Intranasale mesenchymale Stammzellabgabe in einem Mausmodell für traumatische Hirnverletzungen

Beginnen Sie mit einer betäubten Maus mit einem Schädel-Hirn-Trauma.

An der Verletzungsstelle lösen axonale Demyelinisierung und neuronale Schädigung die Freisetzung von proinflammatorischen Zytokinen aus.

Sichern Sie die Maus und geben Sie intranasal ein proteolytisches Enzym ab.

Positionieren Sie dann die Maus für kurze Zeit mit der Vorderseite nach oben und wiederholen Sie die Enzymabgabe.

Die proteolytischen Enzyme bauen die extrazelluläre Matrix in den Nasenepithelien ab und erhöhen die Zellpermeabilität.

Verabreichen Sie dann intranasal die markierte mesenchymale Stammzelle oder MSC-Lösung.

Halten Sie den Kopf der Maus eine Weile aufrecht, um eine vorzeitige Drainage zu verhindern und die MSC-Aufnahme in das Nasengewebe zu ermöglichen.

Wiederholen Sie den MSC-Liefervorgang.

Lassen Sie die Maus wiederherstellen.

Die chemotaktischen Signale von proinflammatorischen Zytokinen leiten MSCs an, von der Nasenhöhle zur Stelle der Hirnverletzung zu wandern.

An der Verletzungsstelle sezernieren MSCs neurotrophe Faktoren, die die Remyelinisierung fördern. Dies unterstreicht das neurotherapeutische Potenzial von MSCs für die neuronale Reparatur.

Für die Zellabgabe wird die Maus nach Bestätigung einer fehlenden Reaktion auf das Einklemmen der Zehen geschändet, während der Schädel ruhiggestellt wird. Platzieren Sie die Spitze einer Pipette mit 4 Einheiten Hyaluronidase pro Mikroliter PBS in einem 45-Grad-Winkel in der Nähe der Nase der Maus und verabreichen Sie 3 Mikroliter Hyaluronidase-Suspension in jedes Nasenloch. Legen Sie das Tier fünf Minuten lang mit dem Gesicht nach oben auf ein sauberes Polster, bevor Sie die Behandlung viermal wiederholen, um insgesamt 100 Einheiten Hyaluronidase-Behandlung

zu erhalten.

Setzen Sie die Maus nach der letzten Behandlung 30 Minuten lang wieder auf das Pad auf, bevor Sie die Maus wie gerade gezeigt fixieren. Verabreichen Sie bei ruhiggestelltem Kopf 3 Mikroliter der mesenchymalen Stammzellsuspension in jedes Nasenloch über einen Zeitraum von drei Sekunden pro Lösungsabgabe und halten Sie die Maus 30 Sekunden lang in Position, bis die Probentropfen vollständig verschwunden sind. Wiederholen Sie die Verabreichung nach zwei Minuten bis zu dreimal, bis das gesamte Volumen der mesenchymalen Stammzellen abgegeben wurde. Setzen Sie dann die Maus wieder in ihren Käfig mit Überwachung zurück, bis sie vollständig liegt.