Name: Eine morphometrische und zelluläre Analysemethode für das Murine mandibulares Kondylus (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-11T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 7 s
Description: Lernen Sie eine morphometrische und zelluläre Analysemethode für den murinen mandibulären Kondylus. Dieses Protokoll nutzt Röntgenbildgebung und histologische Analyse zur Untersuchung von Kompressionsbelastungseffekten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Die Autoren möchten Dr. David Rowe danken, dass freundlicherweise die transgene Mäuse und Li Chen für die histologische Unterstützung.
Die Forschung berichtet in dieser Publikation wurde vom nationalen Institut der Dental & Craniofacial Forschung von den National Institutes of Health unter Preis Anzahl K08DE025914 und der amerikanischen Vereinigung der kieferorthopädischen Foundation zur Sumit Yadav unterstützt.

<ol><li>LeResche, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+Temporomandibular+Disorders%3A+Implications+for+the+Investigation+of+Etiologic+Factors%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Oral+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of Temporomandibular Disorders: Implications for the Investigation of Etiologic Factors.</a> Crit Rev Oral Biol Med. 8 (3), 291-305 (1997).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+functional+loading+causes+differential+effects+in+the+subchondral+bone+and+condylar+cartilage+in+the+temporomandibular+joint+from+young+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthr+Cartil%22%5BJournal%5D)">Altered functional loading causes differential effects in the subchondral bone and condylar cartilage in the temporomandibular joint from young mice.</a> Osteoarthr Cartil. 17 (3), 354-361 (2009).</li>
<li>Pirttiniemi, P., Kantomaa, T., Sorsa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+decreased+loading+on+the+metabolic+activity+of+the+mandibular+condylar+cartilage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Orthod%22%5BJournal%5D)">Effect of decreased loading on the metabolic activity of the mandibular condylar cartilage in the rat.</a> Eur J Orthod. 26 (1), 1-5 (2004).</li>
<li>Chavan, S. J., Bhad, W. A., Doshi, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+temporomandibular+joint+changes+in+Twin+Block+and+Bionator+appliance+therapy%3A+a+magnetic+resonance+imaging+study%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Orthod%22%5BJournal%5D)">Comparison of temporomandibular joint changes in Twin Block and Bionator appliance therapy: a magnetic resonance imaging study.</a> Prog Orthod. 15 (57), (2014).</li>
<li>Dutra, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+Matrix+Response+of+the+Mandibular+Condylar+Cartilage+to+Botulinum+Toxin%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Cellular and Matrix Response of the Mandibular Condylar Cartilage to Botulinum Toxin.</a> PLoS ONE. 11 (10), 0164599(2016).</li>
<li>Benjamin, M., Ralphs, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+of+fibrocartilage+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Cytol%22%5BJournal%5D)">Biology of fibrocartilage cells.</a> Int Rev Cytol. 233, 1-45 (2004).</li>
<li>Shen, G., Darendeliler, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Adaptive+Remodeling+of+Condylar+Cartilage-+A+Transition+from+Chondrogenesis+to+Osteogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Res%22%5BJournal%5D)">The Adaptive Remodeling of Condylar Cartilage- A Transition from Chondrogenesis to Osteogenesis.</a> J Dent Res. 84 (8), 691-699 (2005).</li>
<li>Utreja, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+and+matrix+response+of+temporomandibular+cartilage+to+mechanical+loading%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthr+Cartil%22%5BJournal%5D)">Cell and matrix response of temporomandibular cartilage to mechanical loading.</a> Osteoarthr Cartil. 24 (2), 335-344 (2016).</li>
<li>Kaul, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effect+of+Altered+Loading+on+Mandibular+Condylar+Cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Effect of Altered Loading on Mandibular Condylar Cartilage.</a> PLoS ONE. 11 (7), 0160121(2016).</li>
<li>Dyment, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Throughput%2C+Multi-Image+Cryohistology+of+Mineralized+Tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">High-Throughput, Multi-Image Cryohistology of Mineralized Tissues.</a> J Vis Exp. , e54468(2016).</li>
<li>Kawamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+new+adhesive+film+for+the+preparation+of+multi-purpose+fresh-frozen+sections+from+hard+tissues%2C+whole-animals%2C+insects+and+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Histol+Cytol%22%5BJournal%5D)">Use of a new adhesive film for the preparation of multi-purpose fresh-frozen sections from hard tissues, whole-animals, insects and plants.</a> Arch Histol Cytol. 66 (2), 123-143 (2003).</li>
<li>Hayman, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tartrate-resistant+acid+phosphatase+%28TRAP%29+and+the+osteoclast%2Fimmune+cell+dichotomy%5BTitle%5D)+AND+%22Autoimmunity%22%5BJournal%5D)">Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) and the osteoclast/immune cell dichotomy.</a> Autoimmunity. 41 (3), 218-223 (2008).</li>
</ol>

Die Autoren haben keinen finanziellen Interessenkonflikt.

Dieses Manuskript beschriebenen Verfahren zur Messung der morphometrische und zelluläre Analyse der murinen mandibulares Kondylen und Mandibeln. Die radiologischen morphometrische Maße können auch verwendet werden, andere Knochen aus kleinen Versuchstieren zu analysieren. Darüber hinaus die zelluläre Analyse (Zelle Quantifizierung und Knorpel Entfernung Zuordnung) beschränken sich nicht auf das Nagetier mandibulares Kondylus, sondern kann zur histologischen Abschnitte von zahlreichen Geweben zu quantifizieren.
<p cla...

Kiefergelenk ist ein einzigartiges tragende Gelenk in der kraniofazialen Region gelegen und besteht aus Faserknorpel gebildet. Die MCC des Kiefergelenks ist unerlässlich für die Funktion der Gelenke, einschließlich ungehindert Kieferbewegung beim sprechen und arbeiten, aber es ist häufig von degenerativen Erkrankungen wie Arthrose1betroffen. Kiefergelenk hat die Fähigkeit zur Anpassung an äußere Reize und laden Umbauten, führt zu strukturellen und zellulären Veränderungen auf die Komponenten des MCC2,3,4,5. Die tragenden Eigenschaften des MCC lässt sich durch die Wechselwirkungen zwischen seinen Bestandteilen, einschließlich Wasser, das Kollagennetz und dicht gepackte Proteoglykane. Der MCC hat vier verschiedene zelluläre Zonen, die verschiedene Arten von Kollagen und nicht-Kollagen Proteine ausdrücken: 1) der oberflächlichen oder artikuläre Zone; (2) die proliferative Zone, bestehend aus undifferenzierten mesenchymalen Zellen und das reagiert auf Anforderungen laden; (3) die prehypertrophic Zone, bestehend aus Reife Chondrozyten Kollagen Typ 2 zum Ausdruck zu bringen; und 4) die hypertrophen zone, die Region, wo die hypertrophen Chondrozyten auszudrücken Kollagen Typ 10 sterben, und Verkalkung zu unterziehen. Die nicht mineralisierten Region ist reich an Proteoglykanen, die Resistenz gegen Druckkräfte6zur Verfügung zu stellen.
Gibt es kontinuierliche Mineralisierung in der hypertrophen Zone des MCC, wo der Übergang von werden zur Osteogenesis auftritt, garantiert die robuste mineralische Struktur des subchondralen Knochens des Unterkiefers Kondylus7. Zellveränderungen in den Regionen Latein und mineralisierten führen letztlich zu morphologischen und strukturelle Veränderungen in den Unterkiefer Kondylus und Unterkiefer. Aufrechterhaltung der Homöostase der alle zellulären Regionen des MCC und die Mineralisierung des subchondralen Teils sind unerlässlich für die Gesundheit, die Tragfähigkeit und die Integrität des Kiefergelenks.
Die mehrere Kollagen transgenen Mausmodell (wie von Utreja Et Al.beschrieben) 8 ist ein großartiges Werkzeug verwenden, um Veränderungen im Kollagen Ausdruck zu verstehen, weil alle transgene im MCC ausgedrückt werden. Für eine eingehende histologische Bewertung werden histologische Flecken zur Matrix Deposition, Mineralisierung, Zellproliferation, Apoptose, sowie Protein-Expression in den verschiedenen Zellschichten des MCC zu studieren.
In diesem werden Manuskript, histologische und morphometrische Analysen zur zelluläre und strukturelle Veränderungen in der MCC und subchondralen Knochen des Unterkiefers Kondylus von Mäusen zu bewerten. Darüber hinaus wird eine Zelle Quantifizierungsmethode, für die Analyse von fluoreszierenden histologische Bilder und für die Zuordnung von leichten Objektträger, beschrieben. Zusammenpressende statische Kiefergelenk laden-Methode, die zelluläre und morphologische Veränderungen an der MCC und subchondralen Knochen9verursacht, wird auch veranschaulicht, um unsere Methoden zu überprüfen.
Die hier beschriebenen Methoden einsetzbar, morphometrische und histologische Veränderungen im Unterkiefer Kondylus und Unterkiefer von Nagetieren zu bestimmen oder zu anderen Regionen der Endochondral Verknöcherung und die Morphologie der zusätzlichen mineralisierten Gewebe zu analysieren.

<table><tbody><tr><td>MX20 Röntgensystem</td><td>Faxitron X-Ray LLC&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Digimizer Image-Software&nbsp;</td><td>MedCalc Software</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Shandon Kryomatrix Einbettungsharz</td><td>Thermo Scientific</td><td>6769006</td><td></td></tr><tr><td>Manuelles Mikroskop Axio Imager Z1</td><td>Carl Zeiss</td><td>208562</td><td></td></tr><tr><td>gelb fluoreszierender Proteinfilter&nbsp; - EYFP</td><td>Chroma Technology Corp</td><td>49003</td><td></td></tr><tr><td>cyan fluoreszierender Proteinfilter - ECFP</td><td>Chroma Technology Corp</td><td>49001</td><td></td></tr><tr><td>roter fluoreszierender Proteinfilter - Cy5</td><td>Chroma Technology Corp</td><td>49009</td><td></td></tr><tr><td>Natriumacetat wasserfrei</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2889</td><td></td></tr><tr><td>Natrium-L-Tartrat dibasisches Dihydrat&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>228729</td><td></td></tr><tr><td>Natriumnitrit&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>237213</td><td></td></tr><tr><td>ELF97 Substrat</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>E6600</td><td></td></tr><tr><td>ClickiT EdU Alexa Fluor 594 HCS Kit</td><td>Life Technologies</td><td>C10339&nbsp;</td><td>enthält EdU (5-Ethinyl-2'-desoxyuridin)&nbsp;</td></tr><tr><td>DAPI (4',6-Diamidino-2-phenylindole, Dihydrochlorid)</td><td>Thermo Scientific</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Natriumphosphat zweibasisch&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3264</td><td></td></tr><tr><td>Natriumphosphat monobasisch&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71505</td><td></td></tr><tr><td>Toluidinblau O&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T3260</td><td></td></tr><tr><td>Adobe Photoshop&nbsp;</td><td>Adobe Systems Incorporated</td> Phosphatgepufferte Kochsalztabletten (PBS)Research Products <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>International</td><td>P32080-100T</td><td></td></tr><tr><td>CNA Beta III Nickelfreier Bogen</td><td>Ortho Organizers, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prisma</td><td>GraphPad Software, Inc.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

eine morphometrische und zelluläre analysemethode für das murine mandibulares kondylus

A Morphometric and Cellular Analysis Method for the Murine Mandibular Condyle

Das Kiefergelenk (TMJ) hat die Fähigkeit zur Anpassung an äußere Reize und laden Änderungen beeinflussen die Position der Kondylen sowie die strukturelle und zellulären Komponenten des Unterkiefers kondylären Knorpels (MCC). Dieses Manuskript beschreibt Methoden für die Analyse dieser Veränderungen und eine Methode für das Laden des Kiefergelenks in Mäusen (d. h. zusammenpressende statische TMJ laden) zu verändern. Die strukturellen Bewertung hier abgebildete ist eine einfach morphometrische Ansatz, der nutzt die Digimizer-Software und wird in Röntgenaufnahmen kleiner Knochen durchgeführt. Darüber hinaus die Analyse der zellulären ändert führt zu Veränderungen im Kollagen Ausdruck, Knochenaufbau, Zellteilung und Proteoglykan Verteilung im MCC beschrieben. Die Quantifizierung dieser Änderungen in histologischen Abschnitten - durch zählen der positiven fluoreszierenden Pixeln mit Software und messen die Entfernung Zuordnung von Bildern und gefärbten Bereich mit Digimizer - wird auch demonstriert. Die hier gezeigten Methoden beschränken sich nicht auf das murine TMJ, aber auf zusätzliche Knochen der kleinen Versuchstieren und in anderen Regionen der Endochondral Verknöcherung verwendet werden konnte.

Deskriptive Statistik wurden durchgeführt, um die Verteilung der morphometrische Maße (mandibularis Länge, kondylären Länge, kondylären Breite) und histologische Analysen untersuchen. Ergebnisse wurden im Vergleich zwischen den geladen (z.B. Mäuse ausgesetzt zusammenpressende Belastung mit der Beta-Titan-Feder) und Kontrollgruppe (z.B. passende Kontroll-Mäusen, die keinem Eingriff erhalten haben). Statistisch signifikante Unterschiede zwischen den waren bestimmt durch un...

Dieses Manuskript stellt Methoden für die Analyse morphometrische und zelluläre Veränderungen innerhalb des Unterkiefers Kondylus von Nagetieren.

Eine morphometrische und zelluläre Analysemethode für das Murine mandibulares Kondylus

The temporomandibular joint (TMJ) has the capacity to adapt to external stimuli, and loading changes can affect the position of condyles, as well as the ...

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments besteht darin, die Auswirkungen mechanischer Druckbelastung im knorpeligen Kiefergelenkköpfchen von Mäusen mithilfe morphometrischer Messungen in Röntgenaufnahmen und histologischer Analysen zu untersuchen. Diese Messgrößen können helfen, zentrale Fragen zu strukturellen und zellulären Veränderungen im Kiefergelenkköpfchen von Nagetieren zu beantworten. Der Hauptvorteil der hier gezeigten Methode liegt darin, dass sie auch zur Analyse anderer kleiner Säugetiere oder teilnehmender Tierarten verwendet werden kann.Für dieses Protokoll sollten isolierte, präparierte Mausmandibeln bereitliegen. Übertragen Sie die Mandibeln in eine Petrischale und anschließend in ein Röntgensystem. Erstellen Sie dann fünf Sekunden lang Röntgenaufnahmen bei 26 Kilovolt.Öffnen Sie nun die Bilder in der Analyse-Software, um morphometrische Messungen durchzuführen. Verwenden Sie zuerst die Einheitsschaltfläche, um die Maßstabsleiste einzurichten. Wählen Sie anschließend sechs anatomische Punkte mithilfe des Markierungsstils 2 aus.Wählen Sie zuerst die am weitesten posterior liegenden Punkte des Kiefergelenkfortsatzes als Punkt eins. Wählen Sie anschließend den Incisorenfortsatz als Punkt zwei. Danach wählen Sie den tiefsten Punkt der Sigmoidkerbe als Punkt drei.Wählen Sie als Nächstes den tiefsten Punkt der konkaven Fläche des Mandibularastes, Punkt vier, und danach den vordersten Punkt der kondylären Gelenkfläche, Punkt fünf. Wählen Sie nun den hintersten Punkt der kondylären Gelenkfläche als Punkt sechs aus und nehmen Sie anschließend Längenmessungen mit dem Längenmesswerkzeug vor. Verwenden Sie danach das Werkzeug für senkrechte Linien von Punkt drei zu Punkt vier, um die Länge des Kondylenkopfes zu messen, also die Länge der Senkrechten von Punkt eins zur Verbindungslinie zwischen Punkt drei und Punkt vier.Danach messen Sie die Unterkieferlänge zwischen den Punkten eins und zwei. Zuletzt messen Sie die Breite des Kondylenkopfes, die zwischen den Punkten fünf und sechs liegt. Um die Daten zu speichern, kopieren Sie die Messwertliste auf der rechten Seite des Bildschirms.Bevor die fixierten, aber nicht entkalkten Unterkiefer eingebettet werden, über Nacht in 30 Prozent Saccharose in PBS einweichen. Am nächsten Tag überschüssiges Weichgewebe sorgfältig entfernen und den Unterkiefergelenkköpfchen vorsichtig durchtrennen. Danach die Proben in Kunststoffformen geben, wobei die mediale Fläche des Köpfchens an der Basis der Form anliegen und die Probe parallel zum Boden der Form ausgerichtet sein sollte.Danach in Einbettungsharz geben und das Harz mit einem Stück Trockeneis abkühlen. Anschließend die Formen mit weiterem Einbettungsharz auffüllen. Danach in kaltes Dimethylbutan überführen, das durch einen Gefrierschrank oder durch Trockeneis gekühlt wurde.Nach dem Abkühlen die Proben bei minus 20 Grad Celsius oder bei minus 80 Grad Celsius zum Schneiden lagern. Um die Expression von Col10a1 im MCC von sagittalen Schnitten der Condyle zu quantifizieren, öffnen Sie die histologischen Bilder in einer Bildanalyse-Software und wählen mithilfe des Lasso-Werkzeugs den interessierenden Bereich aus. In diesem Fall wird der MCC-Bereich ausgewählt.Notieren Sie die Anzahl der Pixel im Bereich, die im Histogrammfenster angegeben wird. Wählen Sie anschließend die roten Col10a1-Pixel aus, indem Sie den Farbbereich anpassen. Verwenden Sie den Pipettenwerkzeug, um einen roten Pixel aus dem Bild auszuwählen, und klicken Sie auf „OK“. Notieren Sie dann die Anzahl der roten Pixel im Bereich, wie sie im Histogrammfenster angegeben wird.Der Anteil roter Pixel in der Fläche repräsentiert die Menge der Col10a1-Expression. Quantifizieren Sie nun mit derselben grundlegenden Technik die TRAP-Aktivität im Knorpel-Knochen-Übergang (MCC) und im subchondralen Knochen. Wählen Sie zunächst den Knorpel in den subchondralen Knochenregionen als zu analysierende Bereiche aus und notieren Sie die Gesamtanzahl der Pixel.Danach die gelben Pixel auswählen, die durch das ELF97-Substrat erzeugt wurden. Die Anzahl der positiven Pixel notieren und den Anteil der TRAP-positiven Pixel berechnen. Anschließend die EDU-positiven Zellen quantifizieren, die durch DEPI blau gegengefärbt wurden.Wählen Sie erneut den Bereich von Interesse aus und quantifizieren Sie dann die blauen Pixel innerhalb dieses Bereichs. Verwenden Sie diese Methode ebenfalls, um die Anzahl der EDU-positiven Pixel in derselben Region zu bestimmen. Morphometrische Messungen von Mäusen, die einer kompressiven TMJ-Belastung unterzogen wurden, zeigten, dass die Belastung die Länge des Unterkiefers und des Kondylenkopfes signifikant erhöhte.Trotzdem führte die Belastung nicht zu einer signifikanten Veränderung der Kondylenbreite. Die Quantifizierung der Kollagenverteilung zeigte eine signifikante Zunahme der Col10a1-Expression und der MCC der Kondylen belasteter Tiere. Andererseits unterschied sich die Col2a1-Expression kaum von der Kontrolle.Die TRAP-Aktivität stieg in der subchondralen Region der Condyle und belasteter Mäuse an, ebenso wie die Proliferation im subchondralen Bereich. EDU-Färbung zeigt die Anzahl proliferierender Zellen an. Die Proteoglykandistribution im MCC wurde durch Auswertung des mit Toluidinblau gefärbten Bereichs und der Distanzkarte quantifiziert.Es gab eine signifikante Zunahme der Distanzabbildung im MCC der Kondylen der belasteten Gruppe. Der mit Proteoglykanen angefärbte Bereich zeigte jedoch keinen statistisch signifikanten Unterschied zwischen den Gruppen. Nachdem Sie dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man zelluläre und strukturelle Veränderungen im Kiefergelenkkondyl von Nagetieren analysiert.

a-morphometric-cellular-analysis-method-for-murine-mandibular

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Zellorganisation von Gesichtsschädelknochen war lange vermutet worden, aber nie direkt sichtbar gemacht. Multi-Spektral-Zellmarkierung und in vivo-Live-   Bildgebung ermöglicht Visualisierung dynamischer Zellverhalten im Zebrafisch Unterkiefer. Hier haben wir ausführlich das Protokoll zu manipulieren Zebrabow transgene Fische und direkt zu beobachten Zell Einlagerung und morphologischen Veränderungen der Knorpelzellen in der Meckel-Knorpel.

Visualisierung von Chondrozyten-Einlagerung und Directional Verbreitung über Zebrabow klonalen Zellanalyse in der embryonalen Meckel-Knorpel

Viele biologische Strukturen fehlen leicht definierbaren Sehenswürdigkeiten, was es schwierig macht moderne morphometrische Methoden anzuwenden. Hier zeigen wir Methoden, um die Maus baculum (ein Knochen im Penis) zu studieren, einschließlich Dissektion und microCT Scannen, gefolgt von Rechenmethoden halb Sehenswürdigkeiten zu definieren, die verwendet werden, eine Größe zu quantifizieren und Variation zu gestalten.

Sezierung, MicroCT Scanning und morphometrische Analysen der Baculum

Wir präsentieren Ihnen eine Methode zur Bestimmung der räumlichen Ausdehnung der Zelle Verletzung/Tod auf die Gelenkfläche des intakten murinen Gelenke nach Anwendung der kontrollierten mechanischen Belastungen oder Auswirkungen. Diese Methode kann verwendet werden, um zu untersuchen, wie Arthrose, genetische Faktoren und/oder verschiedenen laden-Therapien die Verwundbarkeit der in Situ Chondrozyten auswirken.

Echtzeit-Visualisierung und Analyse der Knorpelzelltransplantation Verletzungen aufgrund der mechanischen Belastung in völlig intakt murinen Knorpel Explantaten

Dieses Protokoll beschreibt lasercapture microdissection for the isolation of knorpel and bone from fresh frozen sections of the mouse embryo. Knorpel und Knochen können durch Kresylviolettfärbung schnell visualisiert und präzise gesammelt werden, um hochwertige RNA für die transkriptomische Analyse zu liefern.

Laser Capture Mikrodissektion von Maus embryonalen Knorpel und Knochen für Die Genexpressionsanalyse

Wir präsentieren ein Protokoll zur Erzeugung kieferorthopädischer Zahnbewegungen bei Mäusen und Methoden zur 3D-Visualisierung der Kollagenfasern und Blutgefäße von Parodontalbändern ohne Schnitt.

3D-Bildgebung von PDL-Kollagenfasern während kieferorthopädischer Zahnbewegungen im Unterkiefermine modell

Das vorliegende Protokoll beschreibt die kontrollierten Mikroklingenkratzer auf der Oberfläche des Gelenkknorpels nach Destabilisierung des Mausknies durch Schneiden des medialen Miniscotibialbandes. Dieses Tiermodell stellt eine beschleunigte Form der Osteoarthritis (OA) dar, die für die Untersuchung der Osteophytenbildung, Osteosklerose und Schmerzen im Frühstadium geeignet ist.

Destabilisierung des medialen Meniskus- und Knorpelkratzmurinmodells der beschleunigten Arthrose

Dieses Protokoll zeigt Schritt für Schritt, wie der erste Backenzahn des Unterkiefers in der Maus extrahiert wird. Es bietet eine alternative Methode für Forscher, die sich auf die Heilung und Regeneration von Kieferknochen konzentrieren.

Die Etablierung eines murinen murinen molaren Extraktionsalveolen-Heilungsmodells

Hier zeigen wir Schritt für Schritt ein überschaubares, kieferorthopädisches Zahnbewegungsprotokoll, das an einem murinen Oberkiefermodell operiert wird. Mit der expliziten Erklärung jedes Schritts und der visuellen Demonstration können Forscher dieses Modell beherrschen und es mit einigen Modifikationen auf ihre experimentellen Bedürfnisse anwenden.

Die Etablierung eines kieferorthopädischen Mausmodells

In dieser Arbeit stellen wir ein Protokoll zur Untersuchung der kieferorthopädischen Zahnbewegung (OTM) vor, das als geeignetes Modell dient, um die Mechanismen der Knochenanpassung, der Wurzelresorption und der Reaktion von Knochenzellen auf mechanische Reize zu untersuchen. Dieser umfassende Leitfaden bietet detaillierte Informationen über das OTM-Modell, die Mikrocomputertomographie-Erfassung und die anschließende Analyse.

Untersuchung der kieferorthopädischen Zahnbewegung bei Mäusen

Hier beschreiben wir ausführlich eine Methode, die auf Mikrocomputertomographie basiert, um 3D-Modelle von kraniomaxillofazialen Knochen bei Mäusen zu segmentieren und zu vermessen, um die Entwicklung des kraniomaxillofazialen Knochens bei Mäusen besser beurteilen zu können, als dies mit aktuellen Methoden möglich ist.

Analyse von kraniomaxillofazialen Fehlbildungen bei Mäusen mittels dreidimensionaler Mikrocomputertomographie

In dieser Studie beschreiben wir ein Schritt-für-Schritt-Protokoll und betonen die wichtigsten Details zur Bestimmung morphologischer Eigenschaften von Mitochondrien in lebenden Zellen, einschließlich Probenvorbereitung, Bildaufnahme und Datenanalyse. Diese Methode wird häufig verwendet, um die mitochondriale Morphologie zur Untersuchung verschiedener Erkrankungen zu untersuchen.

Bestimmung der mitochondrialen Morphologie in lebenden Zellen mittels konfokaler Mikroskopie

Lernen Sie eine morphometrische und zelluläre Analysemethode für den murinen mandibulären Kondylus. Dieses Protokoll nutzt Röntgenbildgebung und histologische Analyse zur Untersuchung von Kompressionsbelastungseffekten.

Eine morphometrische und zelluläre Analysemethode für das Murine mandibulares Kondylus

Weitere Videos entdecken