Gleichzeitige Bildgebung der Mikrogliadynamik und der neuronalen Aktivität bei einer wachen Maus
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:13 Min. • May 29th, 2025
Beginnen Sie mit einer transgenen Maus, die in einem stereotaktischen Rahmen gesichert ist, mit einem Schädelfenster, das über der Sehrinde implantiert ist.
Die Maus exprimiert EGFP in den Mikroglia und R-CaMP, einen rot fluoreszierenden Kalziumindikator, in den Neuronen des visuellen Kortex.
Positionieren Sie die Maus unter einem Zwei-Photonen-Mikroskop und stellen Sie die Objektivlinse so ein, dass sie auf die Gehirnoberfläche fokussiert.
Bewegen Sie die Maus mit dem stereotaktischen Rahmen von der Objektivlinse und bringen Sie eine Schattierungsvorrichtung an.
Füllen Sie die Schattierungsvorrichtung mit Wasser und positionieren Sie die Maus unter dem Mikroskop neu.
Decken Sie die Linse mit schwarzer Folie ab.
Die Schattierungsvorrichtung und die Folie blockieren Störungen durch externes Licht und sorgen so für eine genaue Bildgebung.
Platzieren Sie einen LCD-Monitor vor dem Auge der Maus, um eine visuelle Stimulation zu ermöglichen.
Stellen Sie die Bildgebungsparameter ein und beginnen Sie mit der Bildgebung.
Die visuelle Stimulation löst die neuronale Erregung aus, was zu einem Kalziumeinstrom und einer Erhöhung der R-CaMP-Fluoreszenz führt.
In der Zwischenzeit ziehen Mikroglia ihre
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos