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Herstellung und Charakterisierung von kolorektalen Krebs-Organoiden aus der SW1222-Zelllinie in u...
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JoVE Journal Bioengineering
Fabrication and Characterization of Colorectal Cancer Organoids from SW1222 Cell Line in Ultrashort Self-Assembling Peptide Matrix

Herstellung und Charakterisierung von kolorektalen Krebs-Organoiden aus der SW1222-Zelllinie in ultrakurzer selbstorganisierender Peptidmatrix

Full Text
1,519 Views
10:23 min
May 3, 2024

DOI: 10.3791/66060-v

Rosario Perez-Pedroza1,2, Manola Moretti1,2,3, Charlotte A. E. Hauser1,2,3

1Laboratory for Nanomedicine, Biological & Environmental Science & Engineering,King Abdullah University of Science and Technology, 2Computational Bioscience Research Center,King Abdullah University of Science and Technology, 3Red Sea Research Center,King Abdullah University of Science and Technology

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Dieses Protokoll zielt darauf ab, biofunktionelle selbstorganisierende Peptide auf Zelladhäsion, Organoidmorphologie und Genexpression durch Immunfärbung zu bewerten. Wir werden eine Darmkrebszelllinie verwenden, um eine kostengünstige Möglichkeit zu bieten, Organoide für intensive Tests zu gewinnen.

Unsere Forschung zielt darauf ab, ultrakurze selbstorganisierende Peptide als Matrizen für Darmkrebs-Organoidkulturen zu evaluieren. Wir beschäftigen uns mit Fragen zur Morphologie von Organoiden, zur Lebensfähigkeit, zur Proliferation sowie zur Adhäsion und zum Einfluss der Biofunktionalisierung. Ziel ist es, die Zusammensetzung der Peptidmatrix für ein effektives Organoidwachstum zu optimieren und einen Beitrag zur regenerativen Medizin zu leisten.

Zu den Spitzentechnologien in unserem Bereich gehören der 3D-Biodruck für die präzise organische Fertigung, mikrofluidische Plattformen für dynamische Kulturumgebungen und fortschrittliche Bildgebungswerkzeuge wie Rasterkraftmikroskopie und Multiphotonenmikroskopie. Die CRISPR-Cas9-Geneditierung verfeinert die genetische Modifikation, während die Einzelzell-RNA-Sequenzierung tiefgreifende molekulare Einblicke liefert. Zu den aktuellen experimentellen Herausforderungen gehören die Verbesserung der Reproduzierbarkeit von Organoiden, die Verfeinerung der Vaskularisierung für größere Konstrukte und die Nachahmung komplexer Gewebearchitekturen.

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Schlüsselwörter: Darmkrebs-Organoide SW1222-Zelllinie ultrakurze selbstorganisierende Peptidmatrix Hydrogele extrazelluläre Matrix Zell-Matrix-Interaktionen Zelladhäsion Lumenbildung Immunfärbung Fluoreszenzbildanalyse

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