JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:56 Min. • August 7th, 2025
Nehmen Sie eine anästhesierte Maus mit freiliegenden L4- und L5-Spinalwurzelganglien, die sensorische Neuronenzellkörper enthalten.
Bestücken Sie eine Mikroinjektionspipette mit Fluorophor-markierten RNA-Konstrukten, die die Axonregeneration regulieren, und einem Tracerfarbstoff.
Das Gemisch in die DRGs injizieren.
Wenden Sie mit Elektroporationselektroden elektrische Impulse an die DRGs an.
Dadurch werden die Membranen der sensorischen Neuronenzellkörper gestört und Poren geschaffen, die es den Konstrukten ermöglichen, in das Zytoplasma einzudringen und die Transfektion zu erleichtern.
Nähen Sie den Schnitt und lassen Sie die Maus sich erholen.
Betäuben Sie die Maus nach einigen Tagen erneut und sichern Sie sie.
Machen Sie einen Schnitt lateral der Mittellinie auf der linken Seite. Präpariere die Muskeln, um den Ischiasnerv freizulegen.
Zerquetschen Sie den Nerv, um sensorische Neuronenaxone zu verletzen. Markieren Sie die Stelle mit einem Nahtknoten.
Nähen Sie den Schnitt und lassen Sie die Maus sich erholen.
Die transfizierten Konstrukte zielen auf mRNAs in den sensorischen Neuronenzellkörpern der DRG ab und modulieren vorübergehend die Proteinproduktion, um die regeneration der sensorisc
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