Multiplex-Lebendzell-Bildgebung für das Ansprechen auf Medikamente in patientenabgeleiteten Organoidmodellen von Krebs
January 5th, 2024
Patient-Derived Tumor Organoids sind ein ausgeklügeltes Modellsystem für die Grundlagen- und translationale Forschung. Dieser Methodenartikel beschreibt die Verwendung von Multiplex-Fluoreszenz-Lebendzell-Imaging zur gleichzeitigen kinetischen Beurteilung verschiedener Organoid-Phänotypen.
Wir wenden von Patienten abgeleitete Organoidmodelle an, die aus tatsächlichen Tumorproben von Patienten erstellt werden, um zu untersuchen, wie die Tumore auf Medikamente ansprechen. Wir können auch die molekularen Eigenschaften definieren, die mit der Reaktion korrelieren. Diese Ergebnisse werden dann verwendet, um die besten neuen Therapien zu priorisieren, um in Zukunft in den klinischen Studien voranzukommen.
Eine der größten Herausforderungen bei der Verwendung von patientenabgeleiteten Organoidmodellen besteht darin, dass sie eine endliche Ressource sind. Darüber hinaus gibt es nur sehr wenige Standardkits zur Bewertung des Ansprechens von Medikamenten in Organoidmodellen, die die Probe in einem Format aufbewahren, das andere nachgelagerte Analysen ermöglicht, wie z. B. transkriptomische Profilerstellung. Wir entwickelten einen Multiplex-Ansatz zur kinetischen Überwachung des therapeutischen Ansprechens in Organoidmodellen.
Wir verwenden Fluoreszenzfarbstoffe, die für verschiedene zelluläre Prozesse spezifisch sind, was einen Einblick in den Mechanismus der Wirkstoffaktivität in jedem Organoidmodell gibt. In einem einzigen Experiment sammeln wir sowohl funktionelle als auch zeitliche Verlaufsdaten und die Proben stehen für andere Assays zur Verfügung. Diese Methode kann angewendet werden, um das Ansprechen auf eine breite Palette von therapeutischen Modalitäten zu bewerten, die über niedermolekulare Inhibitoren hinausgehen, einschließlich der Strahlenempfindlichkeit.
Wir sind auch weiterhin innovativ, indem wir Werkzeuge für andere zelluläre Phänotypen entwickeln, die kinetisch gemessen werden können, wie z. B. Seneszenz.
Übersicht
Dieser Artikel behandelt die Verwendung von patientenabgeleiteten Tumor-Organoiden als Modellsystem für die Bewertung der Arzneimittelantwort. Er hebt einen multiplexen fluoreszierenden Live-Zell-Imaging-Ansatz zur Bewertung von Organoid-Phänotypen hervor.
Wichtige Studienkomponenten
Wissenschaftsbereich
- Neurowissenschaften
- Onkologie
- Translationale Forschung
Hintergrund
- Patientenabgeleitete Organoide werden aus tatsächlichen Tumorproben von Patienten hergestellt.
- Sie werden verwendet, um Tumorreaktionen auf verschiedene Therapien zu untersuchen.
- Herausforderungen umfassen begrenzte Ressourcen und die Notwendigkeit kompatibler Kits zur Bewertung der Arzneimittelantwort.
- Nachgelagerte Analysen, wie das transkriptomische Profiling, sind für umfassende Forschung unerlässlich.
Zweck der Studie
- Um zu bewerten, wie Tumore auf Medikamente unter Verwendung von Organoid-Modellen reagieren.
- Um molekulare Merkmale zu definieren, die mit therapeutischen Reaktionen korrelieren.
- Um neue Therapien für klinische Studien basierend auf Organoid-Reaktionen zu priorisieren.
Verwendete Methoden
- Multiplexes fluoreszierendes Live-Zell-Imaging.
- Genetische Überwachung der therapeutischen Reaktionen in Organoid-Modellen.
- Gleichzeitige Bewertung verschiedener Organoid-Phänotypen.
- Integration von Arzneimittelantwortdaten mit molekularem Profiling.
Hauptergebnisse
- Erfolgreiche Anwendung des multiplexen Imaging zur Bewertung von Organoid-Reaktionen.
- Identifikation molekularer Merkmale, die mit der Wirksamkeit von Medikamenten verbunden sind.
- Etablierung eines Rahmens zur Priorisierung von Therapien für klinische Studien.
- Demonstration des Potenzials von Organoid-Modellen in der translationalen Forschung.
Schlussfolgerungen
- Patientenabgeleitete Organoide sind wertvoll für das Verständnis von Arzneimittelreaktionen.
- Der multiplexe Ansatz verbessert die Bewertung von Organoid-Phänotypen.
- Die Ergebnisse können zukünftige Designs klinischer Studien und therapeutische Strategien beeinflussen.
Häufig gestellte Fragen
Chapters in this video
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Introduction
1:24
Plating Intact Patient‐Derived Organoids and Setting Up Imaging Parameters for Multiplexed Live‐Cell Imaging
6:34
Image Analysis in Gen5 Software to Analyze Drug Response in Patient‐Derived Organoids Using Multiplexed Live‐Cell Imaging
