JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:22 Min. • June 17th, 2025
Legen Sie eine Petrischale mit einem betäubten Zebrafisch mit einem Schlauch in den Mund, um sauerstoffreiches Wasser abzugeben, unter die Objektivlinse des Drei-Photonen-Mikroskops mit geringer Vergrößerung.
Das Gehirn des Zebrafisches enthält genetisch veränderte Neuronen, die fluoreszenzmarkierte Proteine exprimieren, um während der Bildgebung das tiefe Gewebe sichtbar zu machen.
Beleuchten Sie die Schüssel mit einer LED-Lichtquelle und passen Sie die Visualisierungsparameter für eine deutliche Bildschärfe an.
Senken Sie die Objektivlinse, bis der Zebrafisch sichtbar ist, und zentrieren Sie seinen Kopf im Sichtfeld.
Ersetzen Sie das Objektiv mit geringer Vergrößerung durch ein hochauflösendes Objektiv für die Drei-Photonen-Bildgebung.
Senken Sie das Objektiv vorsichtig ab, bis der Kopf ohne physischen Kontakt sichtbar ist, und stellen Sie die Achsenwerte auf Null.
Schalten Sie die LED-Lichtquelle aus und schließen Sie den dunklen Vorhang, um Hintergrundgeräusche zu minimieren.
Stellen Sie die Bildgebungsparameter ein und führen Sie eine Drei-Photonen-Bildgebung durch, bei der längere Wellenlängen eine Drei-Photonen-Anregung im tiefen Gewebe ermöglichen.
Bei Anregung emittieren neuronale
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