den Laser so ein, dass er die fluoreszierenden Proteine anregt, wodurch die Mikroglia und Neuronen fluoreszieren.
Lokalisieren Sie anhand des aufgezeichneten Verzweigungsmusters dieselbe Region und nehmen Sie regelmäßig Bilder von Zellen auf.
Das vaskuläre Netzwerk und die Neuronen bleiben stabil, während die Positionsänderungen der Mikroglia im Laufe der Zeit die Immundynamik als Reaktion auf neuronale Aktivität widerspiegeln.
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