Biolumineszenz-Bildgebung zur Beurteilung des Tumorwachstums in einem organotypischen Maus-Hirnschnitt

Nehmen Sie eine Multi-Well-Platte, die einen organotypischen Maushirnschnitt mit Tumorzellen enthält. Diese Zellen exprimieren das Enzym Luciferase.

Heben Sie den Einsatz an, um Luciferinlösung in das Medium zu geben, und mischen Sie gut. Setze den Einsatz wieder in die Vertiefung ein.

Das Luciferin dringt in die Tumorzelle ein und wird durch Luciferase oxidiert, wodurch Biolumineszenz emittiert wird.

Platzieren Sie die Platte in der Bildgebungskammer des In-vivo-Bildgebungssystems, das die von der Probe emittierte Biolumineszenz erfassen kann.

Verriegeln Sie die Kammer, um Störungen durch externes Licht zu vermeiden.

Passen Sie die Kameraeinstellungen so an, dass ein einzelnes Well pro Bild aufgenommen wird.

Bewegen Sie den Tisch, um die Vertiefung direkt unter der Kamera zu positionieren.

Optimieren Sie die Erfassungszeit basierend auf der Intensität der emittierten Biolumineszenz.

Definieren Sie die Form des Tumors und beginnen Sie dann mit der Biolumineszenz-Bildgebung.

Quantifizieren Sie das Biolumineszenzsignal, um das Tumorwachstum auf dem Hirnschnitt zu beurteilen.

Pipettieren Sie 5 Mikroliter Luciferinlösung mit 30 Milligramm pro Milliliter in das Medium unter den Einsätzen in eine