JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 1:56 Min. • June 17th, 2025
Nehmen Sie eine polymerbeschichtete Multi-Well-Platte, die embryonale primäre Großhirnrindenzellen der Maus enthält, wie z. B. Vorläuferzellen und neuronale Zellen. Vorläuferzellen werden transfiziert, um fluoreszierende Proteine für die Markierung und Verfolgung zu exprimieren.
Bringen Sie die Platte in die vorgeheizte Inkubationskammer eines inversen Fluoreszenzmikroskops, um eine stabile Bildgebungsumgebung zu erhalten.
Lokalisieren Sie die Referenzposition auf der Platte, um konsistente Bildgebungspositionen zu erhalten.
Wählen Sie mehrere Bildgebungsfelder pro Vertiefung bei höherer Vergrößerung aus, um die Wahrscheinlichkeit zu maximieren, transfizierte Zellen zu beobachten.
In regelmäßigen Abständen können Sie gleichzeitig Phasenkontrastbilder aufnehmen, um die Zellmorphologie und -dynamik aufzudecken, und Fluoreszenzbilder, um die Expression fluoreszierender Proteine zu überwachen.
Vergleichen Sie Zeitraffer-, Phasenkontrast- und Fluoreszenzbilder, um die Teilung und Differenzierung von Vorläuferzellen in neuronale Linien zu verfolgen.
Um Retrovirus-transduzierte Zellen abzubilden, legen Sie die Gewebekulturplatte in eine Bildgebungskammer, die mit Temperatur- und Kohlendioxidre
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