Protokoll zur Entwicklung eines Femurosteotomiemodells bei Wistar Albino-Ratten

Dieses Femurosteotomiemodell kann Forschern helfen, den Prozess der Frakturheilung zu untersuchen und zu bewerten, wie ein Medikament die Frakturheilung beeinflussen könnte. Es ist ein einfaches und leicht zu folgendes Nagetiermodell, das Forschern helfen kann, zu erkennen, ob ein Medikament knochenheilende Eigenschaften hat und seinen Wirkmechanismus zu verstehen. Auch wenn es sich hauptsächlich auf die Beobachtung und Analyse der Frakturheilung konzentriert, kann es auch Einblicke in die Krankheitspathogenese geben.

Diese Methode kann zukünftige Forschungen zur Knochenheilung bei Gesundheit und Krankheit leiten. Es kann verwendet werden, um die Wirkung potenzieller osteoanaboler Medikamente zu bewerten. Die Induktion einer richtigen Bruchlinie und die Bruchfixierung mit einem K-Draht sind eine Herausforderung.

Ein paar Übungssitzungen sollten helfen. Die Einfachheit und Reproduzierbarkeit dieser Methode zeigt sich in der visuellen Demonstration Pawan Pagaku, ein Junior Resident aus meinem Labor, wird helfen, das Verfahren zu demonstrieren. Legen Sie zunächst den wachshaltigen Wachsblock bis zu einer Tiefe von 2,5 Zentimetern auf den OP-Tisch und decken Sie ihn mit sterilen Vorhängen ab.

Nach einem einen Zentimeter vertikalen Hautschnitt an der seitlichen Seite des rechten Oberschenkels legen Sie den Musculus vastus lateralis frei, indem Sie die tiefe Faszie mit der Metzenbaum-Schere trennen. Teilen Sie den Vastus lateralis in Linie mit den Muskelfasern, bis der Schaft des Femurs erreicht ist. Verwenden Sie dann den periostalen Aufzug, um den Knochen von den daran befestigten Muskeln zu befreien.

Nach der Injektion von Lokalanästhesie in und um das Periost erzeugen Sie eine Vertiefung im mittleren Drittel des Femurschaftes mit der chirurgischen Klinge Nummer 15. Legen Sie einen Meißel auf die Vertiefung und klopfen Sie vorsichtig mit einem Hammer auf den Meißel, um den Knochen im mittleren Drittel des Schaftes vollständig zu brechen. Fixieren Sie den Bruch intern mit einem einen Millimeter sterilen K-Draht, der mit Hilfe einer batteriebetriebenen Bohrmaschine gehalten wird.

Führen Sie den K-Draht durch die Bruchstelle in den Markkanal des distalen Fragments. Bohren Sie dann den K-Draht durch das distale Ende des Femurs. Nachdem Sie die Fraktur reduziert haben, schieben Sie den K-Draht vom distalen Ende in den Kanal des proximalen Fragments, bis er in der Trochanterregion gekauft wird.

Schneiden Sie den distalen Teil des K-Drahtes, der durch die Haut ragt, mit einem Drahtschneider ab. Biegen Sie die Spitze des K-Drahtes mit einer Zange auf etwa 90 Grad und verwenden Sie eine in Betadine getränkte Mullbinde zum Stiftverband. Der K-Draht wirkt als Markschiene, um die Fraktur in einer reduzierten Position zu halten.

Üben Sie Druck auf den Blutungsbereich mit steriler Gaze oder Arterienzange aus, um Blutungen zu stoppen. Stellen Sie eine vollständige Hämostase sicher, bevor Sie die Haut mit einer 4-0-Nylonnaht schließen. Reinigen Sie die Wunde mit Betadine und bedecken Sie sie mit steriler Gaze und Mikroporenklebeband.

Zur postoperativen Behandlung bringen Sie die Ratten in ihre Käfige zurück und geben Sie fünf Tage nach dem Eingriff intraperitoneal eine halbsynthetische Standarddiät sowie Antibiotika und Analgetika intraperitoneal. Schließlich beurteilen Sie die Knochenheilung einmal wöchentlich durch Röntgenaufnahme der gebrochenen Stelle. Röntgenaufnahmen des Femurs der Ratte mit dem K-Draht NC2 vor der Einleitung der Fraktur und einen Tag nach der Operation sind hier gezeigt.

Die Frakturheilung wird radiologisch überwacht, indem sequentielle wöchentliche Röntgenaufnahmen der operierten Stelle durchgeführt werden, um die Kallusbildung zu beurteilen. Die Fraktur bleibt reduziert und mit dem intramedullären K-Draht immobilisiert. Nach dem Opfer zu einem vorgegebenen Zeitpunkt wurde der Oberschenkelknochen sorgfältig in Formalin konserviert, gefolgt von einer Knochenentkalkung.

Knochen mit Kallus wurde nach optimaler Entkalkung erhalten. Der intakte Kallus und der sagittale Abschnitt des Kallus sind hier dargestellt. Der Kallus wird intermittierend beurteilt, um eine optimale Entkalkung zu gewährleisten, bevor er mit anderen Techniken bewertet wird.

Bilder mit geringer Vergrößerung und hoher Vergrößerung des Hämatoxylin- und Eosin-gefärbten Abschnitts der Frakturstelle werden hier gezeigt. Die verfärbten Abschnitte der Frakturstelle zeigen einen harten Kallus mit der Bildung von Knorpel und neuem Knochen. Das gebrochene Ende des Knochens und die zweite kortikale Region sind hier zu sehen.

Der schmerzempfindlichste Teil der Wunde, und es ist wichtig, das Periost an der Frakturstelle mit einem Lokalanästhetikum vor der Osteotomie zu infiltrieren. Es kann eine immunhistochemische und radiologische Analyse der Hornhaut, Mikro-CT für die quantitative Histomorphometrie, die biomechanische Stärke der Kallusanalyse von Serum analysieren. Diese Technik ist nützlich, um das osteogene Potenzial, den Wirkmechanismus und die vergleichende Analyse vielversprechender osteoanaboler Medikamente zu bestimmen.