Eine nicht-invasive Methode zur Erzeugung des zyklischen Belastungsinduzierten intraartikulären Knorpelläsionsmodells des Rattenknies

Dieses Protokoll zeigt, dass es möglich ist, Knorpelschäden bei Tieren, größeren Tieren ohne chirurgischen Eingriff oder strukturierte Zerstörung des Tierknies zu verursachen. Der größte Vorteil ist, dass sie sich bei Bedienern auch ohne Erfahrung als repetitiv erweist, was mit jeder chirurgischen Methode schwer zu erreichen ist. Beginnen Sie mit der Montage der anästhesierten Ratte auf der Fixiervorrichtung.

Legen Sie die betäubte Ratte, die auf dem Bauch liegt, auf die Grundplatte, wobei das rechte Knie an einem kleinen Stück Harz mit einer konkaven Rille befestigt ist. Platzieren Sie das rechte Hinterbein in der Hüftstreckung, Kniebeugung und Knöchelstreckposition, wobei das Knie um etwa 140 Grad gebeugt ist. Bringen Sie die Ferse der Ratte an der keilförmigen Nut der beweglichen Halterung unter.

Bewegen Sie die Fixiervorrichtung zum Spannungs- und Zugprüfgerät und stellen Sie sicher, dass kein Kontakt mit der Wägezelle besteht. Öffnen Sie die Steuerungssoftware für Spannungs- und Zugprüfgeräte und klicken Sie auf die Schaltfläche Kalibrierung. Befestigen Sie nach der Kalibrierung vorsichtig die Oberseite des Rahmens an der Wägezelle.

Drehen Sie den Drehknopf am beweglichen Hauptbedienfeld langsam ein, bis die Vorspannung fünf Newton erreicht, um das Kniegelenk eng mit dem Rahmen zu verbinden. Klicken Sie im Hauptmenü auf Neue Methode und Systembezeichnung erstellen. Stellen Sie den Testmodus auf Zyklus und den Testtyp auf Komprimierung ein.

Klicken Sie auf das Sensoretikett und wählen Sie die Testregisterkarte, um zu überprüfen, ob der Grenzwert innerhalb von 60 Newton liegt. Wählen Sie dann die Registerkarte Strich und überprüfen Sie, ob der Grenzwert innerhalb von 500 Millimetern liegt. Wählen Sie unter dem Testkontrolletikett den Ursprung des Wachstums aus, um das Hauptprogramm mit 0,3% oder dem vollen Skalenendwert zu starten.

Stellen Sie die kontrollierte Hubgeschwindigkeit im ersten und dritten Abschnitt auf einen Millimeter pro Sekunde ein, stellen Sie dann die maximale Prüfkraft im zweiten Abschnitt auf 20 Newton und die minimale Prüfkraft im vierten Abschnitt auf fünf Newton ein. Stellen Sie die Dauer von whole auf 0,5 Sekunden für die Spitzenlast und 10 Sekunden für die minimale Last ein. Stellen Sie auf der Registerkarte Vorspannung unten auf der Seite sicher, dass ein aktiviert ist, die Geschwindigkeit der Durchbiegungsentfernung auf 100 Millimeter pro Minute eingestellt ist und die maximale Kraft fünf Newton beträgt.

Stellen Sie das Material als Metall auf dem Probenetikett ein. Wählen Sie im Hauptmenü unter dem Abschnitt Methode und Test auswählen die soeben erstellte Methode aus und klicken Sie auf Start, um den Test zu starten. Stellen Sie die Anzahl der Zyklen auf 60 ein.

Bringen Sie die Ratte nach dem Laden in ihren Käfig zurück und halten Sie einen 12-12 Stunden hellen Dunkelheitsplan in einem Käfig mit ausreichend Platz und Futter ad libitum ein, bis es Zeit für die Analyse ist. Die kurzfristigen Veränderungen der Chondrozytenlebensfähigkeit in Proben, die einer zyklischen Belastung von 20 Newton ausgesetzt waren, wurden untersucht. Die Anzahl der toten Chondrozyten stieg 12 Stunden nach dem Trauma an.

Umgekehrt nahm die Zahl der lebenden Chondrozyten weiter ab. Der Gelenkknorpel der Rattenknie, der 20 Newton dynamischer Belastung ausgesetzt war, wurde beschädigt und eine fokale Läsionszone wurde in allen Proben im lateralen Femurkondylen bestätigt. Die Läsionsgröße nahm während des achtwöchigen Beobachtungszeitraums nicht progressiv zu.

Die Grenze, die der Grenzfläche der Läsion und des nicht betroffenen Knorpels entspricht, konnte im betroffenen Bereich beobachtet werden. Das Wichtigste ist die richtige Einstellung der Prüfkraft und der Anzahl der Zyklen. Mit dieser Technik kann man die mechanische Belastung der Gelenkabdeckung des Blutes kontrollieren und den Weg ebnen, um zu untersuchen, wie mechanische Belastung die Entwicklung oder Vorbeugung von Arthrose beeinflusst.