JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:17 Min. • August 7th, 2025
Sichern Sie eine anästhesierte Maus in einem stereotaktischen Rahmen.
Desinfizieren Sie die rasierte Kopfhaut und machen Sie dann einen Schnitt in der Mittellinie, um den Schädel freizulegen.
Trocknen Sie den Schädel und tragen Sie Wasserstoffperoxid auf, um die Sichtbarkeit des Bregmas zu verbessern.
Suchen Sie bregma und lambda und identifizieren Sie dann die Ziel-Sites.
Bohren Sie vorsichtig durch den Schädel an den Zielstellen.
Befestigen Sie die mit Viren gefüllte Spritze an dem stereotaktischen Instrument.
Das Virus kodiert Cas9 und eine Single-Guide-RNA für die Genomeditierung in Neuronen des Gyrus dentatus sowie einen fluoreszierenden Reporter zur Markierung infizierter Neuronen.
Senken Sie die Spritze ab, um den Gyrus dentatus zu erreichen, und injizieren Sie das Virus dann langsam, um eine gleichmäßige Verteilung zu gewährleisten.
Heben Sie die Spritze allmählich an und wiederholen Sie die Injektion an zusätzlichen Koordinaten.
Halten Sie kurz inne, um einen Rückfluss zu verhindern, und ziehen Sie die Nadel dann langsam zurück.
Wiederholen Sie den Vorgang auf der gegenüberliegenden Hemisphäre.
Zum Schluss nähen Sie den Schnitt.
Das Modell ist nun bereit für weitere Studien.
Rasieren
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