JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:03 Min. • May 29th, 2025
Nehmen Sie einen Objektträger mit Gewebeschnitten des Gehirns von Ratten, die immungefärbt auf AMPA- und NMDA-Rezeptoren in Amygdala-Neuronen sind.
AMPA-Rezeptoren vermitteln den Glutamat-induzierten Natriumeinstrom und die schnelle exzitatorische synaptische Übertragung.
Im Gegensatz dazu vermitteln NMDA-Rezeptoren den Glutamat- und Co-Agonisten-induzierten Natrium- und Calciumeinstrom, was eine langsame exzitatorische synaptische Übertragung ermöglicht.
Die Rezeptoren werden mit Primärantikörpern gefärbt und mit Nahinfrarot-Fluorophor-markierten Sekundärantikörpern nachgewiesen.
Legen Sie den Objektträger mit der Gewebeseite nach unten auf die Nahinfrarot-Scanschnittstelle.
Passen Sie die Bildgebungsparameter an und beginnen Sie mit der Bildgebung.
Bei der Laserbeleuchtung emittieren die Fluorophore an den AMPA- und NMDA-Rezeptoren Fluoreszenz.
Die Nahinfrarot-Bildgebung minimiert die Autofluoreszenz und verbessert die Signalklarheit.
Die hochauflösende Abtastung sorgt außerdem für eine klare Unterscheidung der Fluoreszenzsignale und ermöglicht eine präzise Visualisierung von nahegelegenen AMPA- und NMDA-Rezeptoren in der Amygdala.
Berechnen Sie mit Hilfe einer Bildgebungssoftware das AM
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