Name: OP-IVM: Kombination der In-vitro-Reifung nach Eizellentnahme mit gynäkologischer Chirurgie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: Erfahren Sie die OP-IVM-Methode zur Kombination von In-vitro-Reifung mit gynäkologischer Chirurgie. Diese Technik ermöglicht Fruchtbarkeitserhaltung bei Patientinnen mit PCOS, Krebs oder anderen reproduktiven Gesundheitsproblemen.

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Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse des China National Key R&D Program (Nr. 2017YFC1002000, 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), der National Science Foundation of China (Nr. 81571386, 81730038), des CAMS Innovation Fund for Medical Sciences (2019-I2M-5-001) und des Special Research Project of Chinese Capital Health Development (2018-2-4095) unterstützt.

HINWEIS: Studien im Zusammenhang mit der OP-IVM-Methode wurden vom Institutional Review Board (IRB) des Dritten Krankenhauses der Universität Peking und der Ethikkommission der Universität Peking (2014S2004) genehmigt. Eine Zusammenfassung von OP-IVM ist in Abbildung 1 dargestellt. Die Schritt-für-Schritt-Vorgehensweise wird im folgenden Abschnitt vorgestellt.
1. Einführung von OP-IVM bei geeigneten Patienten
<ol><li>Identifizieren Sie potenzielle Patienten, die von OP-IVM profitieren könnten, wie in den Schritten 1.1.1-1.1.3 beschrieben:<ol>
<li>Patientinnen des polyzystischen Ovarialsyndroms (PCOS) mit Clomifenresistenz, die eine laparoskopische Ovarialbohroperation benötigen.</li>
		<li>Unfruchtbare Patienten, die vor der ART-Behandlung gutartige gynäkologische Operationen wie hysteroskopische Myomektomie, Polypektomie, transzervikale Septumresektion und laparoskopische Tubenchirurgie sowie Oophorozystektomie benötigen.</li>
		<li>Patienten mit Krebs oder hämatologischen Erkrankungen, die eine Chemoradiotherapie oder Strahlentherapie erhalten.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Einwilligung nach Aufklärung
<ol><li>Bereitstellung vollständiger Informationen für Patienten, einschließlich der Frage, warum OP-IVM von Vorteil sein kann, seines Verfahrens, der Verwendung von IVM-Eizellen (IVF-ET oder Kryokonservierung), geschätzter CPRs und LBRs und möglicher Komplikationen. Bitten Sie die Patienten, eine Einwilligung nach Aufklärung zu geben, indem Sie die Einverständniserklärung unterschreiben.</li>
</ol>3. Etiketten und IVM-Eizellmedium vorbereiten
<ol><li>Drucken Sie Identifikationsetiketten (ID) mit dem Namen und den Daten des Patienten für Kulturschalen und Tuben.</li>
	<li>Fügen Sie 0,5 ml IVM-Medium, ergänzt mit 0,075 I.E./ml follikelstimulierendem Hormon (FSH) und 0,075 I.E./ml luteinisierendem Hormon (LH), zu jeder Vertiefung einer 4-Well-Platte hinzu. Bedecken Sie das Medium mit Öl. HINWEIS: Führen Sie alle diese Verfahren in Laminar-Flow-Clean-Bänken durch.</li>
	<li>Die 4-Well-Platte mit IVM-Eizellmedium bei 37 °C in befeuchteter Luft mit 5%CO2 und 5% O2 mindestens6 h vor Gebrauch vorwärmen.</li>
</ol>4. Verabreichen Sie eine Anästhesie in einem Operationssaal
<ol><li>Überprüfen Sie den Namen des Patienten, bevor Sie eine Anästhesie verabreichen.</li>
	<li>Intravenöse Anästhesie des Patienten durch Anästhesisten.</li>
</ol>5. Eizellentnahme durchführen
<ol><li>Markieren Sie die Etiketten mit Name, Datum und ID auf den Kulturschalen und Tuben.</li>
	<li>Setzen Sie den Patienten in die Blasenlithotomie-Position; Ständig desinfizieren, drapieren und schrubben Sie die Vagina mit warmer Kochsalzlösung.</li>
	<li>Platzieren Sie die Ultraschallsonde in der Vagina; Scannen und notieren Sie die Anzahl der Follikel in beiden Eierstöcken. Finden Sie den Ort, der dem Eierstock als Einstichstelle am nächsten ist, und vermeiden Sie den Darm, die Blase und die großen Blutgefäße.</li>
	<li>Aspirieren Sie follikuläre Flüssigkeit.<ol>
<li>Waschen Sie die Nadel vor dem Durchstechen mit pH-stabilem Handhabungsmedium(siehe Materialtabelle ).</li>
		<li>Injizieren Sie die 19 G, Ein-Lumen-Aspirationsnadel unter Anleitung von Ultraschall in die Eierstöcke.</li>
		<li>Punktieren Sie größere Follikel mit klaren Grenzen, die der Sonde am nächsten sind. In einer niedrigen Position die Spüllösung, die mit 25 U / ml Heparin ergänzt wird, schnell injizieren. Aspirieren Sie follikuläre Flüssigkeit mit der Nadel unter einem Druck von 80-90 mmHg und drehen Sie die Nadel leicht, um so viel Follikelflüssigkeit wie möglich abzusaugen. Punktieren Sie andere Follikel von der nahen bis zur anderen Seite auf dieser Ebene. HINWEIS: Während der Aspiration fließt follikuläre Flüssigkeit, die Eizellen enthält, unter Unterdruck in ein steriles 10-ml-Reagenzglas. Heparin kann die Viskosität der Follikelflüssigkeit reduzieren, um den Aspirationsprozess zu erleichtern.</li>
		<li>Entfernen Sie die Nadel vom Eierstock (halten Sie die Nadel in der Vaginalwand). Stellen Sie die Richtung der Ultraschallsonde ein und punktieren Sie die verbleibenden Follikel auf anderen Ebenen. Versuchen Sie, alle Follikel mit einem Durchmesser von ~ 5-9 mm abzusaugen. HINWEIS: Stellen Sie die Position der Sonde ein, um sie jederzeit am nächsten an den Eierstöcken zu halten. Drücken Sie den vaginalen Fornix mit entsprechender Kraft, um Verletzungen und Blutungen zu reduzieren.</li>
		<li>Ziehen Sie die Nadel nach dem Beenden in einem Eierstock heraus, waschen Sie die Nadel mit dem Handhabungsmedium und punktieren Sie die andere Seite mit der gleichen Methode. HINWEIS: Vollständige Follikelaspiration innerhalb von 25-30 min.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Übertragen Sie die Follikelflüssigkeit innerhalb weniger Minuten nach Bestätigung des Namens und der ID des Patienten aus dem Operationssaal in das IVF-Labor. HINWEIS: Übertragen Sie aspirierte Follikelflüssigkeit so schnell wie möglich in die IVF-Laborbank, um eine Gerinnung zu verhindern.</li>
	<li>Erkennen Sie aktive Blutungen in der Beckenhöhle mit B-Mode-Ultraschall nach Punktion aller Follikel. Setzen Sie ein Spekulum ein und richten Sie die Spitze auf den hinteren Fornix, um aktive Blutungen an der Einstichstelle zu erkennen. HINWEIS: An der vaginalen Punktionsstelle sollte keine aktive Blutung beobachtet werden, wenn die Eierstockposition normal ist und die Eizellentnahme sorgfältig durchgeführt wird. Für leichte Blutungen, die auch nach der Kompression anhalten, halten Sie eine sterile Mullkompresse in der Vagina für 2-4 h. Kontrollieren Sie übermäßige Blutungen aus kleinen Arterien mit Klammern mit Gefäßzange für 2-4 h. Blutungen in der Beckenhöhle oder im Eierstock, die selten auftreten, sollten durch Elektrokoagulation durch laparoskopische Operation kontrolliert werden.</li>
</ol>6. Gynäkologische Chirurgie
<ol><li>Führen Sie je nach Bedarf und Zustand des Patienten nach der Eizellentnahme eine geeignete gynäkologische Operation durch.<ol>
<li>Führen Sie eine laparoskopische Ovarialbohroperation für Patientinnen mit polyzystischem Ovarialsyndrom (PCOS) mit Clomifenresistenz durch.</li>
		<li>Führen Sie vor der ART-Behandlung eine gutartige gynäkologische Operation für unfruchtbare Patienten durch, wie hysteroskopische Myomektomie, Polypektomie, transzervikale Septumresektion und laparoskopische Tubenchirurgie sowie Oophorozystektomie.</li>
		<li>Führen Sie eine Ovariektomie zur Kryokonservierung der Fruchtbarkeit von Patienten mit Krebs oder hämatologischen Erkrankungen durch, die eine Chemoradiotherapie benötigen. HINWEIS: Diese gynäkologischen Operationen sind grundlegende und standardisierte klinische Operationen. Die Operationsrichtlinien in verschiedenen Ländern und Krankenhäusern sollten relativ ähnlich sein.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. IVM durchführen
HINWEIS: Führen Sie den gesamten IVM-Prozess auf einer homothermen Ebene mit 37 °C durch.
<ol><li>Filtern Sie die angesaugte Follikelflüssigkeit mit einem 70 μm Nylon-Zellsieb. Kulturröhrchen und Sieb wiederholt mit vorgewärmtem pH-stabilem Handhabungsmedium abspülen. Stellen Sie sicher, dass alle unreifen COCs vollständig auf das Kulturgericht übertragen werden. Die gefilterte Flüssigkeit sammeln, ausspülen und in einer 100 x 15 mm großen Petrischale entnehmen.</li>
	<li>Untersuchen Sie die COCs (Abbildung 2) unter dem Stereoskop mit 40-facher Vergrößerung. Übertragen Sie die Unreifen schnell in ein vorgewärmtes IVM-Eizellmedium. HINWEIS: Wählen Sie eine geeignete Vergrößerung in Abhängigkeit von der Gewohnheit des Bedieners.</li>
	<li>Notieren Sie die Anzahl der kultivierten unreifen COCs.</li>
	<li>Informieren Sie den Patienten über die Anzahl der kultivierten COCs. Besprechen Sie die Samenentnahme mit den Patienten und ihren Partnern. Führen Sie die Spermienextraktion nach dem normalen Verfahren durch.</li>
	<li>Kultivieren Sie die unreifen COCs bei 37 °C in befeuchteter Luft mit 5% CO2 und 5%O2 für 28-32 h.</li>
	<li>Beurteilen Sie die Reife der Eizelle.<ol>
<li>Entleeren Sie die Kumuluszellen durch wiederholtes Pipettieren mit einer Glas-Pasteur-Pipette unter dem Stereoskop mit 40-facher Vergrößerung. Untersuchen Sie die Extrusion des Polkörpers (PB), um das Entwicklungsstadium der Eizellen zu identifizieren. Siehe Abbildung 2 für repräsentative Bilder von Eizellen in COCs, Metaphase II (MII), Metaphase I (MI) und Keimbläschen (GVs) mit klaren morphologischen Merkmalen. HINWEIS: Verwenden Sie eine vertikale Flamme (z. B. eines Bunsenbrenners), um den Durchmesser der Pasteurpipette aus Glas auf die Größe einer Eizelle einzustellen.</li>
		<li>Zählen Sie MII-Eizellen und notieren Sie die Anzahl.</li>
		<li>Wählen Sie reife Eizellen für IVF oder Vitrifikation. HINWEIS: Sammeln Sie Spermien an dem Tag, an dem die Eizellen für IVF reifen, aber nicht für die Vitrifizierung von Eizellen.</li>
		<li>Kultivieren Sie die unreifen Eizellen im GV- und MI-Stadium im ursprünglichen IVM-Kulturmedium mit Kumuluszellen für weitere 10-14 h. Wiederholen Sie die Schritte 7.6.2-7.6.3.</li>
	</ol>
</li>
</ol>8. ICSI oder Eizellvitrifikation durchführen
<ol><li>Befolgen Sie das Standardverfahren des Fortpflanzungszentrums8.</li>
</ol>9. Kultivieren Sie Embryonen und führen Sie eine Kryokonservierung von Embryonen durch
<ol><li>Befolgen Sie das Standardverfahren des Fortpflanzungszentrums8.</li>
</ol>

<ol><li>Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+and+safety+of+in+vitro+maturation+of+oocytes+versus+in+vitro+fertilization+in+women+with+a+high+antral+follicle+count%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count.</a> Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).</li>
<li>Yang, Z. Y., Chian, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+in+vitro+maturation+techniques+for+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Development of in vitro maturation techniques for clinical applications.</a> Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).</li>
<li>Hatirnaz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+in+vitro+maturation%3A+A+sytematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Turkish+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Oocyte in vitro maturation: A sytematic review.</a> Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).</li>
<li>Gremeau, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maturation+or+in+vitro+fertilization+for+women+with+polycystic+ovaries%3F+A+case-control+study+of+194+treatment+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles.</a> Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).</li>
<li>Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+and+safety+of+in+vitro+maturation+of+oocytes+versus+in+vitro+fertilization+in+women+with+a+high+antral+follicle+count%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count.</a> Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).</li>
<li>Sahin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+should+be+the+preferred+technique+during+laparoscopic+ovarian+cystectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Sciences%22%5BJournal%5D)">Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy.</a> Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).</li>
<li>Xiao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+hemostatic+methods+on+ovarian+reserve+and+fertility+in+laparoscopic+ovarian+cystectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Therapeutic%22%5BJournal%5D)">Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy.</a> Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).</li>
<li>Song, X. -L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+the+scope+of+in+vitro+maturation+for+fertility+preservation%3A+transvaginal+retrieval+of+immature+oocytes+during+endoscopic+gynaecological+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures.</a> Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).</li>
<li>Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+number+of+oocytes+retrieved+during+IVF%3A+a+balance+between+efficacy+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety.</a> Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).</li>
<li>Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLarose%2C+H+%22Current+Topics+in+Developmental+Biology%22">Current Topics in Developmental Biology</a>. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).</li>
<li>Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-M%C3%BCllerian+hormone%3A+ovarian+reserve+testing+and+its+potential+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction+Update%22%5BJournal%5D)">Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications.</a> Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).</li>
<li>Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antim%C3%BCllerian+hormone+in+gonadotropin+releasing-hormone+antagonist+cycles%3A+prediction+of+ovarian+response+and+cumulative+treatment+outcome+in+good-prognosis+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients.</a> Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).</li>
<li>Katayama, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound-guided+transvaginal+needle+aspiration+of+follicles+for+in+vitro+fertilization%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization.</a> Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).</li>
<li>Dellenbach, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transvaginal+sonographically+controlled+follicle+puncture+for+oocyte+retrieval%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval.</a> Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).</li>
<li>Hirata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concomitant+ovarian+drilling+and+oocyte+retrieval+by+laparoendoscopic+single-site+surgery+led+to+live+birth+using+in+vitro+maturation+of+oocyte+and+transfer+of+frozen-thawed+blastocyst+in+woman+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology+Research%22%5BJournal%5D)">Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome.</a> Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).</li>
<li>Deutinger, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follicular+aspiration+for+in+vitro+fertilization%3A+sonographically+guided+transvaginal+versus+laparoscopic+approach%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Obstetrics%2C+Gynecology%2C+and+Reproductive+Biology%22%5BJournal%5D)">Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach.</a> European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).</li>
<li>Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+retrieval+in+an+IVF+program.+A+comparison+of+laparoscopic+and+transvaginal+ultrasound-guided+follicular+puncture%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Obstetricia+et+Gynecologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture.</a> Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).</li>
<li>Nagy, Z. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+and+birth+after+intracytoplasmic+sperm+injection+of+in+vitro+matured+germinal-vesicle+stage+oocytes%3A+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report.</a> Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).</li>
<li>Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Favourable+pregnancy+results+with+insemination+of+in+vitro+matured+oocytes+from+unstimulated+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients.</a> Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).</li>
<li>Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maturation+and+fertilization+of+immature+oocytes%3A+a+comparative+study+of+fertilization+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Assisted+Reproduction+and+Genetics%22%5BJournal%5D)">In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).</li>
<li>Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IVF+versus+ICSI+for+the+fertilization+of+in-vitro+matured+human+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biomedicine+Online%22%5BJournal%5D)">IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes.</a> Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).</li>
<li>Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+normal+and+abnormal+fertilization+of+in+vitro-matured+human+oocyte+according+to+insemination+method%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method.</a> Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).</li>
<li>Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+birth+rate+after+human+chorionic+gonadotropin+priming+in+vitro+maturation+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ovarian+Research%22%5BJournal%5D)">Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome.</a> Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70(2018).</li>
<li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hCG+priming+on+embryonic+development+of+immature+oocytes+collected+from+unstimulated+women+with+polycystic+ovarian+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biology+and+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40(2012).</li>
<li>Tannus, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictive+factors+for+live+birth+after+in+vitro+maturation+of+oocytes+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Gynecology+and+Obstetrics%22%5BJournal%5D)">Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome.</a> Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).</li>
<li>Cohen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+pregnancy+and+live+birth+rates+after+vitrification+of+in+vitro+matured+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Assisted+Reproduction+and+Genetics%22%5BJournal%5D)">Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).</li>
<li>Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+vitrification+on+maturation+and+viability+capacities+of+immature+human+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Gynecology+and+Obstetrics%22%5BJournal%5D)">The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes.</a> Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preiszugeben.

Die in diesem Artikel beschriebene OP-IVM-Methode erstreckt sich auf konventionelle IVM-Anwendungen und kombiniert IVM nach Eizellentnahme mit routinemäßigen gynäkologischen Operationen. Eizellen, die in der gynäkologischen Chirurgie verloren gegangen wären, können nun ohne zusätzliche chirurgische Risiken für IVF-ET oder FP verwendet werden. OP-IVM wurde zuerst verwendet, um Eizellen vor dem Eierstockbohren bei PCOS-Patienten zu entnehmen. Seine Anwendung weitete sich bald auf unfruchtbare Patienten aus, die eine gutart...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/61647">OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery</a>. The Protocol and Representative Results sections were&#160;updated.
Step 3.2 of the Protocol was updated from:
Add 0.5 mL of IVM&#160;medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
to:
Add 0.5 mL of IVM&#160;medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
The legend for Figure 2 was updated from:
Figure 2:&#160;Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
to:
Figure 2:&#160;Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII&#160;stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/61647">OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery</a>. The Protocol and Representative Results sections were&#160;updated.

Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

IVM ist eine ART, bei der menschliche unreife Eizellen in vitro kultiviert werden, um für IVF-ET oder FP zu reifen. Bei IVM werden keine Ovulationsinduktionsmedikamente verwendet, wodurch Schmerzen, finanzielle Belastungen und Komplikationen wie das ovarielle Überstimulationssyndrom (OHSS)1,2reduziert werden. Darüber hinaus eignet sich IVM besonders für die FP von Krebspatienten und die Unfruchtbarkeitsbehandlung von hormonsensitiven Patientinnen, die möglicherweise nicht in der Lage sind oder keine Zeit haben, eine Ovulationsinduktionstherapie zu erhalten3. Obwohl die Anzahl der entnommenen Eizellen, die klinische Schwangerschaftsrate (CPR) und die Lebendgeburtenrate (LBR) niedriger sind als die von IVF4,5,hat IVM seine eigenen einzigartigen Vorteile.
Unfruchtbare Patienten mit Endometriumläsionen, Hydrosalpinx oder Ovarialzysten haben in der Regel vor der ART-Behandlung eine gynäkologische Operation, und ihre Eizellen sind normalerweise unreif. OP-IVM verwendet geführten transvaginalen Ultraschall, um die unreifen Eizellen zu entnehmen und sie in vitro bis zur Reifung für IVF-ET oder FP zu züchten. OP-IVM kombiniert IVM nach der Eizellentnahme und gynäkologischen Operation, wodurch Komplikationen, die in kontrollierten Ovarialüberstimulationszyklen üblich sind, reduziert und Zeit und Geld gespart werden. Für fruchtbare Patienten könnte OP-IVM als "Fruchtbarkeitsversicherung" dienen, während sie sich einer routinemäßigen gynäkologischen Operation unterziehen.
Darüber hinaus könnten Schäden, die durch gynäkologische Operationen wie Elektrokauter6,7 und Ovarialtumorresektion verursacht werden, durch Eizellentnahme vor der gynäkologischen Operation reduziert werden. Daher könnte OP-IVM im Vergleich zu routinemäßigen gynäkologischen Operationen die Anzahl der Operationen während der Unfruchtbarkeitsbehandlung reduzieren und den Verlust funktioneller Eizellen während der Ovarialchirurgie verhindern.
Eine frühere Studie hat gezeigt, dass das zusätzliche Verfahren der Eizellentnahme weder chirurgische Komplikationen und nachteilige Schwangerschaftsergebnisse erhöhen noch den Krankenhausaufenthalt verlängern würde8. Einige Patienten haben durch OP-IVM8eine Lebendgeburt bekommen, was auf die Machbarkeit dieser Methode hinweist. Dieses Papier beschreibt Merkmale von Patienten, die von OP-IVM profitieren können, sowie Verfahren und kritische Punkte von OP-IVM und diskutiert die Bewertung der menschlichen Eizellreife.

<table><tbody><tr><td>19 G Aspirationsnadeln mit einem Lumen</td><td>Cook, Australien</td><td>K-OPS-7035-REH-ET</td><td></td></tr><tr><td>4-Well-Platte</td><td>Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70 &mu; m Nylon-Zellsieb</td><td>Falcon, USA</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Inkubator</td><td>Thermokulturöl</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Vitrolife, Schweden</td><td>10029,OVOIL&nbsp;</td><td>Schritt 3.2.</td></tr><tr><td>FSH & LH</td><td>Ferring Reproductive Health, Deutschland</td><td>MENOPUR&reg;</td><td></td></tr><tr><td>Glaspasteurpipette</td><td>Hilgenberg GmbH, Deutschland</td><td>3154102-26</td><td></td></tr><tr><td>G-MOPS Medium</td><td></td><td></td><td>pH-stabiles Handhabungsmedium zum Waschen der Nadel vor der Punktion</td></tr><tr><td>IVM medium</td><td>Origio, Dänemark</td><td>ART-1600-B</td><td></td></tr><tr><td>Laminar Flow Clean Benches</td><td>ESCO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petrischale</td><td>Thermo Fisher Scientific, Dänemark</td><td>263991</td><td></td></tr><tr><td>pH-stabiles Handhabungsmedium zur Unterstützung der Handhabung und Manipulation von Eizellen und Embryonen außerhalb des Inkubators</td><td>Vitrolife, Schweden</td><td>10130, G-MOPS PLUS</td><td>Step 7.1.</td></tr><tr><td>Spüllösung</td><td>Cook, Australien</td><td>K-SIFB-100</td><td></td></tr><tr><td>Stereoskop</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

op-ivm: kombination der in-vitro-reifung nach eizellentnahme mit gynäkologischer chirurgie

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

Die Anwendung der In-vitro-Reifung (IVM) vor der gynäkologischen Operation (OP-IVM) ist eine Erweiterung der konventionellen IVM, die IVM nach Eizellentnahme mit routinemäßigen gynäkologischen Operationen kombiniert. OP-IVM eignet sich für Patienten, die sich einer gutartigen gynäkologischen Operation unterziehen und die Fruchtbarkeitserhaltung (FP) oder Unfruchtbarkeitsbehandlungen wie In-vitro-Fertilisation und Embryotransfer (IVF-ET) benötigen. Im Operationssaal werden Patienten, die sich einer gutartigen gynäkologischen Operation unterziehen, zunächst betäubt und erhalten eine ultraschallgeführte Behandlung mit unreifer Follikelaspiration (IMFA). Während der anschließenden gynäkologischen Operation werden die Kumulus-Eizell-Komplexe (COCs) untersucht und die unreifen COCs in das IVM-Medium übertragen und für 28-32 Stunden im IVF-Labor kultiviert. Nach der Beurteilung werden reife Eizellen im MII-Stadium ausgewählt und in flüssigem Stickstoff für FP kryokonserviert oder durch intrazytoplasmatische Spermieninjektion (ICSI) für IVF-ET befruchtet. Durch die Kombination von IVM mit gynäkologischer Chirurgie können unreife Eizellen, die verworfen worden wären, gerettet und für die assistierte Reproduktionstechnologie (ART) verwendet werden. Das Verfahren, die Bedeutung und die kritischen Aspekte von OP-IVM werden in diesem Artikel beschrieben.

Bis Dezember 2019 wurde OP-IVM zur Erhaltung der Fruchtbarkeit von 274 Patienten eingesetzt. Embryologische und reproduktive Ergebnisse von 158 Patienten zwischen 2014 und 2016 wurden in einer früheren Arbeit veröffentlicht8. Im folgenden Beispiel wird das Verfahren für einen PCOS-Patienten beschrieben, der 2016 OP-IVM erhielt. Der Patient ist ein 28-Jähriger, bei dem primäre Unfruchtbarkeit, linke Adnexzyste und PCOS diagnostiziert wurden. Sie erhielt am28.</...

Die In-vitro-Reifung (IVM) vor der gynäkologischen Operation (OP-IVM) kombiniert IVM nach Eizellentnahme mit routinemäßiger gynäkologischer Chirurgie und dient als Erweiterung herkömmlicher IVM-Anwendungen zur Fertilitätserhaltung.

OP-IVM: Kombination der In-vitro-Reifung nach Eizellentnahme mit gynäkologischer Chirurgie

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...

Die Technologie OP-IVM ist eine Erweiterung des konventionellen IVM-Protokolls, das IVM nach eizellgener Entnahme mit routinemäßigen gynäkologischen Operationen kombiniert. Es eignet sich für unfruchtbare oder subfertile Frauen, die vor der ART-Behandlung oder der Erhaltung der Fruchtbarkeit eine gynäkologische Operation erhalten müssen, Patientinnen mit polyzystischem Ovarialsyndrom mit Clomifenresistenz, die eine laparoskopische Ovarialbohroperation benötigen, unfruchtbare Patienten, die gutartige gynäkologische Operationen wie hysteroskopische Myomektomie, Polypektomie, transthorakale Septumresektion und laparoskopische Röhrenchirurgie benötigen. und die Oophorozystektomie vor der ART-Behandlung, und auch Patienten mit Krebs und hämatologischen Erkrankungen, die Chemoradiotherapie oder Strahlentherapie erhalten, können sie diese Operation zur Erhaltung der Fruchtbarkeit durchführen. Platzieren Sie die Ultraschallsonde in der Vagina, um die Anzahl der Follikel in beiden Eierstöcken zu scannen und aufzuzeichnen.Finden Sie den Ort, der dem Eierstock als Einstichstelle am nächsten ist, und vermeiden Sie den Darm, die Blase und die großen Blutgefäße. Waschen Sie die 19-Gauge-Einzellumen-Aspirationsnadel mit einem pH-stabilen Handhabungsmedium und injizieren Sie die Nadel dann unter Anleitung von Ultraschall in die Eierstöcke. Aspirieren Sie follikuläre Flüssigkeit mit der Nadel unter einem Druck von 80 bis 90 Millimeter Quecksilbersäule und drehen Sie die Nadel leicht, um so viel Follikelflüssigkeit wie möglich abzusaugen.Verwenden Sie Heparin, um die Viskosität der Follikelflüssigkeit während der Aspiration zu reduzieren. Stellen Sie die Position der Sonde ein, um sie jederzeit so nah wie möglich an den Eierstöcken zu halten, und drücken Sie den vaginalen Fornix mit der richtigen Kraft, um Verletzungen und Blutungen zu reduzieren. Stellen Sie sicher, dass Sie die Follikelflüssigkeitsaspiration innerhalb von 25 bis 30 Minuten abschließen.Ziehen Sie die Nadel nach dem Beenden in einem Eierstock heraus, waschen Sie die Nadel mit dem Handhabungsmedium und punktieren Sie die andere Seite mit der gleichen Methode. Arbeiten Sie in einer homothermen Wohnung mit 37 Grad Celsius und bereiten Sie die Handhabungsmedien, die Petrischale und das Zellsieb vor. Spülen Sie das Kulturröhrchen und das Sieb mit vorgewärmten pH-stabilen Handhabungsmedien ab.Filtern Sie die angesaugte Follikelflüssigkeit mit einem 70 Mikrometer langen Nylonzellsieb und spülen Sieb wiederholt das Kulturröhrchen und das Sieb mit vorgewärmtem pH-stabilem Handhabungsmedium. Stellen Sie sicher, dass alle unreifen COCs vollständig auf das Kulturgericht übertragen werden. Das Blut in saubere Handhabungsmedien überführen.Dann das Zellsieb in ein neues Gericht geben und waschen. Aspirieren sie und übertragen Sie die Handhabungsmedien mit den COCs, Granulosazellen und Geweben in eine neue Schale. Untersuchen Sie die COCs unter dem Stereoskop mit 40-facher Vergrößerung.Übertragen Sie die Unreifen schnell in ein vorgewärmtes IVM-Eizellmedium. Als nächstes untersuchen Sie die COCs im Blutgerinnsel und im Zellsieb. Übertragen Sie die COCs und Handhabungsmedien in vorgewärmtes IVM-Eizellmedium.Kultivieren Sie die unreifen COCs für 28 bis 32 Stunden bei 37 Grad Celsius in befeuchteter Luft mit 5% Kohlendioxid und 5% Sauerstoff. Bis Dezember 2019 wurde OP-IVM zur Erhaltung der Fruchtbarkeit von 274 Patienten eingesetzt. Ein Beispiel war ein 28-jähriger Patient, bei dem primäre Unfruchtbarkeit, linke Adnexzyste und PCOS diagnostiziert wurden.Sie erhielt im September 2016 eine laparoskopische Zystektomie und OP-IVM und es wurden 27 unreife COCs erhalten. Nach 28 Stunden in Kultur wurden sieben Eizellen im MII-Stadium ausgewählt und von ICSI befruchtet. Nach fünf Tagen waren zwei Blastozysten eingefroren.Einer wurde im Februar 2017 aufgetaut und in die Gebärmutter übertragen. Die Patientin brachte im November ein gesundes Mädchen zur Welt. OP-IVM wurde zuerst auf die Eizellentnahme von unfruchtbaren Frauen mit PCOS angewendet, die sich einer Eierstockbohroperation unterziehen, und jetzt können seine Anwendungen auf die subfertilen Frauen ausgeweitet werden, die eine gutartige gynäkologische Operation benötigen, sogar Krebsfrauen zur Erhaltung der Fruchtbarkeit.Es zeigt, dass der Anwendungsbereich von IVM erweitert werden kann, indem es mit anderen traditionellen gynäkologischen Operationen zur Erhaltung der weiblichen Fruchtbarkeit kombiniert wird.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wir beschreiben Methoden zur Manipulation unreifer Eizellen von Xenopus laevis, zur In-vitro-Reifung von Eizellen zu Eizellen und zur intrazytoplasmatischen Spermieninjektion. Dieses Protokoll ermöglicht den Abbau einiger mütterlicher Proteine und die Überexpression von Genen von Interesse während der Befruchtung und ist daher wertvoll, um die Rolle spezifischer Faktoren in der frühen Embryonalentwicklung zu untersuchen.

Manipulation und<em&gt; In-vitro-</em&gt; Ausbau der<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Eizellen, von Intrazytoplasmatische Spermieninjektion gefolgt, um embryonale Entwicklungsstudie

Dieses Manuskript beschreibt einen experimentellen Ansatz zur morphologischen und biochemischen Charakterisierung von Pferdostozyten. Speziell veranschaulicht die vorliegende Arbeit, wie man unreife und reife Pferdoozyten durch Ultraschall-geführte Ovum-Pick-up (OPU) sammelt und wie man Chromosomensegregation, Spindelmorphologie, globale Histonacetylierung und mRNA-Expression untersucht.

Analyse der Chromosomensegregation, Histonacetylierung und Spindelmorphologie in Pferdeozyten

Wir beschreiben die Verfahren zur Isolierung wachsender Eizellen von Eierstockfollikel in frühen Entwicklungsstadien sowie den Aufbau eines In-vitro-Kultursystems, das das Wachstum und die Differenzierung bis in die ausgewachsene Phase unterstützen kann.

In Vitro Kulturstrategie für Oozyten aus dem frühen Antralfollikel bei Rindern

Die Kryokonservierung von Eizellen wird von mehreren internationalen wissenschaftlichen Gesellschaften als Goldstandard für die Erhaltung der Fruchtbarkeit bei postpubertären Frauen anerkannt. Geeignete klinische und Laborstrategien gewährleisten maximale Wirksamkeit, Effizienz und Sicherheit von Fruchtbarkeitserhaltungsbehandlungen.

Fruchtbarkeitserhaltung durch Eizellvitrifikation: Klinische und Laborperspektiven

Wir präsentieren Details zu Laborverfahren zur medikamentenfreien In-vitro-Aktivierung (IVA) von Eierstockfollikeln für Patientinnen mit schwerer Ovarialfunktionsstörung. Diese Methode könnte die Anzahl der abrufbaren Eizellen pro ovarieller Hyperstimulation erhöhen und die Erhaltung der Fruchtbarkeit für diese Patientinnen verbessern.

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Ein engagiertes Team kann Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-Patientinnen die Möglichkeit bieten, eine kontrollierte Eierstockstimulation und Kryokonservierung der Eizellen zum Zeitpunkt der laparoskopischen Vaginoplastik durchzuführen.

Laparoskopische Eizellentnahme und Kryokonservierung während der Vaginoplastik zur Behandlung des Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-Syndroms

Hier stellen wir eine optimierte Methode zur sofortigen Entfernung eines Teils der Kumulus-Eizell-Komplexe nach der Eizellentnahme vor, um den IVF-Beobachtungsprozess zu beschleunigen, die für die Entnahme von Granulosazellen erforderliche Zeit zu reduzieren, die Exposition der Eizellen gegenüber externen Elementen zu minimieren und die Embryonenentwicklung nicht zu behindern, was letztendlich die Effizienz der IVF-Laborverfahren verbessert.

Die sofortige partielle Entfernung von Kumulus-Eizell-Komplexen: Ein verfeinerter Ansatz für die schnelle Beobachtung der In-vitro-Fertilisation

Dieses Protokoll beschreibt standardisierte Methoden zur Isolierung und Verarbeitung von Follikelflüssigkeit, somatischen Zellen und unreifen Eizellen aus IVF-Verfahren und ermöglicht so qualitativ hochwertige molekulare und zelluläre Analysen. Diese Ansätze unterstützen die translationale Forschung zu Fertilität, reproduktivem Altern und Funktionsstörungen der Eierstöcke unter Verwendung von Materialien, die in der klinischen Versorgung normalerweise entsorgt werden.

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In-vitro-Reifung, Befruchtung und Kultur von Präimplantationsembryonen der Maus

Hier beschreiben wir, wie man eine kleine mikrochirurgische Übungsstation und eine einfache und kostengünstige Methode für das Training der Mikrochirurgie mit nicht lebenden Tiermodellen einrichtet.

Schritt für Schritt: Mikrochirurgische Trainingsmethode die Kombination von zwei nicht lebenden Tiermodellen

Erfahren Sie die OP-IVM-Methode zur Kombination von In-vitro-Reifung mit gynäkologischer Chirurgie. Diese Technik ermöglicht Fruchtbarkeitserhaltung bei Patientinnen mit PCOS, Krebs oder anderen reproduktiven Gesundheitsproblemen.

OP-IVM: Kombination der In-vitro-Reifung nach Eizellentnahme mit gynäkologischer Chirurgie

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