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DOI: 10.3791/68206-v
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This protocol introduces a rapid method for quantitative whole-mount three-dimensional vascular imaging using light-sheet fluorescence microscopy. The technique is demonstrated using the pharyngeal arch artery system of the chick embryo model, allowing for the quantification of hemodynamic forces through computational fluid dynamics.
Dieses Protokoll stellt eine schnelle Methode für die quantitative dreidimensionale Gefäßbildgebung mit Hilfe der Lichtblatt-Fluoreszenzmikroskopie vor. Die Wirksamkeit der Methode wird anhand des pharyngealen Bogenarteriensystems des Hühnerembryomodells demonstriert, wobei die hämodynamischen Kräfte mittels Computational Fluid Dynamics quantifiziert werden.
Wir arbeiten daran, die Mechanismen der Krankheitsentstehung zu verstehen, insbesondere im Zusammenhang mit angeborenen Herzfehlern und ob Veränderungen des hämodynamischen Flusses zur Krankheitsentstehung beitragen oder diese verstärken. Nano-Computertomographie, Magnetresonanztomographie bei kleinen Tieren, 4D-Ultraschall und optische Kohärenzdemografie werden alle verwendet, um hochauflösende, quantitative Bildgebungsscans für die Computermodellierung zu sammeln.
Unser Protokoll adressiert den Bedarf an einer schnellen und leicht zugänglichen quantitativen Gefäßbildgebungstechnik, die auf eine Vielzahl von Tiermodellen, einschließlich ihrer Embryonen und Organe, angewendet werden kann. Unser Protokoll ist zeiteffizient und verkürzt die Probenvorbereitungszeit von vier Wochen auf nur drei Tage. Es verwendet minimal gefährliche Clearing-Verbindungen und verlässt sich nicht auf Gefäßmarker, die in frühen Embryonen nicht vorhanden sind.
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