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DOI: 10.3791/55992-v
Lauren A. Biwer1,2, Christophe Lechauve3, Sheri Vanhoose4, Mitchell J. Weiss3, Brant E. Isakson1,2
1Department of Molecular Physiology and Biophysics,University of Virginia School of Medicine, 2Robert M. Berne Cardiovascular Research Center,University of Virginia School of Medicine, 3Department of Hematology,St. Jude Children's Research Hospital, 4Research Histology Core,University of Virginia School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Eine Kultur Zellmodell der Widerstand Arterien wird beschrieben, so dass für die Zerlegung der Signalwege im Endothel, glatte Muskulatur, oder zwischen Endothel und glatte Muskulatur (der Myoendothelial-Kreuzung). Die selektive Anwendung des Agonisten oder Protein isoliert, Elektronenmikroskopie oder Immunfluoreszenz kann mit diesem Handy-Kultur-Modell genutzt werden.
Das übergeordnete Ziel dieser Technik ist es, endotheliale und glatte Muskelzellen in-vitro zusammen zu kultivieren, um myoendotheliale Verbindungen zu schaffen, die in Widerstandsarterien mit kleinem Durchmesser auftreten. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im kardiovaskulären Bereich zu beantworten, wie z.B. die Lokalisierung von Proteinen und die Aktivierung von Signalkaskaden in der arteriellen Wand. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass Sie myoendotheliale Übergangsfraktionen spezifisch aus dem Endothel und der glatten Muskulatur isolieren können, was mit einer echten Arterie unmöglich ist.
visuelle Demonstration einer Paraffineinbettung ist besonders wichtig, da die Einbettungsschritte schwer zu erlernen sein können, ohne den Prozess zu sehen. Beginnen Sie mit dem Aufbau der vaskulären Zell-Co-Kultur oder VCCC, indem Sie 150-Millimeter-Petrischalen und -deckel mit Desinfektionsmittel besprühen und dann mit einem Papiertuch oder fusselfreien Tüchern abwischen. Besprühen Sie dann die Petrischalen mit 70% Ethanol und legen Sie sie zum Trocknen an der Luft in die Haube.
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