JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:25 Min. • June 17th, 2025
Beginnen Sie mit einer wachen Maus, die unter einem holografischen Zwei-Photonen-Mikroskop positioniert ist, das mit räumlichen Lichtmodulatoren (SLMs) integriert ist.
Die Maus hält eine vorimplantierte Kopfplatte.
Im Gehirn von Mäusen exprimieren Neuronen rotlichtempfindliche Kanäle und grün fluoreszierende Kalziumindikatoren, die an Kalziumionen binden.
Um die neuronale Aktivität und Konnektivität zu untersuchen, stellen Sie die Bildgebungsparameter ein.
Verwenden Sie einen 920-Nanometer-Laser, um kalziumgebundene Indikatoren in den Neuronen anzuregen. Nehmen Sie das Fluoreszenzbild des Neurons mit minimalem Lichtschaden auf.
Setzen Sie die Bildgebungsparameter zurück und fokussieren Sie einen Laserstrahl im nahen Infrarotbereich.
SLMs formen den Laserstrahl in präzise holografische Muster, die eine selektive Fokussierung auf Zielneuronen an mehreren Punkten ermöglichen.
Dies stimuliert lichtempfindliche Kanäle, bewirkt den Einstrom von Kalziumionen und erhöht die Fluoreszenz der Zielneuronen.
Die aktivierten Zielneuronen leiten Signale an die verbundenen Neuronen weiter und erhöhen die Fluoreszenz des verbundenen Neurons.
Nehmen Sie erneut ein Zwei-Photonen-Bild auf. Eine erhöhte Fluores
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