JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:25 Min. • June 17th, 2025
Beginnen Sie mit einer mit Silikonelastomer beschichteten Versuchskammer, in der sich ein gesicherter Mausmuskel befindet, der unter einem konfokalen Mikroskop positioniert ist.
Der Muskel wird in eine physiologische Lösung getaucht, die Inhibitoren enthält, die die Muskelkontraktionen blockieren.
Der mit einem fluoreszierenden Kalziumfarbstoff markierte Nervenstumpf befindet sich im Inneren der Saugelektrode, die mit einem elektrischen Stimulator verbunden ist.
An der neuromuskulären Verbindung ist der periphere Nerv mit dem Muskel verbunden.
Üben Sie mit der Elektrode einen elektrischen Reiz auf den Nerv aus. Dies löst einen schnellen Einstrom von Kalziumionen aus, die an intrazellulären Kalziumfarbstoff binden
.Beleuchten Sie die neuromuskuläre Verbindung, um den Kalziumfarbstoff anzuregen, wodurch er fluoresziert.
Nehmen Sie dann hochauflösende Bilder auf, um schnelle Kalziumtransienten in den peripheren Nervenenden aufzuzeichnen.
Wählen Sie den interessierenden Bereich aus und messen Sie die Fluoreszenzintensität.
Ein rascher Anstieg der Fluoreszenzintensität deutet auf einen Kalziumeinstrom an den peripheren Nervenenden hin, während eine Abnahme die Kalziumclearance widerspiegelt.
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