JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:42 Min. • May 29th, 2025
Beginnen Sie mit einer betäubten transgenen Zebrafischlarve, die in Agarose immobilisiert und in eine Petrischale mit einer Anästhesielösung gelegt wird.
Positionieren Sie es unter einem Zwei-Photonen-Lasermikroskop, das zwei Photonen für eine detaillierte Bildgebung verwendet.
Konzentrieren Sie sich auf die oberen und unteren Schichten des Gehirns, um Grenzen für die Bildgebung festzulegen.
Nehmen Sie Bilder in verschiedenen Tiefen auf, um Neuronen vor der Laserbehandlung zu beobachten.
Passen Sie den Fokus auf den interessierenden Bereich an, und passen Sie die Rahmengröße an, um den Fokus auf Neuronen zu verfeinern.
Selektieren und bestrahlen Sie die Neuronen mit dem Zwei-Photonen-Laser.
Der Laser induziert lokalisierte Wärme, was zum neuronalen Tod mit minimaler Schädigung des umgebenden Gewebes führt. Nehmen Sie das Bild auf.
Vergleichen Sie Bilder vor und nach der Behandlung, um Fluoreszenzänderungen zu beurteilen.
Fokussieren Sie Neuronen in tieferen Ebenen neu und wiederholen Sie die Bestrahlung, um alle Neuronen in der interessierenden Region zu behandeln.
Nehmen Sie das Bild erneut auf und vergleichen Sie es mit dem Bild vor der Behandlung. Der Verlust der Fluoreszenz nach der Las
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