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DOI: 10.3791/4131-v
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Ein spektrofluorometrischen Protokoll für die Messung der mitochondrialen Permeabilitätsübergang Porenöffnung in isolierten Maus-Mitochondrien wird hier vorgestellt. Der Assay umfasst die gleichzeitige Messung von Mitochondrien Ca
Das Ziel dieses Videos ist es, ein Verfahren zur Charakterisierung des mitochondrialen Permeabilitätsübergangs zu beschreiben. Schlechte Öffnung in den Mitochondrien, isoliert aus dem Mausherz. Zunächst werden Mitochondrien aus Mäuseherzen isoliert.
Mit der Differenzialzentrifugationsmethode wird dann die Qualität der isolierten Mitochondrien mit einer oxythermischen Sauerstoffelektrode beurteilt, die mit einem Computer verbunden ist, um das Atmungskontrollverhältnis zu messen und die Integrität der Mitochondrienmembran zu bewerten. Anschließend wird mit spektrofluormetrischen Instrumenten die gleichzeitige Messung der Kalziumhandhabung, des mitochondrialen Membranpotentials und des mitochondrialen Volumens verwendet, um den Permeabilitätsübergang zu bestimmen. Schlechte Eröffnung.
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