The Tail Suspension Test-

Der Test der Heckaufhängung ist ein gängiger Verhaltenstest, der verwendet wird, um die Wirksamkeit von Antidepressiva durch verschiedene experimentelle Manipulationen vorherzusagen. Dieser Film zeigt die Vorgehensweise dieses Tests. Der Test der Schwanzaufhängung ist für die Maus validiert und wird für größere Nagetiere nicht empfohlen.

Bei der Schwanzaufhängung werden die Mäuse an ihren Schwänzen aufgehängt. Die Maus bleibt sechs Minuten lang in der Schwebe. Während dieser Zeit wird das Verhalten des Probanden aufgezeichnet.

Am Ende der sechsminütigen Testphase wird das Klebeband vom Schwanz des Probanden entfernt. Nach Abschluss des Tests werden die visuellen Aufzeichnungen auf einen Computer oder Videomonitor übertragen. Für die Analyse misst ein Beobachter die Zeit, die eine Maus während der gesamten sechsminütigen Sitzung mit Kämpfen verbringt.

Verbindungen mit antidepressiven Eigenschaften verlängern die Zeit, die ich mit dem Kämpfen verbringe. Dies spiegelt sich in kürzeren Zeiträumen der Immobilität wider. Zum Beispiel haben wir berichtet, dass das stimmungsstabilisierende Medikament Lithium, das klinisch nützlich als zusätzliches Antidepressivum ist, die Immobilitätszeit im Schwanzfederungstest verringerte.

Hallo, mein Name ist Sean aus dem Labor von Dr. Todd Gould in der Abteilung für Psychiatrie an der University of Maryland School of Medicine in Baltimore. Hallo, ich bin Chantel aus dem gleichen Labor. In diesem Video zeigen wir Ihnen, wie Sie den Test der Hinterradaufhängung durchführen und bewerten.

Der Tail Suspension Test wird verwendet, um die potenzielle Wirksamkeit von Antidepressiva-Behandlungen zu bewerten. Gehen wir also ins Labor und zeigen Ihnen, wie Sie das Experiment durchführen. Obwohl nicht erforderlich, verwenden wir eine speziell entwickelte Heckfederung.

Für diesen Test. Unsere Heckaufhängung ist in vier Fächer unterteilt, die jeweils für eine einzelne Maus reserviert sind. Die Trennwände verhindern, dass sich die Mäuse während des Tests gegenseitig beobachten.

Es ist jedoch möglich, ein Regal oder eine andere Struktur zu verwenden, um die Mäuse aufzuhängen. Die Abmessungen der Testbox für die Schwanzaufhängung sind so gewählt, dass verhindert wird, dass die Mäuse an die Kanten gelangen und sich daran festhalten. Schneiden Sie vor Beginn des Experiments genügend Klebebandfragmente ab und markieren Sie das Segment, das für die Haftung am Schwanz verwendet werden soll.

In unserem Labor werden wir 17 Zentimeter große Bandfragmente verwenden. Zwei Zentimeter vom Ende dieses Klebebandfragments entfernt sollte markiert werden und wird zum Anhaften am Schwanz verwendet. Wir platzieren den Schwanz in der Mitte dieses zwei Zentimeter großen Abschnitts.

Positionieren Sie die Prüfbox für die Hinterradaufhängung und die Videokamera. Vor dem Einsetzen der Tiere sollte die Box gründlich mit einer Sterilisationslösung gereinigt werden, um die Gerüche der vorherigen Probanden zu neutralisieren. In unserem Labor verwenden wir zwei verschiedene Heckaufhängungskästen, die in jedem Aspekt bis auf die Farbe identisch sind.

Bei Albino-Mäusen sorgt ein dunkelgrauer Kasten für einen guten Kontrast bei Videoaufnahmen. Für dunklere Mausstämme ist ein weißes Feld geeignet. Starten Sie die Maschine mit weißem Rauschen.

Es sollte alle intermittierenden Geräusche überdecken. Bringen Sie die Mäuse in den Eingriffsraum, um sich zu akklimatisieren. Die Bedingungen im Raum sollten konstant und frei von Geräuschen, Änderungen des Lichtverhältnisses und anderen möglichen Störungen gehalten werden.

Dieser Zeitraum beträgt in der Regel mindestens eine Stunde. Nach Ablauf der Eingewöhnungsphase kann der Test fortgesetzt werden, um zu verhindern, dass bestimmte Mäusestämme ihre Schwänze erklimmen. Beim Test der Heckaufhängung verwenden wir Kunststoffzylinder, die wir über das Heck legen.

Diese Zylinder ruhen während des Tests an der Basis ihres Hecks. In unserem Labor verwenden wir Kunststoffzylinder, die vier Zentimeter lang, einen Zentimeter im Durchmesser und 1,5 Gramm schwer sind. Wenn Kunststoffzylinder verwendet werden, um ein Klettern zu verhindern, sollten diese vor dem Anbringen des Bandes auf die Schwänze gelegt werden.

Wir kleben das Klebeband ganz am Ende des Schwanzes an, wobei zwei bis drei Millimeter des Schwanzes außerhalb des Bandes verbleiben. Kleben Sie das Klebeband an die Schwänze der Mäuse in ihrem Heimkäfig. Verwenden Sie das markierte Ende des Klebebandes und stellen Sie sicher, dass das Klebeband am Ende und wieder an sich selbst haftet.

Sobald das Klebeband angebracht ist, befestigen Sie jede Maus an den Wänden des Käfigs, um ein Verheddern des Klebebandes an verschiedenen Tieren zu verhindern. Schließen Sie diesen Vorgang schnell ab. Andernfalls werden die Mäuse unnötigem Stress ausgesetzt.

Die Aufzeichnung sollte gestartet werden, bevor die Tiere aufgehängt werden. Hängen Sie die Tiere auf, indem Sie das freie Ende des Bandes in einer Reihenfolge auf die Aufhängestange legen, die zwischen den Behandlungsgruppen ausbalanciert ist und die Sicht der Kamera nicht behindert. Da die Mäuse einzeln aufgehängt werden, hat jedes Tier eine leicht unterschiedliche Startzeit für den Test.

Stellen Sie sicher, dass Sie jede Maus genau zu Beginn ihres Ruhezustands bewerten. Es ist wichtig, die Sicht der Kamera nicht zu behindern. Da die gesamte Sitzung der Hinterradaufhängung als Hindernis gewertet wird, kann die Kameraansicht zu fehlenden Daten führen.

Achten Sie darauf, dass alle Bandenden senkrecht zur Aufhängestange mit der gleichen Spiellänge verlaufen. Starten Sie für jedes Fach den Timer. Der Test der Heckfederung dauert sechs Minuten.

Nach Ablauf der sechsminütigen Testphase entfernen Sie das Klebeband vom Ende jedes Schwanzes und bringen die Mäuse in ihren Heimatkäfig zurück. Am Ende des Tests sollten die Probandeninformationen auf Video aufgezeichnet werden. Nachdem die Mäuse in den Kolonieraum zurückgebracht wurden, sollte die Testbox gründlich gereinigt und mit einer Sterilisationslösung abgewischt werden.

Nachdem wir mit den Tests fertig sind, werden wir uns mit der Bewertung der Verhaltensweisen befassen. Die einzige Variable, die in der Regel bei der Bewertung des Schwanzaufhängungstests bewertet wird, ist die Zeit, in der die Tiere unbeweglich sind. Um die Immobilitätszeit zu erhalten, messen wir die Zeit, in der die Mäuse mobil sind, und ziehen diese von der sechsminütigen Testzeit ab. Wir werden die gesamten sechs Minuten des Tests bewerten.

Wir behandeln zunächst die Mäuse, die nicht bewertet werden, damit sich der Beobachter bei jeder Maus nur auf ein Tier konzentrieren kann. Das Mobiltelefon wird mit einer Stoppuhr auf dem Bildschirm gemessen, die von einem Gamepad-Gerät gesteuert wird. Hier gibt es, wie Sie sehen können, zwei separate Stoppuhren auf dem Bildschirm, die gleichzeitig gesteuert werden.

Die erste Stoppuhr zählt ab 360 Sekunden herunter und zeigt dem Betrachter die Testdauer an. Die zweite Stoppuhr misst die Zeit, die die Probanden mobil bleiben. Wie Sie vielleicht bemerken, wird die zweite Stoppuhr von der ersten Stoppuhr verdeckt und nur ihre Millisekunden-Dezimalstellen sind für den Betrachter sichtbar.

Auf diese Weise kann der Beobachter sehen, ob die Stoppuhr zählt, aber die gesamte Mobilitätszeit kann nicht sehen, bis die Bewertung abgeschlossen ist. Wir tun dies, um zu verhindern, dass Beobachterverzerrungen die Ergebnisse beeinflussen. Mäuse, besonders zu Beginn der Sitzung, zeigen Verhaltensweisen, die mit der Flucht in Verbindung stehen.

Zu diesen Verhaltensweisen gehören der Versuch, die Wände des Geräts und der Aufhängestange zu erreichen, starkes Schütteln des Körpers und Bewegungen der Gliedmaßen, die dem Laufen ähneln. Diese Bewegungen stellen eindeutig Mobilität dar. Im Laufe des Tests werden die Bewegungen jedoch subtiler.

In unserem Labor zählen wir die kleinen Bewegungen, die sich auf die Vorderbeine, aber ohne jegliche Bewegung der Hinterbeine beschränken, nicht zur Beweglichkeit. Zusätzlich zu diesem pendelartigen Schwung, der auf den Impulsgewinn während der vorangegangenen Mobilitätsanfälle zurückzuführen ist, gelten nicht als Mobilität. Sehen wir uns nun die Bewertung einer tatsächlichen Testsitzung für die Hinterradaufhängung an.

Die Immobilitätszeit, nicht die Mobilitätszeit, wird im Allgemeinen angegeben. Die Immobilitätszeit kann berechnet werden, indem die gesamte Mobilitätszeit von der Testzeit von 360 Sekunden subtrahiert wird. Vertonung. Der Heckfederungstest erfordert Training und Übung.

Es ist wichtig, einen internen Laborstandard zu etablieren und neue Beobachter zu schulen, bis sie ein hohes Maß an Zuverlässigkeit erreichen. In diesem Artikel erklären wir, wie Sie den Test der Hinterradaufhängung durchführen und bewerten. Viel Glück bei Ihren zukünftigen Experimenten.