JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurowissenschaften
0 Ansichten • 2:44 Min. • June 17th, 2025
Nehmen Sie eine dicke Scheibe aus Maushirngewebe, die am Probenhalter befestigt ist. Platzieren Sie eine Tauchkammer über dem Halter und füllen Sie sie mit kohlendioxidunabhängigen Medien, um die Hydratation des Gewebes aufrechtzuerhalten.
Montieren Sie den Halter auf dem Tisch des kalibrierten instrumentierten Nanoindenters.
Richten Sie die Tauchkammer so aus, dass sich die am Pendelarm befestigte kugelförmige Sonde direkt
über der Kammer befindet.
Heben Sie die Kammer an, bis die Sonde in das Medium eingetaucht und mit der Gewebeoberfläche ausgerichtet ist.
Bringen Sie die Sonde in Kontakt mit der Gewebeoberfläche und ziehen Sie sie dann leicht zurück, um eine freie Pendelbewegung zu ermöglichen und eine präzise Krafteinleitung zu gewährleisten.
Beginnen Sie das Nanoindentationsexperiment, bei dem das Pendel nach vorne schwingt und auf das Gewebe trifft. Dieser Aufprall dringt in die Oberfläche ein und löst durch gedämpftes harmonisches Verhalten eine Schwingungsbewegung aus
.
Messen Sie die Pendelverschiebung und die Geschwindigkeit, um die Eindringtiefe, die Energiedissipation und die Dämpfung zu beurteilen. Diese Messungen zeigen die mechanischen Eigenschaften des Gewebes, wie z. B. Steifigkeit und Elastizität.
Wenn die Aufpralleindringung vollständig eingerichtet ist, aspirieren Sie das Medium und trocknen Sie die Gehirnscheibe. Verwenden Sie dann eine dünne Schicht Cyanacrylat-Kleber, um das geschnittene Gehirn an dem Aluminium-Probenpfosten zu befestigen.
Schieben Sie dann die Flüssigkeitszelle über den zweiten O-Ring auf dem Probenpfosten. Und füllen Sie die Flüssigzelle mit 5 Millilitern kohlendioxidunabhängigem Medium, um das Gewebe vollständig einzutauchen.
Bewegen Sie das Bad in negativer x-Richtung, bis sich die Spitze am Hebelarm richtig über der Badewanne befindet. Bewegen Sie sich dann in positiver z-Richtung, bis die Spitze vollständig in das Bad eingetaucht ist und sich vor der Probe befindet.
Nehmen Sie mit dem Kontrollfenster des Probentisches vorsichtig Kontakt auf und setzen Sie den Tisch dann etwa 30 Mikrometer von der Probenoberfläche weg.
Klicken Sie im Menü "Experiment" auf "Auswirkungen" und richten Sie ein Auswirkungsexperiment ein. Wählen Sie eine bestimmte Impulslast, die sich direkt auf die resultierende Aufprallgeschwindigkeit bezieht, basierend auf der Kalibrierung des Schwenkabstands. Führen Sie dann das geplante Experiment aus.
Wenn das Pendel zurückschwingt und sich die Probenoberfläche weiter in die Messebene bewegt, schalten Sie den unteren Endschalter aus. Die Verschiebung der Sonde in Abhängigkeit von der Zeit wird von der Software aufgezeichnet.