JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 2:16 Min. • June 17th, 2025
Beginnen Sie mit einer anästhesierten Ratte, die mit einem Schädelfenster präpariert wurde, das kortikale Blutgefäße und Gewebe freilegt.
Legen Sie die Ratte auf einen bildgebenden Tisch und stellen Sie sicher, dass sie mit einem Mundstück verbunden bleibt, das eine Anästhesie und ein Gasgemisch zur Regulierung des Sauerstoffgehalts liefert.
Fokussieren Sie die Kamera auf die Gehirnoberfläche. Lassen Sie breitbandiges Licht durch einen Filter, um bestimmte Wellenlängen zu isolieren.
Ein Lichtleiter und eine Sammellinse lenken das gefilterte Licht auf das kortikale Gewebe.
Im Gewebe wird das Licht je nach seinem Sauerstoffversorgungszustand vom Hämoglobin absorbiert und von den Zellen gestreut, wodurch ein diffuser Reflexionsgrad entsteht.
Erfassen Sie dieses Streulicht mit der Kamera und optimieren Sie die Helligkeit durch Anpassung der Integrationszeit.
Wiederholen Sie die Bildgebung über mehrere Wellenlängen mit einem rotierenden Filterrad, um Spektraldaten zu sammeln.
Blockieren Sie schließlich den Lichtpfad, um ein dunkles Bild aufzunehmen, und subtrahieren Sie es dann von den Spektralbildern, um Rauschen zu entfernen.
Diese verarbeiteten Bilder zeigen den zerebralen Blutfluss, die Sauerstoffversorgung und die Gewebestruktur.
Beginne damit, die Ratte vorsichtig auf den Tisch zu stellen, und passe den Bühnenpegel langsam an, damit die Kamera auf die Oberfläche des Rattengehirns fokussieren kann. Wählen Sie in der Bildaufnahmesoftware den Befehl Speichern aus dem Menü Datei, um ein Bild in einer Datei zu speichern, und benennen Sie es entsprechend der Probe und der Wellenlänge.
Ändern Sie dann die Filterposition, indem Sie das Filterrad drehen. Wiederholen Sie die Bildaufnahme bei jeder der neun Wellenlängen. Schalten Sie anschließend die Lichtquelle der Halogenlampe aus. Blockieren Sie den Lichtweg zum monochromatischen Kamerasystem für ladungsgekoppelte Geräte mit einer Abschirmplatte. Wählen Sie abschließend im Menü Datei den Befehl Speichern aus, und wählen Sie einen Dateinamen aus, der das Beispiel identifiziert.