Name: Etablierung von In-vitro-Modellen der Kultur der Spinalganglien: Komplementäre Ansätze zur Untersuchung der Krebs-Nerven-Wechselwirkung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T16:10:00.000+00:00
Duration: 11 min 26 s
Description: Lernen Sie die Etablierung komplementärer 3D- und 2D-Kulturen von Dorsal Root Ganglia (DRG) aus einer einzelnen Maus. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Krebs-Nerven-Wechselwirkungen und neurogeführtem Tumorwachstum.

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<li>Vermeer, P. D., Restaino, A. C., Barr, J. L., Yaniv, D., Amit, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerves+at+play%3A+The+peripheral+nervous+system+in+extracranial+malignancies%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Nerves at play: The peripheral nervous system in extracranial malignancies.</a> Cancer Discov. 15 (1), 52-68 (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td><stark>Werkzeuge</stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>70 & Mikro; m Cell Sieb</td><td>Progen</td><td>71-229483-ULT</td><td>Wird zum Filtern der Zellsuspension verwendet</td></tr><tr><td>8-Well-Glasboden-Objektträger</td><td>IBidi, München, Deutschland</td><td>80807</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 - Feine Pinzette</td><td>Fine Science Tools, Foster City, USA</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Pinzette</td><td>Fine Science Tools, Foster City, USA</td><td>11252-20</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Feine Schere</td><td>Fine Science Tools, Foster City, USA</td><td>91460-11</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Muster Pinzette</td><td>Fine Science Tools, Foster City, USA</td><td>91121-12</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Federschere</td><td>Fine Science Tools, Foster City, USA</td><td>91500-09</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><stark>Reagenzien</stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1x Phosphat gepufferte Kochsalzlösung</td><td>Sigma, St. Louis, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>Artikel-Nr.: D8662-500ML</td><td>Wird zum Auflösen von Enzymen verwendet</td></tr><tr><td>B-27 Zuschlag (50x)</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>17504044</td><td>Verwendung in einer Konzentration von 2 % in F12-Medien</td></tr><tr><td>Rinder Typ I Kollagen</td><td>Corning Incorporated, New York, USA</td><td>354231</td><td>Wird zum Beschichten von Platten, Arbeitslösung 50 & Mikro; g/mL in 0,01 M HCl</td></tr><tr><td>Kollagenase Typ IV</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, USA</td><td>C4-BIOC</td><td>In PBS bei 1,25 mg/ml auflösen, aliquotieren, bei -20 & deg lagern; C</td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Roche, Basel, Schweiz</td><td>4942078001</td><td>In PBS bei 2,5 mg/ml auflösen, aliquotieren, bei -20 & deg lagern; C</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Roche, Basel, Schweiz.</td><td>11284932001</td><td>Zugabe in der Endkonzentration von&nbsp; 0,2 mg/ml während der Dissoziation</td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum (FBS)</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, USA</td><td>Nr. F1051</td><td>Verwendung in einer Konzentration von 10 % in F12-Medien</td></tr><tr><td>HBSS (Hank's ausgewogene Salzlösung)</td><td>Sigma, St. Louis, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>H6648-500ML</td><td>Zubereitet mit 1% Penicillin-Streptomycin</td></tr><tr><td>Matrigel Wachstumsfaktor reduziert</td><td>Corning Incorporated, New York, USA</td><td>356231</td><td>Tauwetter bei 4 Grad; C über Nacht, auf Eis bleiben</td></tr><tr><td>Nährstoffmischung F-12 Schinken</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, USA</td><td>Nr. N6658-500ML</td><td>Basalmedium zur Herstellung von supplementierten Nährmedien</td></tr><tr><td>Papain</td><td>Roche, Basel, Schweiz.</td><td>10108014001</td><td>In PBS bei 30 U/ml auflösen, aliquotieren, lagern bei -20 μg; C</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin (100x)</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, USA</td><td>Nr. P4333-100ML</td><td>Verwendung in einer Konzentration von 1 % in Medien</td></tr><tr><td>Trypanblau-Lösung</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, USA</td><td>T8154-100ML</td><td>Zur Beurteilung der Lebensfähigkeit von Zellen</td></tr><tr><td>TrypLE Express</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>12605-028</td><td>Für die Entnahme von Krebszellen</td></tr><tr><td><stark>Antikörper</stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Tubulin III Antikörper</td><td>Abcam (Cambridge, Vereinigtes Königreich)</td><td>AB15568</td><td>Verdünnung 1:200</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>Nr. A-11008</td><td>Verdünnung 1:2000</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>Nr. A-21442</td><td>Verdünnung 1:2000</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>Nr. A-21245</td><td>Verdünnung 1:2000</td></tr><tr><td>NeuN Antikörper</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, USA</td><td>MAB377</td><td>Verdünnung 1:100</td></tr><tr><td><stark>Fluoreszierende Farbstoffe & Sonden</stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ActinGreen 488 ReadyProbes Reagenz (Phalloidin)</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>Nr. R37110</td><td>Verdünnung 1:40</td></tr><tr><td>CellTrace Calcein rot-orange</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>Nr. C34851</td><td>Zell-Tracker zur Visualisierung von Neuronen unter dem Fluoreszenzmikroskop</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>Nr. H3570</td><td>Verdünnung 1:5000</td></tr></tbody></table>

etablierung von in-vitro-modellen der kultur der spinalganglien: komplementäre ansätze zur untersuchung der krebs-nerven-wechselwirkung

Establishing In Vitro Models of Dorsal Root Ganglia Culture: Complementary Approaches for Investigating Cancer-Nerve Crosstalk

Unser Protokoll beschreibt die Isolierung von primären DRG-abgeleiteten Mauszellen und die Etablierung von zwei komplementären Kulturmodellen: dissoziierte DRG- und ganz-montierte DRG-Kulturen, die es uns ermöglichen, Nerven-Krebszell-Interaktionen auf unterschiedlichen Komplexitätsstufen zu untersuchen. Ein wesentlicher Vorteil dieses Protokolls besteht darin, dass beide Arten von Kulturen mit DRGs erzeugt werden können, die aus demselben Tier isoliert wurden, was die Variabilität zwisch...

Etablierung von In-vitro-Modellen der Kultur der Spinalganglien: Komplementäre Ansätze zur Untersuchung der Krebs-Nerven-Wechselwirkung

The contribution of the nervous system to the tumor microenvironment and the importance of neural invasion as a route for cancer dissemination are being ...

establishing-vitro-models-dorsal-root-ganglia-culture-complementary

Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

In diesem Video demonstrieren wir das Verfahren zur Entwicklung eines in vitro perineuralen Krebszellinvasionsmodells durch Co-Kultivierung von Maus-Spinalganglion und neurotropen Krebszellen. Das Modell kann zur Durchführung von Krebstests verwendet werden, die schnelle und reproduzierbare Ergebnisse liefern.

Etablierung eines dreidimensionalen Co-Kulturmodells von murinen Spinalganglien und Krebszellen: Ein In-vitro-Modell zur Untersuchung der perineuralen Invasion von Krebszellen

In diesem Video demonstrieren wir eine in vitro Methode zur Co-Kultivierung von DRG- und Krebszellen, um Neurotropismus und neuronale Invasion zu untersuchen.

Modellierung der krebsartigen neuronalen Invasion in vitro: Eine Methode zur Co-Kultur von Spinalganglien und Krebszellen

Phänotypische Wildtyp-Astrozyten und neurale Stammzellen, die von Mäusen entnommen wurden, die mit floxierten, bedingten onkogenen Allelen gezüchtet und über virale Cre-vermittelte Rekombination transformiert wurden, können zur Modellierung der Astrozytom-Pathogenese in vitro und in vivo durch orthotope Injektion von transformierten Zellen in Gehirne von syngenen, immunkompetenten Wurfgeschwistern verwendet werden.

Modellierung Astrozytom Pathogenese In-vitro- Und In Vivo Verwenden kortikale Astrozyten oder neuralen Stammzellen aus dem Bedingten, gentechnisch veränderte Mäuse

Zellkulturmodelle bieten detaillierte Kontrolle über Umweltbedingungen und damit eine leistungsfähige Plattform, um zahlreiche Aspekte neuronaler Zellbiologie aufzuklären. Wir beschreiben eine schnelle, kostengünstige und zuverlässige Methode, um von Hühnerembryonen zu isolieren, zu dissoziieren, und die Kultur sensorischen Neuronen. Details der Substrate Vorbereitung und Immunzytochemie sind ebenfalls vorhanden.

Isolation und Kultur der Dissoziierte sensorischen Neuronen aus Hühnerembryonen

Spinalganglien (DRG) sind Strukturen, die die sensorischen Neuronen des peripheren Nervensystems. Wenn distanziert, sie co-kultiviert mit SC-wie Fettgewebe gewonnene Stammzellen (ASC) sein kann, eine wertvolle Modell zur in-vitro-Nervenregeneration und Myelinisierung zu untersuchen, imitiert die in vivo-Umgebung an der Verletzungsstelle.

Dorsalwurzelganglien Neuronen und differenzierten Fettgewebe gewonnene Stammzellen: Eine<em&gt; In-vitro-</em&gt; Co-Kultur Modell zur Regeneration peripherer Nerven Studieren

Dieser Videoartikel zeigt die Verwendung des Modells der dorsalen Wurzelganglien (DRG)/Krebszellen beim duktalen Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse.

In - vitro - Modellierung von Cancerous Neural Invasion: The Dorsalwurzelganglion Modell

Perineurale Invasion ist ein aggressiver Phänotyp für Kopf- und Halsplattenkarzinome und andere Tumoren. Das Küken-Chorioallanto-Membranmodell wurde zur Untersuchung von Angiogenese, Krebsinvasion und Metastasierung verwendet. Hier zeigen wir, wie dieses Modell genutzt werden kann, um die perineurale Invasion in vivo zu bewerten.

Das Chick Chorioallantoic Membrane In Vivo Modell zur Beurteilung der perineuralen Invasion bei Kopf- und Halskrebs

Im Kokultursystem von dorsalen Wurzelganglien und Schwann-Zellen kann die Myelinisierung des peripheren Nervensystems untersucht werden. Dieses Modell bietet experimentelle Möglichkeiten zur Beobachtung und Quantifizierung der peripheren Myelinisierung und zur Untersuchung der Auswirkungen von Wirkstoffen auf die Myelinscheide.

In vitro Myelinisierung peripherer Axone in einer Kokultur von Dorsalwurzelganglienexplantaten der Ratte und Schwann-Zellen

Wir haben eine Methodik entwickelt, um zu beurteilen, ob Neubildungen des Nervensystems in gentechnisch veränderten Mäusen die Pathologie ihrer menschlichen Gegenstücke genau rekapitulieren. Hier wenden wir diese histologischen Techniken, definierten pathologischen Kriterien und Kulturmethoden auf Neurofibrome und maligne periphere Nervenscheidentumoren an, die im P 0-GGFβ3-Mausmodell auftreten.

Identifizierung, Diagnose und Einstufung bösartiger peripherer Nervenscheidentumoren in gentechnisch veränderten Mausmodellen

Dieses Protokoll bietet eine Technik zur Entnahme und Kultivierung von explantierten Spinalganglien (DRG) von adulten Sprague Dawley-Ratten in einem Multikompartiment-Gerät (MC).

Ernte, Einbettung und Kultivierung von dorsalen Wurzelganglien in Geräten mit mehreren Kompartimenten zur Untersuchung peripherer neuronaler Merkmale

Lernen Sie die Etablierung komplementärer 3D- und 2D-Kulturen von Dorsal Root Ganglia (DRG) aus einer einzelnen Maus. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Krebs-Nerven-Wechselwirkungen und neurogeführtem Tumorwachstum.

Etablierung von In-vitro-Modellen der Kultur der Spinalganglien: Komplementäre Ansätze zur Untersuchung der Krebs-Nerven-Wechselwirkung (Video) | JoVE Journal

Etablierung von In-vitro-Modellen der Kultur der Spinalganglien: Komplementäre Ansätze zur Untersuchung der Krebs-Nerven-Wechselwirkung

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