Ein einzigartiges Mausmodell zur quantitativen Beurteilung der Biofilmbildung auf chirurgischen Implantaten bei subkutanem Abszess

Unsere Forschung zielt darauf ab, eine innovative Behandlung für implantatbedingte Infektionen zu entwickeln. Um neuartige Biomaterialien mit potenziellen antimikrobiellen Eigenschaften zu evaluieren, entwickeln wir einen wertvolleren In-vivo-Testansatz. Frühere Tiermodelle sind in der Regel auf eine einzige implantatbedingte Infektion pro Tier beschränkt, was zu einer erheblichen Variabilität der durchschnittlichen Ergebnisse führen kann, die mit mehreren Tieren erzielt werden.

Unser Mausmodell ermöglicht einen direkten Vergleich der beiden Prägungen, die innerhalb eines einzigen Tieres identischen infektiösen Bedingungen ausgesetzt waren, und liefert somit eine wertvolle Bewertung der antibakteriellen Aktivität. Unsere experimentelle In-vivo-Methodik wird die Forschung an potenziell antimikrobiellen Biomaterialien beschleunigen und in Zukunft zur Entwicklung neuer Behandlungen für implantatbedingte Infektionen beitragen. Unser experimenteller Ansatz ist mit Standardgeräten und einfachen Verfahren in einem konventionellen Forschungsumfeld replizierbar und verbessert so das Verständnis der Mechanismen hinter der antibakteriellen Wirkung.

Positionieren Sie zunächst die betäubte Maus auf dem Operationsbett. Füllen Sie eine 10-Milliliter-Spritze mit steriler Luft und halten Sie eine 27-Gauge-Nadel an den Auslass. Kneifen und heben Sie nun vorsichtig die Basis des Maushalses an, um Platz zwischen dem Unterhautgewebe und der Faszie zu schaffen.

Platzieren Sie die Nadel in der Mittellinie zwischen den Schulterblättern der Maus und injizieren Sie drei Milliliter sterile Luft subkutan, um den Luftbeutel zu erstellen. Stellen Sie die Maus dann wieder in einen Käfig, der mit einem Wärmeleitpad erwärmt wurde. Injizieren Sie alle zwei Tage drei Milliliter sterile Luft, um das Aufblasen der Kavität aufrechtzuerhalten und einen reifen Beutel zu schaffen.

Nachdem Sie das Tier betäubt haben, injizieren Sie ihm subkutan Bupivacain. Machen Sie einen drei Millimeter langen Längsschnitt an der Oberseite des Beutels und führen Sie eine 18-Gauge-Nadel mit den verbundenen Drähten durch das Loch in den Beutel ein. Schieben Sie die Drähte mit einer Innenspritze einer 25-Gauge-Spinalnadel heraus.

Lassen Sie die Spitze der 18-Gauge-Nadel im Beutel, entfernen Sie vorsichtig den inneren Zylinder und injizieren Sie die Xen36-Kultur vorsichtig mit der Spritze. Entfernen Sie alle Nadeln, verschließen Sie die Haut mit einer Wundklammer und verschließen Sie sie mit topischem Hautkleber. Stellen Sie die Maus schließlich wieder in einen Käfig, der zur Überwachung mit einem Wärmeleitpad erwärmt wurde.

Die Kristallviolettfärbung zeigte eine konsistente Biofilmbildung auf beiden Drähten ohne beobachtbare Unterschiede. Absorptionsmessungen mit dem Dissolved Crystal Violet Assay zeigten keine statistisch signifikanten Unterschiede in der Bakterienlast zwischen den beiden Drähten. Die Zählung der koloniebildenden Einheiten und die quantitative PCR-Analyse von 16s ribosomaler RNA und LuxA-Genen zeigten keine statistisch signifikanten Unterschiede in der bakteriellen Belastung zwischen den beiden Drähten.