Eine Technik zur Aspiration und Verarbeitung von perkutanen Nebenhodenspermien

Beginnen Sie mit einem männlichen Patienten mit Azoospermie, einer Erkrankung, bei der dem Sperma männliche Keimzellen oder Spermien fehlen.

Der Genitalbereich wird desinfiziert und mit einem Tuch bedeckt, um nur den Hodensack freizulegen, das Organ, in dem sich die Hoden befinden, die Spermien produzieren.

Beleuchten Sie die Region und identifizieren Sie den Nebenhoden, eine Struktur, die für die Reifung und Lagerung von Spermien verantwortlich ist.

Führen Sie eine Spritze mit einer speziellen Kulturlösung für Gameten in das Nebenhodengewebe ein.

Üben Sie Unterdruck aus, während Sie das Gewebe punktieren, um Nebenhodenflüssigkeit zu extrahieren, die Spermien enthält.

Übertragen Sie die gesammelte Flüssigkeit in eine Schale mit der Kulturlösung, um die Lebensfähigkeit der Spermien zu erhalten.

Zählen Sie mit einem Mikroskop die reifen, gesunden Spermien, die Motilität aufweisen.

Füllen Sie die Lösung in ein Röhrchen und zentrifugieren Sie dann, um die Spermien zu trennen und den Überstand zu entfernen.

Resuspendieren Sie die Zellen in einer frischen Kulturlösung.

Die isolierten Spermien sind nun bereit für den Einsatz bei der Behandlung von Unfruchtbarkeit.

Besorge dir zunächst ein Paket mit chirurgischen Instrumenten, zwei Spritzen, Desinfektionslösung, sterile Gummihandschuhe und einen Klebeverband. Untersuchen Sie das Paket der chirurgischen Instrumente, das einer Hochdruckdampfsterilisation unterzogen wurde, auf Beschädigungen. Legen Sie die Verpackung auf den Instrumententisch und öffnen Sie die äußere Schicht. Bitten Sie als Nächstes die Andrologen, sterile Gummihandschuhe anzuziehen.

Öffnen Sie die innere Schicht der Verpackung der chirurgischen Instrumente und überprüfen Sie das Sterilisationsindikatorband auf ordnungsgemäße Sterilisation. Bereiten Sie dann zwei 5-Milliliter-Spritzen vor, die mit 0,7-Milliliter-Nadeln für die Anästhesie und Operation ausgestattet sind. Öffnen Sie die Ampulle mit der Lidocain-Injektion. Verwenden Sie eine sterile 5-Milliliter-Spritze, um die Lidocainlösung abzusaugen und die Luftblasen aus der Spritze zu entfernen.

Positionieren Sie nun den vorbereiteten Patienten in einer Steinschnittposition auf dem Operationstisch. Nachdem Sie die Hose ausgezogen haben, befestigen Sie das Obergewand über dem Bauchnabel, um den Damm und den Unterbauch unterhalb des Bauchnabels vollständig freizulegen. Stellen Sie dann den Winkel der schattenlosen Lampe ein, um den Hodensack des Patienten zu beleuchten.

Verwenden Sie eine ovale Pinzette, um eine sterile Mullkugel zu greifen. Tauchen Sie die Mullkugel vollständig in eine Desinfektionslösung. Und desinfizieren Sie die Haut, beginnend am Unterbauch und in Richtung der vorderen und inneren Oberschenkel, des Dammbereichs, des Penis und des Hodensacks. Legen Sie dann ein steriles quadratisches Handtuch unter das Gesäß des Patienten. Verteilen Sie ein steriles Handtuch um den Operationsbereich und legen Sie den Hodensack im gesamten Bereich vollständig frei.

Mit einer sterilen Pasteur-Pipette ca. 2 Milliliter G-MPOS-PLUS-Kulturlösung in die Kulturschale überführen. Nachdem Sie den Deckel geschlossen haben, geben Sie die Schale durch das Transferfenster an die Krankenschwester im Operationssaal. Stellen Sie nun die Kulturschale auf das sterile Handtuch auf dem Instrumententisch und öffnen Sie den Deckel.

Mit einer weiteren 5-Milliliter-Spritze ca. 0,2 Milliliter G-MPOS-PLUS-Kulturlösung absaugen und die Luftblasen entfernen. Halten Sie dann den Hodensack des Patienten mit der linken Hand fest und sichern Sie den Nebenhoden, der punktiert werden muss. Palpieren Sie den Nebenhoden mit der rechten Hand ab, um die Stelle der chirurgischen Punktion zu bestätigen.

Anschließend mit einer 5-Milliliter-Spritze mit G-MPOS-PLUS-Kulturlösung in der rechten Hand senkrecht zur Haut in das Nebenhodengewebe einstechen. Unter Beibehaltung des Unterdrucks das Nebenhodengewebe wiederholt punktieren, damit Flüssigkeit durch die Nadel eindringen kann, und dann die Einstichnadel zurückziehen.

Injizieren Sie die extrahierte Nebenhodenflüssigkeit in die Kulturschale. Aspirieren Sie danach die nahe gelegene G-MPOS-PLUS-Kulturlösung, um die Spritze zu spülen und die Menge der gesammelten Nebenhodenflüssigkeit zu maximieren. Übertragen Sie nun die Kulturschale mit der G-MPOS-PLUS-Kulturflüssigkeit und der Nebenhodenflüssigkeit durch das Transferfenster an den Embryolabortechniker.

Stellen Sie die Kulturschale auf den Tisch eines inversen optischen Mikroskops und befestigen Sie sie. Schalten Sie den Netzschalter des Mikroskops ein und stellen Sie die Lichtintensität entsprechend ein. Drehen Sie dann den Konverter des inversen optischen Mikroskops. Wählen Sie das 10-fach-Objektiv und drehen Sie die Grob- und Feinfokusspiralen, um die Brennweite einzustellen.

Sobald die Nebenhodenspermien lokalisiert sind, beobachten Sie sie mit 40-facher Vergrößerung, um die Anzahl und Qualität zu beurteilen. Übertragen Sie die Flüssigkeit mit einer sterilen Pasteurpipette aus der Kulturschale in ein 15-Milliliter-Zentrifugenröhrchen, nachdem Sie ausreichend aktive Spermien beobachtet haben. Stellen Sie das Zentrifugenröhrchen auf die Waagenschale und verwenden Sie ein Zentrifugenröhrchen der gleichen Spezifikation, das steriles Wasser enthält, um es zu nivellieren.

Öffnen Sie dann die Zentrifugentür. Setzen Sie die Röhren symmetrisch in den Kartenschlitz ein und schließen Sie die Klappe. Drücken Sie die Start-Taste, um den Zentrifugationsprozess zu starten. Sobald der Vorgang abgeschlossen ist, entfernen Sie das Röhrchen mit der Nebenhodenflüssigkeit aus der Zentrifuge. Aspirieren Sie dann den Überstand vorsichtig mit einer sterilen Pasteurpipette und entsorgen Sie den entnommenen Überstand.

Übertragen Sie das Sediment mit einer sterilen Pasteurpipette vom Boden des Zentrifugenröhrchens in ein neues Zentrifugenröhrchen, das etwa 2 Milliliter G-IVF Plus Kulturlösung enthält. Pipettieren Sie die Lösung vorsichtig, um das Sediment gründlich zu resuspendieren. Übertragen Sie ca. 0,5 Milliliter G-IVF Plus Kulturlösung in das Zentrifugenröhrchen. Blasen Sie die Nebenhodenspermien vorsichtig an der Unterseite an, um sie vollständig aufzuhängen, und verwenden Sie sie für das ICSI-Verfahren.