Name: Erforschung alternativer Perfusionslösungen unter Verwendung von polymerisierten hämoglobinbasierten Sauerstoffträgern der nächsten Generation in einem Modell der ex vivo Lungenperfusion von Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-14T14:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 47 s
Description: Erfahren Sie die Anwendung von polymerisiertem Hämoglobin als Perfusat in einem Rattenmodell der ex vivo Lungenperfusion. Diese Methode verbessert die Organerhaltung und erweitert den Spenderorganpool für Transplantationen.

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<meta charset="utf8"></head><body>Weiterentwicklung der Lungentransplantation mit PolyhHb-basierter Perfusion in EVLP-Modellen von Ratten

<ol><li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN%2FSRTR+2021+annual+data+report%3A+Lung%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">OPTN/SRTR 2021 annual data report: Lung.</a> Am J Transplant. 23, 2 Suppl 1 S379-S442 (2023).</li>
<li>Gouchoe, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+lung+perfusion+in+donation+after+circulatory+death%3A+A+post+hoc+analysis+of+the+normothermic+Ex+Vivo+lung+perfusion+as+an+assessment+of+extended%2Fmarginal+donors+lungs+trial%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Ex vivo lung perfusion in donation after circulatory death: A post hoc analysis of the normothermic Ex Vivo lung perfusion as an assessment of extended/marginal donors lungs trial.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. , 10.1016/j.jtcvs.2024.03.011 (2024).</li>
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<li>Steen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+lungs+from+a+non-heart-beating+donor%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Transplantation of lungs from a non-heart-beating donor.</a> Lancet. 357 (9259), 825-829 (2001).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> N Engl J Med. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li>
<li>Cypel, M., Neyrinck, A., Machuca, T. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+perfusion+techniques%3A+state+of+the+art+and+potential+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Intens+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Ex vivo perfusion techniques: state of the art and potential applications.</a> Intens Care Med. 45 (3), 354-356 (2019).</li>
<li>Gouchoe, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((XPS%E2%84%A2+Jensen+lung+as+a+low-cost%2C+high-fidelity+training+adjunct+to+ex-vivo+lung+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">XPS™ Jensen lung as a low-cost, high-fidelity training adjunct to ex-vivo lung perfusion.</a> Artif Organs. , 10.1111/aor.14623 (2023).</li>
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<li>Peel, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+the+impact+of+ex+vivo+lung+perfusion+on+hospital+costs+for+lung+transplantation%3A+A+retrospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transpl%22%5BJournal%5D)">Determining the impact of ex vivo lung perfusion on hospital costs for lung transplantation: A retrospective cohort study.</a> J Heart Lung Transpl. 42 (3), 356-367 (2023).</li>
<li>Warnecke, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+ex+vivo+preservation+with+the+portable+Organ+Care+System+Lung+device+for+bilateral+lung+transplantation+%28INSPIRE%29%3A+a+randomised%2C+open-label%2C+non-inferiority%2C+phase+3+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Respir+Med%22%5BJournal%5D)">Normothermic ex vivo preservation with the portable Organ Care System Lung device for bilateral lung transplantation (INSPIRE): a randomised, open-label, non-inferiority, phase 3 study.</a> Lancet Respir Med. 6 (5), 357-367 (2018).</li>
<li>Loor, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portable+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion%2C+ventilation%2C+and+functional+assessment+with+the+Organ+Care+System+on+donor+lung+use+for+transplantation+from+extended-criteria+donors+%28EXPAND%29%3A+a+single-arm%2C+pivotal+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Resp+Med%22%5BJournal%5D)">Portable normothermic ex vivo lung perfusion, ventilation, and functional assessment with the Organ Care System on donor lung use for transplantation from extended-criteria donors (EXPAND): a single-arm, pivotal trial.</a> Lancet Resp Med. 7 (11), 975-984 (2019).</li>
<li>Loor, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+EVLP+using+OCS+lung%3A+Cellular+and+acellular+perfusates%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prolonged EVLP using OCS lung: Cellular and acellular perfusates.</a> Transplantation. 101 (10), 2303-2311 (2017).</li>
<li>Bansal, S., Biswas, G., Avadhani, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondria-targeted+heme+oxygenase-1+induces+oxidative+stress+and+mitochondrial+dysfunction+in+macrophages%2C+kidney+fibroblasts+and+in+chronic+alcohol+hepatotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Mitochondria-targeted heme oxygenase-1 induces oxidative stress and mitochondrial dysfunction in macrophages, kidney fibroblasts and in chronic alcohol hepatotoxicity.</a> Redox Biol. 2, 273-283 (2014).</li>
<li>Park, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initial+investigation+on+the+feasibility+of+porcine+red+blood+cells+from+genetically+modified+pigs+as+an+alternative+to+human+red+blood+cells+for+transfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Initial investigation on the feasibility of porcine red blood cells from genetically modified pigs as an alternative to human red blood cells for transfusion.</a> Front Immunol. 14, 1298035(2023).</li>
<li>Ellingson, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continued+decline+in+blood+collection+and+transfusion+in+the+United+States-2015%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Continued decline in blood collection and transfusion in the United States-2015.</a> Transfusion. 57, Suppl 2 1588-1598 (2017).</li>
<li>Cuddington, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pilot+scale+production+and+characterization+of+next+generation+high+molecular+weight+and+tense+quaternary+state+polymerized+human+hemoglobin%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Pilot scale production and characterization of next generation high molecular weight and tense quaternary state polymerized human hemoglobin.</a> Biotechnol Bioeng. 119 (12), 3447-3461 (2022).</li>
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<li>Shonaka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+human-derived+hemoglobin+based+oxygen+vesicles+as+a+machine+perfusion+solution+for+liver+donation+after+cardiac+death+in+a+pig+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Impact of human-derived hemoglobin based oxygen vesicles as a machine perfusion solution for liver donation after cardiac death in a pig model.</a> PLoS One. 14 (12), e0226183(2019).</li>
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<li>Cuddington, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymerized+human+hemoglobin-based+oxygen+carrier+preserves+lung+allograft+function+during+normothermic+ex+vivo+lung+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Asaio+j%22%5BJournal%5D)">Polymerized human hemoglobin-based oxygen carrier preserves lung allograft function during normothermic ex vivo lung perfusion.</a> Asaio j. , 10.1097/mat.0000000000002118 (2024).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>10 cc Insulinspritze 29 G x 1/2" Nadel</td><td>B-D</td><td>309301</td><td></td></tr><tr><td>30 L Glas Batch Bioreaktor</td><td>Ace Glass</td><td></td><td></td></tr><tr><td>30g Nadel</td><td>Med Nadeln</td><td>BD-305106</td><td></td></tr><tr><td>Baytril (Enrofloxacin) Antibakterielle Tabletten</td><td>Elanco</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Calciumchlorid-Dihydrat (CaCl2.2H2O)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>10035-04-8</td><td>Für modifizierte Ringer's Laktat</td></tr><tr><td>CFBA Trägerfrequenz-Brückenverstärker Typ 672</td><td>Harvard Apparatus</td><td>731747</td><td></td></tr><tr><td>Connect Kit D150</td><td>Cole-Parmer</td><td> VK 73-3763</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Pinzetten</td><td>Fine Science Werkzeuge</td><td>11252-50</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Medical #5/45 Pinzette - Abgewinkelt 45°;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-25</td><td></td></tr><tr><td>Ecoline Star Edition 003, E100 Warmwasserbereiter</td><td>Lauda</td><td>LCK 1879</td><td></td></tr><tr><td>Abgelaufene humane leukoreduzierte, verpackte Erythrozyteneinheiten</td><td>Wexner Medical Center Canadian Blood Services Zen-Bio Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fiberoxygenator D150</td><td>Hugo Sachs Elektronik</td><td>PY2 73-3762</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>Fine Science Werkzeuge</td><td>11027-12</td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehyd (C5H8O2 70 Gew.-%)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>111-30-8 (G7776)</td><td></td></tr><tr><td>Halsted-Mosquito Hämostat</td><td>Roboz Surgical</td><td>RS-7112</td><td></td></tr><tr><td>Heparin 30.000 Einheiten pro 30 ml</td><td>APP Pharmazeutika</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Humanserum Albumin (HSA)</td><td>OctaPharma Plasma</td><td></td><td>Perfusat-Additiv</td></tr><tr><td>IL2 Schlauchset für Perfusat</td><td>Harvard Apparat</td><td>733842</td><td></td></tr><tr><td>IPL-2 Basic Lungenperfusionssystem</td><td>Harvard Apparat</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ketamin 500 mg pro 5 ml</td><td>JHP Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kanüle linker Vorhof</td><td>Harvard Apparat 730712</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Liqui-Cel EXF Serie G420 Membranschütz</td><td>3M</td><td>G420</td><td>Gasschütz</td></tr><tr><td>kaliumarme Dextran-Glukoselösung (Perfadex)</td><td>XVIVO-Lösung</td><td></td><td>, die die Lunge spült</td></tr><tr><td>Masterflex Platinum Coated Tubing (Größe: 73,17,16,24)</td><td>Cole-Palmer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>N-Acetyl-L-Cystein (NALC, C5H9NO3S)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>616-91-1 (A7250)</td><td>Für modifizierte Ringer-Laktat-Nalgengefäße</td></tr><tr><td>( 10L, 20L)</td><td>Nalgene</td><td></td><td>Filtrationsgefäße</td></tr><tr><td>Schlauchpumpe</td><td>&nbsp; Ismatec</td><td>&nbsp; ISM 827B</td><td></td></tr><tr><td>PES, 0,65 & Mikro m TFF-Modul</td><td>Repligen</td><td>N02-E65U-07-N</td><td></td></tr><tr><td>PhysioSuite</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>PS-MSTAT-RT</td><td></td></tr><tr><td>Polyethersulfon (PES), 0,2 & Mikro; m TFF-Modul</td><td>Repligen</td><td>N02-S20U-05-N</td><td></td></tr><tr><td>Polysulfon (PS), 500 kDa TFF-Modul</td><td>Repligen</td><td>N02-P500-05-N</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchlorid (KCl)</td><td>Fisher Scientific</td><td>7447-40-7</td><td>Für PBS</td></tr><tr><td>PowerLab 8/35</td><td>&nbsp; ADInstruments</td><td>730045</td><td></td></tr><tr><td>Pulmonalarterienkanüle</td><td>Harvard Apparatus</td><td>730710</td><td></td></tr><tr><td>Pumpenkopfschlauch (Größe: 73,17,16,24)</td><td>PharMed BPT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Puralube&nbsp; Augensalbe</td><td>Dechra</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Schere</td><td>Fine Science Werkzeuge</td><td>14090-11</td><td></td></tr><tr><td>SCP Servoregler für Perfusion Typ 704</td><td>Harvard Gerät</td><td>732806</td><td></td></tr><tr><td>Kleintierbeatmungsgerät Modell 683</td><td>Harvard Gerät</td><td>55-000</td><td></td></tr><tr><td>Natriumchlorid (NaCl)</td><td>Fisher Scientific</td><td>7647-14-5 (S271-10)</td><td>Für PBS und Kochsalzlösung</td></tr><tr><td>Natriumcyanoborohydrid (NaCNBH3)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>25895-60-7</td><td></td></tr><tr><td>Natriumdithionit (Na2S2O4)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>7775-14-6</td><td></td></tr><tr><td>Natriumhydroxid (NaOH)</td><td>Fisher Scientific</td><td>1310-73-2</td><td>Für modifiziertes Ringer-Laktat</td></tr><tr><td>Natriumlactat (NaC3H5O3)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>867-56-1</td><td>Für modifiziertes Ringer-Laktat</td></tr><tr><td>Natriumphosphat zweibasisch (Na2HPO4)</td><td>Fisher Scientific</td><td>7558-79-4</td><td>Für PBS</td></tr><tr><td>Natriumphosphat monobasisch (NaH2PO4)</td><td>Fisher Scientific</td><td>7558-80-7</td><td>Für PBS</td></tr><tr><td>SomnoSuite Anästhesiesystem für Kleintiere</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SS-MVG-Modul</td><td></td></tr><tr><td>Sprague-Dawley Ratten</td><td>Envigo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TAM-A Wandler Verstärker Modul Typ 705/1</td><td>Harvard Apparat</td><td>73-0065</td><td></td></tr><tr><td>TAM-D Wandler Verstärker Typ 705/2</td><td>Harvard Apparat</td><td>&nbsp; 73-1793</td><td></td></tr><tr><td>TCM Zeitregelmodul Typ 686</td><td>Harvard Apparat</td><td>731750</td><td></td></tr><tr><td>Trachealkanüle</td><td>Harvard Apparat</td><td>733557</td><td></td></tr><tr><td>Schlauchset für Feuchtkammer</td><td>Harvard Apparatur</td> <td>& 73V83157</td><td></td></tr><tr><td>Schlauchkassette</td><td>Cole-Parmer</td><td>IS 0649</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette #5 Dumostar</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>&nbsp; INS500085-A</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette #5 Edelstahl, gebogen</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>IND500232</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette #7 Titan</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>&nbsp; </td><td></td>INS600187</tr><tr><td>Tygon E-3603 Schlauch 2,4 mm ID</td><td>Harvard Apparat</td><td>721017</td><td>Perfusatleitung in die Lunge</td></tr><tr><td>Tygon E-3603 Schlauch 3,2 mm ID</td><td>Harvard Apparat 721019</td><td></td><td>Perfusatleitung aus der Lunge</td></tr><tr><td>Vannas-Tübingen Federschere</td><td>Fine Science Tools</td><td>15008-08</td><td></td></tr><tr><td>VCM Beatmungsgerät Steuermodul Typ 681</td><td>Harvard Apparat</td><td>731741</td><td></td></tr><tr><td>William's E Media</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>A12176-01</td><td>Perfusatzusatz</td></tr><tr><td>Xylazin 100 mg pro 1 ml</td><td>Akorn</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

erforschung alternativer perfusionslösungen unter verwendung von polymerisierten hämoglobinbasierten sauerstoffträgern der nächsten generation in einem modell der ex vivo lungenperfusion von ratten

Exploring Alternative Perfusion Solutions Using Next-Generation Polymerized Hemoglobin-Based Oxygen Carriers in a Model of Rat Ex Vivo Lung Perfusion

Die Validierung unseres PolyhHb-basierten Perfusats und darüber hinaus die Stabilität dieses Perfusats über mehrere Stunden ist in Abbildung 10 dargestellt. Während der ersten 1 h zeigten alle getesteten Perfusate (PolyhHb, Control (Williams Media + 5% HSA), RBC-basiert) eine leichte Abnahme von LApO 2 (PostpO 2). Das Erythrozyten-basierte Perfusat zeigte jedoch nach 1 h eine signifikante Abnahme im Vergleich zu PolyhHb (p &lt; 0,05). Bei Tests in den nächsten Stunden wiesen sowohl PolyhHb- als auch Kontrollperfusate stabile LApO 2 auf, während PolyhHb einen nicht signifikanten Trend (p &gt; 0,05) eines höherenpO 2 aufwies (Abbildung 10A). DeltapO 2, d.h. die Änderung des LApO 2 gegenüber PApO 2, nahm in der Erythrozytenperfusatgruppe nach 1 h erneut signifikant ab (p &lt; 0,05), während sie in der PolyhHb- und Kontrollperfusat stabil blieb, mit einem nicht signifikanten Trend (p &gt; 0,05) eines höherenpO 2 in der PolyhHb-Gruppe (Abbildung 10B). LA pCO2 war im Erythrozytenperfusat und im Kontrollperfusat im Vergleich zum PolyhHb-Perfusat nach der ersten Stunde signifikant niedriger (p &lt; 0,05), und dies galt auch für die nächsten Stunden beim Vergleich von PolyhHb und Kontrollperfusat (Abbildung 10C). Schließlich war delta pCO 2 (d.h. die Änderung des LApCO2 von PA pCO2) im Erythrozytenperfusat nach 1 h signifikant erhöht (p &lt; 0,05) und blieb nach mehreren Stunden sowohl im PolyhHb- als auch im Kontrollperfusat stabil (Abbildung 10D).
Die über die Erfassungssoftware gesammelten physiologischen Echtzeitdaten der Lunge liefern ergänzende Informationen zu den Perfusatgaswerten (Abbildung 11). Der pulmonale Gefäßwiderstand (PVR) zeigte erneut, dass das Erythrozytenperfusat in der ersten Stunde signifikant anstieg (p &lt; 0,05). Über die verbleibenden Stunden wiesen sowohl das PolyhHb- als auch das Kontrollperfusat einen stabilen und niedrigen PVR auf (Abbildung 11A). Die Veränderung des Lungengewichts nahm auch im Erythrozytenperfusat in der ersten Stunde signifikant zu (p &lt; 0,05) und nahm sowohl im PolyhHb- als auch im Kontrollperfusat in den verbleibenden Stunden zu, wobei das Gewicht im PolyhHb-Perfusat etwas höher war (Abbildung 11B). Schließlich nahm die Compliance in der Erythrozytenperfusatgruppe innerhalb der ersten Stunde signifikant ab (p &lt; 0,05), während es eine nicht signifikante Abnahme zwischen PolyhHb und Kontrollperfusat gab (p &gt; 0,05), wobei PolyhHb nach 4 h die höchste Compliance aufwies (Abbildung 11C).
In Bezug auf den technischen Erfolg und/oder Misserfolg (Abbildung 12) sind mehrere Dinge wichtig, auf die hingewiesen werden sollte. In Abbildung 12A sehen wir das Versagen des Allotransplantats aufgrund einer Nekrose des rechten Oberlappens aufgrund eines möglichen Gerinnsels im Lungengefäßsystem. In Abbildung 12B sehen wir auch schwere Gewebeödeme im rechten Lappen, die zum Scheitern des Experiments führen. Abbildung 12C-E zeigt die korrekte Konservierung und das Aussehen des Gewebes unter den jeweiligen Versuchsbedingungen. In Abbildung 12F schließlich sehen wir eine ideale Gewebekonservierung nach dem Spülen mit einer Lungenkonservierungslösung.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig01.jpg"> Abbildung 1: Synthese und Aufreinigung von PolyhHb im Pilotmaßstab. (A) Bioreaktor für die Polymerisation. (B) Die Tangentialflussfiltration (TFF) wird in einem Kühlschrank mit 4 °C eingerichtet. (C) Nahaufnahme des parallelen TFF-Aufbaus für die Waschung der roten Blutkörperchen (RBC) und die Reinigung von Hämoglobin (Hb). (D) Nahaufnahme des zweistufigen TFF-Systems der Serie für die PolyhHb-Aufreinigung. Die Behälter für die Stufen eins und zwei befinden sich jeweils links und rechts der Filter. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig02.jpg"> Abbildung 2: Überblick über den Ex-vivo-Lungenperfusionskreislauf (EVLP). (A) Schematische Zeichnung des EVLP-Kreislaufs. (B) In-vivo-Platzierung einer Pulmonalarterienkanüle und einer linken Vorhofkanüle. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig03.jpg"> Abbildung 3: Chirurgische Instrumente, die für die ex vivo Lungenperfusion verwendet werden. (A) Seidennaht. (B) Pinzette mit feiner Spitze (mittlere Länge). (C) Pinzette mit feiner Spitze (lange Länge). (D) Gebogene Pinzette mit feiner Spitze. (E) Mayo-Schere. (F) Trachealkanüle. (G) Kanüle der Lungenarterie (PA). (H) Kanüle für den linken Vorhof (LA). I) Aufrolleinrichtungen für den Brustkorb. (J) Federschere. (K) DeBakey-Zange. (L) Hämostat. (M) Kleine Schere. (N) Kleine gebogene Pinzette mit feiner Spitze. (O) Adson-Tonabnehmer. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig04.jpg"> Abbildung 4: Chirurgische Positionierung und Freilegung der Vena cava inferior (IVC). (A) Positionierung der Ratte für die Lungenbeschaffung. (B) Freilegung der infrahepatischen IVC. (C) Kanülierung der IVC und Injektion von Heparin mit einer 27G-Nadel. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig05.jpg"> Abbildung 5: Kanülierung der Luftröhre mit dem Endotrachealtubus (ET). (A) Beginnen Sie mit dem Schneiden der Haut im Halsbereich. (B) Präparieren Sie die Gurtmuskulatur und das Bindegewebe, um die Luftröhre freizulegen. (C) Einen Querschnitt an der vorderen Luftröhre zwischen den Knorpelringen vornehmen, der groß genug für die ET-Sonde ist. (D) Führen Sie den ET-Schlauch in die Luftröhre ein und befestigen Sie ihn mit einer Seidennaht. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig05large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig06.jpg"> Abbildung 6: Platzierung der Lungenarterienkanüle. (A) Freilegung der Brusthöhle zur Visualisierung von Herz und Lunge. (B) Identifizierung der PA und Isolierung der PA. (C) Platzieren der Naht um PA. (D) Schneiden eines kleinen Lochs in den Ausflusstrakt des rechten Ventrikels (RVOT) für die PA-Kanüle. (E) Richtige Platzierung der PA-Kanüle in der PA. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig06large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig07.jpg"> Abbildung 7: Spülen der Lunge mit Konservierungslösung. (A) Verbinden der Spülkanüle mit der Kanüle der Lungenarterie (PA). (B) Klare Flüssigkeit sollte aus dem linken Vorhof (LA) austreten. (C) Verbinden der PA-Kanüle mit dem ex vivo-Lungenperfusionskreislauf , um einen ordnungsgemäßen Fluss und eine ordnungsgemäße Platzierung der PA-Kanüle zu gewährleisten. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig07large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig08.jpg"> Abbildung 8: Platzieren der linken Vorhofkanüle (LA). (A). Sanftes Erweitern des Mitralklappenanulums mit einer Pinzette. (B) Lockeres Platzieren einer Seidennaht um den linken Ventrikel (LV). Platzieren der LA-Kanüle im linken Vorhof. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig08large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig09.jpg"> Abbildung 9: Extraktion des Herz-Lungen-Blocks. (A) Ligatur des Ösophagus unterhalb des Hämostaten. (B) Durch das Präparieren wird der Herz-Lungen-Block von der Wirbelsäule befreit. (C) Präparieren der Luftröhre. (D) Ordnungsgemäße Anschlüsse und Platzierung der ex vivo Lungenperfusionskanüle (EVLP). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig09large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig10.jpg"> Abbildung 10. Perfusieren Sie den Gasgehalt im Laufe der Zeit. (A) Post pO2, d.h. linksatrialer (LA)pO 2, über eine 4-stündige Perfusion. (B) DeltapO 2, d.h. die Veränderung des LApO 2 aus der Lungenarterie (PA)pO 2 über eine 4 h Perfusion. (C) Nach pCO2, d. h. LApO 2, über eine Perfusion von 4 h. (D) Delta pCO2, d. h. die Änderung des LApO 2 von PApO 2 über eine 4 h lange Perfusion. Blau steht für PolyhHb-Perfusat, Schwarz für Kontrollperfusat (Standard-William-Medien) und Rot für Erythrozyten-basiertes Perfusat. N=6 pro Gruppe. Fehlerbalken zeigen die Standardabweichung an. Die Signifikanz wurde mit einem Student's T-Test getestet und wird mit einem *, p &lt; 0,05 angegeben. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig10large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 11" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig11.jpg"> Abbildung 11. Physiologische Daten der Lunge in Echtzeit. (A) Pulmonaler Gefäßwiderstand (PVR) über 4 h Reperfusion. (B) Veränderung (gekennzeichnet durch Δ) des Lungengewichts im Laufe der Zeit. (C) Compliance über 4 h Reperfusion. Blau steht für PolyhHb-Perfusat, Schwarz für Kontrollperfusat (Standard-William-Medien) und Rot für Erythrozyten-basiertes Perfusat. N=6 pro Gruppe. Fehlerbalken zeigen die Standardabweichung an. Die Signifikanz wurde mit einem Student's T-Test getestet und wird mit einem *, p &lt; 0,05 angegeben. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig11large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 12" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66702/66702fig12.jpg"> Abbildung 12: Repräsentative technische Ergebnisse. (A) Versagen des Transplantats aufgrund eines Infarkts des rechten Oberlappens. (B) Versagen des Transplantats aufgrund eines schweren Ödems im rechten Lappen. (C) Erfolgreiche Kanulation und Perfusion des Lungenallotransplantats mit Erythrozytenperfusat. (D) Erfolgreiche Kanulation und Perfusion des Lungenallotransplantats mit PolyhHb-Perfusat. (E) Erfolgreiche Kanulation und Perfusion des Lungenallotransplantats mit Standardperfusat. (F) Ideale Gewebekonservierung nach dem Spülen mit Lungenkonservierungslösung. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66702/66702fig12large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Erforschung alternativer Perfusionslösungen unter Verwendung von polymerisierten hämoglobinbasierten Sauerstoffträgern der nächsten Generation in einem Modell der ex vivo Lungenperfusion von Ratten

Lung transplantation is hampered by the lack of suitable donors. Previously, donors that were thought to be marginal or inadequate were discarded. ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

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Ex-vivo-Lung Perfusion (EVLP) konnten Lungentransplantation beim Menschen leichter, indem du die Fähigkeit, Organe zu bewerten und zu erweitern den Spenderkreis zur Verfügung stehen. Hier beschreiben wir die Entwicklung einer Ratte EVLP Programm und Verfeinerungen, die für ein reproduzierbares Modell für zukünftige Erweiterungen zu ermöglichen.

Methode Isolated<em&gt; Ex vivo</em&gt; Lung Perfusion in einem Rattenmodell: Lehren aus Entwicklung einer Ratte EVLP Programm gelernt

Dieses Papier beschreibt die kardiopulmonalen Bypass bei Mäusen durchführen. Dieses neue Modell erleichtert die Untersuchung der molekularen Mechanismen Organschäden.

Kardiopulmonalen Bypass in einem Mausmodell: ein neuer Ansatz

Fehlt ein wichtiger Leber Geber, und Kriterien für die Leber Spender wurden erweitert. Normothermic ex Vivo Leber Perfusion (NEVLP) wurde entwickelt, um zu bewerten und Organfunktion zu ändern. Diese Studie zeigt einem Rattenmodell der NEVLP und testet, ob der pegylierten-Katalase, um Verletzungen der Leber Erhaltung zu mildern.

Ein kleines Tier Modell der Ex Vivo Normothermic Leber Perfusion

Das isolierte Kaninchenlungenpräparat ist ein Goldstandardwerkzeug in der Lungenforschung. Diese Publikation zielt darauf ab, die Technik zu beschreiben, die für die Untersuchung physiologischer und pathologischer Mechanismen entwickelt wurde, die an der Reaktivität der Atemwege, der Lungenerhaltung und der präklinischen Forschung bei Lungentransplantationen und Lungenödemen beteiligt sind.

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Ex-vivo-Lungen sind nützlich für eine Vielzahl von Experimenten, um physiologische Daten zu sammeln, wobei die Störvariablen von In-vivo-Experimenten ausgeschlossen werden. Kommerzielle Setups sind oft teuer und in der Art der Daten, die sie sammeln können, begrenzt. Wir beschreiben eine Methode zum Aufbau eines vollständig modularen Aufbaus, der an verschiedene Studiendesigns angepasst werden kann.

Design und Implementierung eines ex vivo Lungenperfusionsmodells für Ratten

In dieser Arbeit stellen wir ein Bewertungsprotokoll eines heterotopisch implantierten Herzens nach normothermer ex situ Konservierung im Rattenmodell vor.

Rattenmodell der normothermischen Ex-situ-perfundierten heterotopen Herztransplantation

Hier beschreiben wir die notwendigen Schritte zur Etablierung eines Ratten-EVLP-Modells und zeigen das Entzündungsprofil, das mit der perfundierten Lunge assoziiert ist. Ziel ist es, das Wissen und die Erfahrungen über das EVLP-Modell von Ratten zu verbreiten und so ein ganzheitliches Verständnis der biologischen Reaktionen zu ermöglichen, die mit dieser revolutionären Technik verbunden sind.

Etablierung eines ex vivo Lungenperfusionsmodells an Ratten für translationale Einblicke in die Lungentransplantation

Das Ziel ist es, ein neues ex vivo Lungenperfusionsmodell (EVLP) an Ratten zu entwickeln, das eine konsistente Lungenfunktion für 4 Stunden während der gesamten EVLP aufrechterhalten kann und der Industrie Implementierungsspezifikationen liefert, die eine robuste Methode zur Anwendung von EVLP auf Nagetiermodelle bieten.

Etablierung eines neuartigen ex vivo Lungenperfusionssystems für Rattenlungen nach Kreislauftod

Rand Transplantate, wie Fettleber, Transplantate von älteren Spendern oder Lebern nach Herztod (DCD) abgerufen tolerieren herkömmlichen, Kälte statische Speicher nur schlecht. Wir entwickelten ein neuartiges Modell der subnormothermic ex vivo Perfusion der Leber für die Erhaltung, Bewertung und Instandsetzung von Randlebertransplantationen vor der Transplantation.

Technik der Subnormothermic<em&gt; Ex-vivo-</em&gt; Leberperfusion für die Lagerung, Bewertung, Reparatur von Marginal Lebertransplantate

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Verfahren für Menschen V. saphena Ex-vivo- Perfusion und Außen Verstärkung

Erfahren Sie die Anwendung von polymerisiertem Hämoglobin als Perfusat in einem Rattenmodell der ex vivo Lungenperfusion. Diese Methode verbessert die Organerhaltung und erweitert den Spenderorganpool für Transplantationen.

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Erforschung alternativer Perfusionslösungen unter Verwendung von polymerisierten hämoglobinbasierten Sauerstoffträgern der nächsten Generation in einem Modell der ex vivo Lungenperfusion von Ratten

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