Biolumineszenz-Bildgebung in einem EAE-Mausmodell
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:27 Min. • May 29th, 2025
Beginnen Sie mit einer anästhesierten Maus mit experimenteller autoimmuner Enzephalomyelitis oder EAE. Dieser Zustand verursacht Entzündungen in den Augen und im Gehirn.
Platzieren Sie die Maus in einem bildgebenden Gerät und richten Sie den oberen Rücken in der Mitte aus.
Decken Sie den unteren Teil der Maus mit einem schwarzen Tuch ab, um Signalstörungen aus diesem Bereich zu vermeiden.
Verwenden Sie eine Bildgebungssoftware, um die Mausposition aufzuzeichnen.
Nehmen Sie eine Spritze, die mit einem Reagenz gefüllt ist, das das biolumineszierende Substrat enthält, und injizieren Sie es intraperitoneal in die Maus.
Das Reagenz zirkuliert und gelangt in die Entzündungsstelle, wo das Substrat mit entzündungsspezifischen Enzymen interagiert.
Die Enzym-Substrat-Reaktion erzeugt ein biolumineszierendes Signal.
Nehmen Sie Bilder in regelmäßigen Zeitabständen auf, um dieses Signal zu überwachen.
Der Sehnerv liegt nahe der Oberfläche, wodurch die Biolumineszenz um die Augen herum hervortritt. Im Gegensatz dazu sind die Signale aus dem Gehirn schwach, da der Schädel das emittierte Licht absorbiert.
Im Bild steht Blau für eine leichte Entzündung und Rot für eine schwere Entzündung.
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