Name: Orthotope Transplantation der linken Lunge bei Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T12:55:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Erfahren Sie eine standardisierte orthotope Transplantation der linken Lunge bei Ratten zur Untersuchung chronischer Abstoßungsreaktionen. Diese Methode bietet eine höhere Reproduzierbarkeit und verkürzte Lernkurve für präklinische Forschung.

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<ol><li>Perch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+International+Thoracic+Organ+Transplant+Registry+of+the+International+Society+for+Heart+and+Lung+Transplantation%3A+Thirty-ninth+adult+lung+transplantation+report-2022%3B+focus+on+lung+transplant+recipients+with+chronic+obstructive+pulmonary+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">The International Thoracic Organ Transplant Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: Thirty-ninth adult lung transplantation report-2022; focus on lung transplant recipients with chronic obstructive pulmonary disease.</a> J Heart Lung Transplant. 41 (10), 1335-1347 (2022).</li>
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<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+orthotopic+left+lung+transplantation+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">A modified orthotopic left lung transplantation model in rats.</a> Heliyon. 10 (10), e30728(2024).</li>
<li>Tian, D., Shiiya, H., Sato, M., Nakajima, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+lung+transplantation+model%3A+modifications+of+the+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Rat lung transplantation model: modifications of the cuff technique.</a> Ann Transl Med. 8 (6), 407(2020).</li>
<li>Lee, Y. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+lung+transplantation+model+of+warm+ischemia%2Freperfusion+injury%3A+Optimizations+to+improve+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A rat lung transplantation model of warm ischemia/reperfusion injury: Optimizations to improve outcomes.</a> J Vis Exp. (176), e62455(2021).</li>
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<li>Krupnick, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+mouse+lung+transplantation+as+experimental+methodology+to+study+transplant+and+tumor+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Orthotopic mouse lung transplantation as experimental methodology to study transplant and tumor biology.</a> Nat Protoc. 4 (1), 86-93 (2009).</li>
<li>Kubisa, B., Schmid, R. A., Grodzki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Model+of+single+left+rat+lung+transplantation.+Relation+between+surgical+experience+and+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Rocz+Akad+Med+Bialymst%22%5BJournal%5D)">Model of single left rat lung transplantation. Relation between surgical experience and outcomes.</a> Rocz Akad Med Bialymst. 48, 70-73 (2003).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,9% Kochsalzlösung</td><td>Hopebio</td><td>HBPP008-100</td><td></td></tr><tr><td>10 cm sterile Petrischale</td><td>Beckman</td><td>10 cm Petrischale aus Kunststoff</td><td></td></tr><tr><td>16 G Führungsdraht für tracheale Intubation</td><td>Vega</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Feinpinzette #7-gebogen/11,5 cm</td><td>F.S.T</td><td>11271-30</td><td></td></tr><tr><td>Augenschere 10 cm gerade scharf</td><td>Jingzhong</td><td>Y00030</td><td></td></tr><tr><td>Hämostatische (gebogene Vollzahnzange) Pinzette</td><td>Jingzhong</td><td>Nr. J31180</td><td></td></tr><tr><td>Heparin-Natrium-Lösung</td><td>Leagene</td><td>Nr. R10119</td><td></td></tr><tr><td>Introcan-Nadel 14 G Schmetterlingsnadel</td><td>B.Braun</td><td>Artikel-Nr.: 4254210B</td><td></td></tr><tr><td>Introcan-Nadel 16 G Schmetterlingsnadel</td><td>B.Braun</td><td>Artikel-Nr.: 4254171B</td><td></td></tr><tr><td>LED-Doppelfaser-Kaltlichtquellenlampe</td><td>RWD</td><td>76312</td><td></td></tr><tr><td>Reinigungspapier für Brillengläser</td><td>Kimberly</td><td>34155</td><td></td></tr><tr><td>Lewis-Ratten&nbsp;</td><td>Guangzhou Dean Gene Technology Co., LTD. (Guangzhou, China)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medizinische Wattestäbchen</td><td>Gewinner/Wenjian</td><td>10 cm x 50 Stück</td><td></td></tr><tr><td>Medizinischer Nadelhalter</td><td>Chenghe</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Medizinische sterile Spritze</td><td>Gewinner/Wenjian</td><td>20 ml</td><td></td></tr><tr><td>Medizinische OP-Schere 12,5 cm gerade scharf</td><td>Pulun</td><td>PL1251</td><td></td></tr><tr><td>Medizinisches Klebeband</td><td>Wenxian</td><td>1527</td><td></td></tr><tr><td>Medizinische Gewebezange</td><td>RWD</td><td>Nr. J30607</td><td></td></tr><tr><td>Medizinischer Titan-Lidretraktor</td><td>Youdikang</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Mikrogekrümmte Pinzette</td><td>Jingzhong</td><td>JzCrWA3050 0,3/140 mm</td><td></td></tr><tr><td>Mikrovaskuläre hämostatische Pinzette 12,5 cm gebogen</td><td>Jinzhong</td><td>Nr. W40350</td><td></td></tr><tr><td>Mikrovaskuläre hämostatische Pinzette 12,5 cm gerade</td><td>Jinzhong</td><td>Nr. W40340</td><td></td></tr><tr><td>Mikro-CT</td><td>Pinseng</td><td>SNC-100</td><td></td></tr><tr><td>Miniatur-Gefäßclips</td><td>F.S.T</td><td>18055-06</td><td></td></tr><tr><td>Mehrkanal-Anästhesiegerät für Kleintiere</td><td>RWD</td><td>R550</td><td></td></tr><tr><td>Neurochirurgisches Gerinnungskit, Gerinnungskit</td><td>F.S.T</td><td>18010-00</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital-Natrium</td><td>Sigma</td><td>Nr. P3761</td><td></td></tr><tr><td>Spitz zulaufende Wattestäbchen</td><td>Andere</td><td>1000 Teile</td><td></td></tr><tr><td>Ratten-/Maus-Intubationsplattform</td><td>Puxin</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Ratten-/Maus-Wasserbadsystem (intraoperativ) 10-65 &deg; C Temperiergerät, 310 x 290 MM, 220 V</td><td>Huayang</td><td>36-0041</td><td></td></tr><tr><td>Shanghai Golden Bell medizinische mikroskopische Pinzette Mikroskopische feine Pinzette gerade Biegung Mikrohand chirurgische Instrumente Mikroskopische Instrumente Mikroskopische Instrumente</td><td>Jingzhong</td><td>WA1020</td><td></td></tr><tr><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Resorbierbare chirurgische Nähte Sterile Nähte mit Nadelimplantation Lifter (4-0)</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan</td><td>473445</td><td></td></tr><tr><td>Beatmungsgeräte für Kleintiere</td><td>Kent Scientific</td><td>RoVent Jr</td><td></td></tr><tr><td>Isolationssystem für Wasserbäder für Kleintiere</td><td>HUAYON</td><td>TG-TP-BL</td><td></td></tr><tr><td>Federschere (groß)</td><td>Jing Zhong</td><td>JzCrWA1020</td><td></td></tr><tr><td>Medizinische Mückenzange aus Edelstahl</td><td>Jiate</td><td>LZ1021</td><td></td></tr><tr><td>Stahl flacher Griff gebogen nicht verzahnt 0,3 Zähne</td><td>Zhenbang (Medizin)</td><td>Verzahnt mit Haken/Plattform zum Binden</td><td></td></tr><tr><td>Flacher Griff aus Stahl, gerade, nicht verzahnt, 0,3 Zähne</td><td>Zhenbang (Medizin)</td><td>Verzahnt mit Haken/Plattform zum Binden</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Wattebällchen</td><td>Boshengtianai</td><td>Kleinformat</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Gaze</td><td>Hisern</td><td>6 cm x 8 cm</td><td></td></tr><tr><td>Naht mit Nadel</td><td>Lingqiao</td><td>8-0</td><td></td></tr><tr><td>Naht mit Nadel</td><td>Lingqiao</td><td>6-0</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette Dumont #5 Pinzette, gerade</td><td>F.S.T</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Ultraleichte Tonerde</td><td>Bokee</td><td>CQNT-24</td><td></td></tr><tr><td>Halterung für Gefäßklemmen</td><td>RWD</td><td>Nr. R34001-14</td><td></td></tr></tbody></table>

orthotope transplantation der linken lunge bei ratten

Orthotopic Left Lung Transplantation in Rats

Wir haben die Operationszeit jedes Schritts im Prozess der Lungentransplantation bei 30 Ratten aufgezeichnet. Der Zeitpunkt der Vorbereitung der Manschette, die Entnahme der Spenderlunge, die kalte Ischämie und die warme Ischämie sind in Tabelle 1 dargestellt. Mit unserer verbesserten Methode erreichte die Erfolgsrate der Transplantationsoperation nach einer Vorschulung 100%. Diese Technologie kann die spätere Erforschung von Komplikationen nach einer Lungentransplantation unterstützen. Wir nutzen diese Technologie seit mehr als 2 Jahren. Die folgenden Abbildungen zeigen unseren Prozess von der Herstellung der Manschette (Abbildung 1), der Extraktion der Spenderlunge (Abbildung 2C), der Modifikation der Spenderlunge (Abbildung 3) bis hin zur Implantierung der Spenderlunge (Abbildung 4) und der Auswertung der Operationsergebnisse (Abbildung 5). Sechs Monate nach der syngenen Transplantation führten wir bei den Empfängern eine Computertomographie (CT) und eine pathologische Bewertung durch. Wir stellten fest, dass die Beatmung der transplantierten Lunge in der CT-Bildgebung gut war, ähnlich wie in der Scheinoperationsgruppe (nur Thorakotomie ohne Lungentransplantation); Es gab keinen signifikanten Unterschied im makroskopischen Erscheinungsbild der ex vivo-Lunge zwischen der Schein-Operationsgruppe und der autologen rechten Lunge, und es wurden keine offensichtlichen pathologischen Veränderungen in den Ergebnissen der Hämatoxylin-Eosin (HE)-Färbung gefunden. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass unsere orthotope Lungentransplantation in der linken Lunge der Ratte erfolgreich war, und die Reife dieser Technologie legte den Grundstein für die Konstruktion anderer Krankheitsmodelle nach der Lungentransplantation.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68106/68106fig1.jpg"> 
Abbildung 1: Vorbereitung der Manschette. (A) Unterschiedliche Größen von IV-Kanülen und Manschettenschneideklingen. (B) 5-fache Vergrößerung. Schneiden der Manschette unter dem Mikroskop. Maßstabsleiste = 1 mm. (C) Manschetten für PA (16 G), PV (16 G) und Br (14 G). Abkürzungen: IV = intravenös; PA = Lungenarterie; PV = Lungenvene; Br = Bronchien. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68106/68106fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68106/68106fig2.jpg"> 
Abbildung 2: Entnahme der Spenderlunge. (A) endotracheale Intubation des Spenders. (B) Lungenperfusion des Spenders. (C) Legen Sie die saubere, durchblutete Spenderlunge auf Eis. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68106/68106fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68106/68106fig3.jpg"> 
Abbildung 3: Modifikation der Spenderlunge. (A) Befreien Sie die PA. (B) Befreien und ligieren Sie das Br. (C) Befreien Sie das PV (D-F) Befestigen Sie PA, Br und PV nacheinander an der Manschette. Alle mikroskopischen Bilder wurden mit einer 5-fachen Vergrößerung aufgenommen. Maßstabsleiste = 1 mm. Abkürzungen: PA = Lungenarterie; PV = Lungenvene; Br = Bronchien. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68106/68106fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68106/68106fig4.jpg"> 
Abbildung 4: Implantation der Spenderlunge. (A) Der Empfänger wurde auf dem thermostatischen Operationstisch fixiert; die Brustwand wurde geöffnet; und die linke Lunge wurde zurückgezogen und auf dem Schnitt fixiert. (B) Befreien und blockieren Sie die hilaren Strukturen. (C) Vorgebundener chirurgischer Knoten. (D) Machen Sie einen kleinen Schnitt am distalen Ende von PA, Br und PV. (E) Spülen mit heparinisierter Kochsalzlösung. (F,G) Anastomose von PA, Br und PV in Sequenz. (H) Öffnen Sie den hämostatischen Clip, um die Beatmung und die Durchblutung zu ermöglichen. (I) Resektion der linken Lunge des Empfängers. (J) Bringen Sie die Spenderlunge wieder in die Brusthöhle zurück. (K) Schließen der Truhe. (L) Warten auf das Aufwachen des Empfängers. Alle mikroskopischen Bilder wurden mit einer 5-fachen Vergrößerung aufgenommen. Maßstabsleiste = 1 mm. Abkürzungen: PA = Lungenarterie; PV = Lungenvene; Br = Bronchien. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68106/68106fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68106/68106fig5.jpg"> 
Abbildung 5: Bewertung nach der Transplantation. In der Schein-OP-Gruppe wurde nur eine Thorakotomie ohne Transplantation durchgeführt. Die CT-Bildgebung und die pathologische Auswertung der Proben wurden 6 Monate später durchgeführt. Die Transplantationsgruppe erhielt eine syngene Transplantation und wurde 6 Monate später einer CT-Bildgebung und pathologischen Untersuchung unterzogen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68106/68106fig5large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Verfahren</td>
			<td>Betriebszeit (min)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorbereitung der Manschette</td>
			<td>3,2±0,38 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lungenentnahme durch Spender</td>
			<td>9,85±0,60 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kalte Ischämie</td>
			<td>29.96±2.77 kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warme Ischämie</td>
			<td>12.62±14.35 Uhr</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabelle 1: Operationszeit der einzelnen Verfahren. Manschettenvorbereitung: die Gesamtzeit, die benötigt wird, um drei Manschetten herzustellen (einschließlich Manschetten für PA, PV und Br), Entnahme der Spenderlunge: die Zeit, die benötigt wird, um die Spenderlunge vom Spender zu entfernen. Kalte Ischämie: die Dauer, für die die Spenderlunge auf Eis gehalten wird. Warme Ischämie: die Zeit, die von der Entnahme der Spenderlunge aus dem Eis bis zur Reperfusion vergeht. Abkürzungen: PA = Lungenarterie; PV = Lungenvene; Br = Bronchien.

Orthotope Transplantation der linken Lunge bei Ratten

The rat left lung orthotopic transplantation model is an essential tool in lung transplant research. Although lung transplantation is a complex procedure, ...

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Forschung

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Medizin

Hier beschreiben wir die orthotopen Ratten-Hinterteil des Körpers Transplantation Verfahren, das an den Goldstandard zu sein...

Orthotopen Hind-Limb Transplantation in Ratten

Bronchiolitis obliterans ist der Schlüssel Hindernis für die langfristige Überleben der Lunge Transplantatempfänger und das Fehlen einer robusten präklinischen Modell schließt die Prüfung Bronchiolitis obliterans Immunpathogenese. Im Gegensatz zu anderen Organtransplantationen hat vaskularisierten Maus Lungentransplantation erst vor kurzem entwickelt worden. Hier zeigen wir unser eigenständig entwickeltes Modell Bronchiolitis obliterans nach murinen orthotopen Single-Lungen-Transplantation.

Entwicklung einer Bronchiolitis obliterans in einem Mausmodell der orthotopen Lungentransplantation

Wir präsentieren einen einfach zu etablieren Revision der klassischen Zwei-Manschette Technik zur orthotopen Lebertransplantation in der Ratte.

Lebertransplantation bei der Ratte

Lebertransplantation bei Ratten ist ein unverzichtbares experimentelles Modell für die biomedizinische Forschung. Hier präsentieren wir unsere chirurgischen Verfahren zur orthotopen Ratten Lebertransplantation mit arteriellen Rekonstruktion mit 50% partielle Transplantat.

Chirurgische Verfahren für eine Ratte Modell Teilweise Lebertransplantation mit arteriellen Rekonstruktion

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Rat Heterotope Abdominal Herz / Einzel-Lungen-Transplantation in einer Volume-Konfiguration geladen

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Ein immunologisches Modell für heterotopische Herz- und Herzmuskelzelltransplantation bei Ratten

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Dieses Protokoll beschreibt ein juveniles Schweinemodell der orthotopen Allotransplantation der linken Lunge, das für die ESLP-Forschung entwickelt wurde. Der Fokus liegt auf Anästhesie- und Operationstechniken sowie kritischen Schritten und der Fehlerbehebung.

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Etablierung eines ex vivo Lungenperfusionsmodells an Ratten für translationale Einblicke in die Lungentransplantation

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Orthotope Transplantation der linken Lunge bei Ratten

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