Induktion einer Verletzung des Nervus fibularis bei einer Maus zur Untersuchung der Regeneration neuromuskulärer Verbindungen

Legen Sie eine narkotisierte Maus mit einem rasierten Hinterbein unter ein Operationsmikroskop.

Schneiden Sie die Haut am rasierten Bein ein und schneiden Sie dann durch die Bindegewebsschichten, um die darunter liegenden Muskeln freizulegen.

Trennen Sie mit Retraktoren die Muskeln, um den Nervus fibularis communis freizulegen.

Der Nerv enthält Motoneuronen, deren Axonendigungen sich mit Muskelfasern zu neuromuskulären Verbindungen oder NMJs verbinden.

Lokalisieren Sie den Schnittpunkt des Nervs mit der Sehne des Musculus gastrocnemius im Knie.

Halten Sie den Nerv mit einer Zange fest und üben Sie Druck aus, um eine Verletzung herbeizuführen.

Eine durchscheinende Verletzungsstelle weist auf eine axonale Schädigung hin, die zu einer NMJ-Beeinträchtigung führt.

Stellen Sie sicher, dass die äußere Epineuriumschicht des Nervs intakt ist, um die axonale Regeneration zu steuern.

Entfernen Sie die Retraktoren und richten Sie die Muskeln neu aus. Vernähen Sie die Inzisionsstelle und lassen Sie die Maus sich erholen.

Signale von den geschädigten Axonen rekrutieren Makrophagen, um axonale Trümmer zu beseitigen, was die axonale Regeneration und die Wiederherstellung von NMJs unterstützt.

Legen Sie die Maus auf die Operationsplatte und bestätigen Sie, dass die Reaktion auf das Einklemmen der Zehen ausbleibt. Richten Sie die Gliedmaßen innerhalb der Fesseln aus, wobei sich die Zielgliedmaße in einer anatomisch natürlichen Position befindet und das Kniegelenk ohne Innen- oder Außendrehung leicht gestreckt ist.

Übertragen Sie das Tier dann unter ein Operationsmikroskop. Und passen Sie das Brett so an, dass das knöcherne Kniegelenk und der Kamm zwischen dem Musculus tibialis anterior und dem Musculus gastrocnemius durch das Objektiv sichtbar sind. Machen Sie mit einem Skalpell und einer Pinzette einen etwa drei Zentimeter großen Schnitt durch die Haut senkrecht zum darunter liegenden Verlauf des Nervus fibularis. Setzen Sie den Schnitt durch die oberflächliche Faszie fort, legen Sie den Bizeps femoris und den Musculus vastus lateralis frei, gefolgt von einem 1 bis 2 Zentimeter langen Schnitt durch die verbindende tiefe Faszie, um die Muskeln zu trennen.

Als nächstes verwenden Sie mechanische Retraktoren, um den Musculus biceps femoris kaudal zurückzubilden, um den Nervus fibularis communis freizulegen. Verfolgen Sie den Nerv proximal, bis sich sein Schnittpunkt mit der Sehne des lateralen Kopfes des Musculus gastrocnemius befindet. Fassen Sie dann mit einer feinen Pinzette den Nerv und richten Sie die Spitzen parallel zum lateralen Rand der Gastrocnemiussehne aus. Und üben Sie 5 Sekunden lang gleichmäßigen, konzentrierten Druck aus, um den Nervus fibularis communis zu zerquetschen.

Halten Sie die Pinzette senkrecht zur Faser und fassen Sie das Gewebe mit dem Bereich direkt hinter der Spitze der Pinzette. Und üben Sie festen, aber sanften Druck aus, um den Nerv entlang der Grenze der Sehne sauber zu quetschen.

Untersuchen Sie den Nerv visuell durch das Operationsmikroskop, um eine vollständige Quetschung des Gewebes zu bestätigen. Der Nerv erscheint an der Verletzungsstelle durchscheinend. Wenn der Nerv ausreichend geschädigt ist, entfernen Sie die Retraktoren. Und richten Sie die Muskeln in ihren anatomischen Positionen neu aus. Verwenden Sie dann 6-0 Seidennähte, um die Inzisionsstelle mit ein bis drei einfachen, unterbrochenen Nähten zu verschließen, und legen Sie die Maus auf ein Heizkissen in einem sauberen Käfig mit Überwachung, bis sie vollständig wiederhergestellt ist.