JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:40 Min. • June 17th, 2025
Beginnen Sie mit einer Scheibe von Rattenhirngewebe, die auf einem Glasobjektträger montiert und in einen Puffer getaucht ist.
Die Ratte leidet an Tubulinopathie, einer Erkrankung, die durch Defekte im Tubulin, den Bausteinen der Mikrotubuli, verursacht wird, was zu deren abnormaler Anhäufung und Störung führt.
Dies wirkt sich auch auf die Myelinproduktion im zentralen Nervensystem aus.
Legen Sie die Scheibe unter ein abgedecktes Zwei-Photonen-Anregungsmikroskop, um eine detaillierte Bildgebung zu erhalten.
Hydratisieren Sie die Scheibe regelmäßig, um ihre Unversehrtheit zu erhalten.
Stellen Sie das Mikroskop auf einen nicht degescannten Bildgebungsmodus ein, eine markierungsfreie Technik zur Erkennung schwacher Signale.
Setzen Sie das Gewebe einem gepulsten Infrarotlaser aus.
Mikrotubuli emittieren Licht in Form von nachweisbaren Signalen, die als Signale der zweiten harmonischen Generation oder SHG bekannt sind.
Bereiche mit abnormaler Mikrotubuli-Akkumulation verstärken diese Signale und erhöhen ihre Erkennbarkeit.
Wenden Sie optische Filter an, um diese Signale zu verfeinern.
Das aufgenommene Bild zeigt die Dichte und Anomalien der Mikrotubuli, wobei eine hohe SHG-Intensität und Clusterb
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