JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:36 Min. • May 29th, 2025
Nehmen wir eine anästhesierte transgene Maus, die fluoreszierende Proteine in spärlichen pyramidalen Neuronen exprimiert.
Der Maus wird eine bildgebende Kanüle über dem dorsalen Hippocampus implantiert.
Positionieren Sie die Maus unter dem Zwei-Photonen-Mikroskop auf einem Heizkissen und befestigen Sie die Kopfplatte der Kanüle an der Halterung, um den Kopf ruhig zu stellen.
Tragen Sie eine Salbe auf, um ein Austrocknen der Hornhaut zu verhindern.
Reinigen Sie die Kanüle mit entionisiertem Wasser und untersuchen Sie sie unter einem Objektiv mit geringer Vergrößerung, um sie auf Ablagerungen, Beschädigungen oder Fluoreszenzprobleme zu überprüfen.
Richten Sie die Bildgebungskanüle an der optischen Achse des Mikroskops aus, um eine präzise Bildgebung zu gewährleisten.
Wechseln Sie dann zu einem hochauflösenden Wasserimmersionsobjektiv.
Füllen Sie die Kanüle mit entionisiertem Wasser und stellen Sie sicher, dass keine Luftblasen entstehen, um Bildverzerrungen zu vermeiden.
Führen Sie eine Zwei-Photonen-Längsbildgebung mit Infrarotlicht durch, um Fluorophore in der Fokalebene selektiv anzuregen und so eine Tiefengewebebildgebung zu ermöglichen.
Die implantierte Kanüle erleichtert den wiederhol
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