JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:33 Min. • June 17th, 2025
Beginnen Sie mit einem befruchteten Hühnerei mit Fenstern, das einen Embryo im Frühstadium enthält, dessen Neuralrohr auf der Höhe von Somiten eins bis sieben herausgeschnitten wurde.
Entnehmen Sie ein GFP-markiertes Spenderneuralrohr von einem phasenangepassten transgenen Hühnerembryo und implantieren Sie es in die Empfängerin, um die richtige anatomische Ausrichtung zu gewährleisten.
Entfernen Sie überschüssige Flüssigkeit um das Transplantat, um die Adhäsion zwischen dem Spender- und dem Wirtsgewebe zu verbessern.
Versiegeln Sie das Fenster mit durchsichtigem Klebeband, um Austrocknung und Kontamination zu verhindern.
Inkubieren Sie die Eizelle, bis sich der Embryo in das gewünschte Stadium entwickelt hat.
Entfernen Sie das Klebeband.
Identifizieren Sie eine Vitellinvene am Eigelb, die Blut zum Embryo transportiert, und entfernen Sie die darüber liegende Vitellinmembran
.Injizieren Sie mit einer Glasnadel stetig einen lipophilen Fluoreszenzfarbstoff in die Vene.
Visualisieren Sie den Embryo unter einem Stereofluoreszenzmikroskop
.Der injizierte Farbstoff bindet an die Endothelzellen, die die Blutgefäße auskleiden, und hebt das Gefäßnetzwerk hervor, während das GFP-markierte Neuralrohr di
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