Engineering-"Golden" Fluoreszenz durch Selektionsdruck Einbeziehung der nicht-kanonischen Aminosäuren und Protein-Analyse durch Massenspektrometrie und Fluoreszenz

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11:51 Min.

27. April 2018

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Synthetischer Biologie ermöglicht das Engineering von Proteinen mit noch nie dagewesenen Eigenschaften mit Hilfe der co-translational Einfügen von nicht-kanonischen Aminosäuren. Hier präsentierten wir, wie eine Spektral rot verschoben-Variante des ein GLP-Typ Fluorophor mit neuartigen Fluoreszenz spektroskopischen Eigenschaften, genannt "Gold" fluoreszierende Protein (GdFP), über Selektionsdruck Aufnahme (SPI) in E. Coli hergestellt wird.

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Gold-Fluoreszenzprotein

Chapters in this video

0:05

Titel

1:46

Rekombinante Proteinexpression

4:05

Zielproteinreinigung mittels immobilisierter Metallionen-Affinitätschromatografie

5:20

Analyse der intakten Proteinmasse mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatografie gekoppelt mit Elektrospray-Ionisations-Flugzeitmassenspektrometrie

6:38

Fluoreszenzlebensdauermessungen und Zerfallsassoziierte Spektren von GdFP

7:59

Ergebnisse: Analyse des Gold-Fluoreszenzproteins mittels Massenspektrometrie und Fluoreszenz

10:13

Fazit

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