JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:58 Min. • May 29th, 2025
Beginnen Sie mit einer anästhesierten Maus mit einer Kopfplatte, die über einem chirurgisch präparierten Dünnschädel-Kortikalfenster befestigt ist.
Positionieren Sie die Maus in Rückenlage. Entfernen Sie die Haut des medialen Oberschenkels, um die Oberschenkelvene freizulegen.
Injizieren Sie ein Fluoreszenzfarbstoffkonjugat in die Vene, um Blutplasma zu markieren und so die Visualisierung von Blutgefäßen zu ermöglichen.
Nähen Sie den Schnitt.
Klappen Sie die Maus um und befestigen Sie die Kopfplatte in einem Gurt, um die Maus zu stabilisieren.
Übertragen Sie den Aufbau auf einen Zwei-Photonen-Mikroskoptisch.
Fügen Sie Kochsalzlösung über das kortikale Fenster hinzu. Senken Sie die Objektivlinse ab, bis sie die Kochsalzlösung berührt.
Lokalisieren Sie mithilfe der Hellfeldbeleuchtung den Bildbereich.
Wechseln Sie zur Zwei-Photonen-Bildgebung.
Der Laser des Mikroskops fokussiert niederenergetisches Nahinfrarotlicht in das Gehirn.
Im Brennpunkt des Lasers bündeln zwei Photonen ihre Energie, um den Farbstoff anzuregen und die Blutgefäße zum Fluoreszieren zu bringen.
Identifizieren Sie ein Kapillarbett – ein Netzwerk kleiner Blutgefäße, die Arterien mit Venen verbinden – und vergrößern Sie es.
Erfa
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