Chirurgische Protokolle für die tiefe zervikale lymphovenöse Anastomose im Rattenmodell: Lymphknoten- und Lymphgefäßanastomosen

Unsere dcLVA-Technik zeigt vielversprechende Ergebnisse bei der Behandlung von Alzheimer, obwohl die Mechanismen weiterhin unklar sind. Tiermodelle sind jedoch entscheidend für die Entdeckung. Eine zentrale Herausforderung ist der anatomische Unterschied zwischen Ratten und Menschen.

Die Standardisierung chirurgischer Orientierungspunkte und Techniken ist entscheidend für zuverlässige Ergebnisse. Zu Beginn desinfizieren Sie die Mittellinie des Halses der betäubten Ratte dreimal, abwechselnd zwischen Jodtinktur und 70 % Isopropylalkohol, um ein steriles Operationsfeld zu gewährleisten. Anschließend wird mit einem chirurgischen Skalpell ein Mittellinienschnitt von etwa drei Zentimetern Länge gemacht.

Achten Sie darauf, die Unterkieferdrüse und die Blutgefäße während der Dissektion nicht zu beschädigen. Ziehe die Haut zurück, um den Musculus sternothyroidus, den Musculus sternocleidomastoidus und den Omohyoideus freizulegen. Identifizieren Sie die präaurikuläre Vene im Gesicht, einen Nebenfluss der äußeren Jugularvene, entlang des lateralen Rand des Musculus sternocleidomastoideus.

An der Bifurkation zwischen der präaurikulären Gesichtsvene und der externen Jugularvene wird die präaurikuläre Vene mit einem mikrovaskulären Clip verdeckt. Sezieren Sie weiterhin die präaurikuläre Gesichtsvene stumpf, um ausreichend Länge zu erreichen, und klemmen Sie sie am distalen Ende ab. Stellen Sie sicher, dass das präaurikuläre Gesichtsvenensegment so locker wie möglich bleibt, um während der Anastomose mit dem tiefen zervikalen Lymphknoten eine weitere Traktion zu ermöglichen.

Anschließend wird mit einer mikrovaskulären Schere ein Längsschnitt parallel zur Gefäßachse geschaffen. Achten Sie darauf, dass der Präaurikular-Venenschnitt längs ist, da der transversale Schnitt durch Traktion vergrößert und gerissen werden kann. Bewässern Sie das isolierte Gefäßsegment gründlich mit heparinisiertem Kochsalzlösungsgerät, das als 0,1 % Natriumheparin in 0,9 % Natriumchlorid hergestellt wird, bis die Bluterythrozyten vollständig entfernt sind.

Untersuchen Sie und legen Sie den tiefen zervikalen Lymphknoten und sein afferentes Lymphgefäß in der Mitte des Musculus sternothyroidus und des Musculus sternocleidomastoideus vollständig frei. Sezieren Sie den tiefen Halswirbellymphknoten schrittweise mit einer stumpfen Technik. Schneiden Sie vorsichtig die Faszie zwischen dem tiefen zervikalen Lymphknoten und dem umliegenden Gewebe ein, um sowohl den Knoten als auch das angeschlossene Lymphgefäß zu beschädigen.

Stellen Sie sicher, dass die präaurikuläre Gesichtsvene und der tiefe zervikale Lymphknoten nah beieinander liegen, um die Spannung nach der Anastomose zu minimieren. Anschließend schaffen Sie eine Öffnung am distalen Ende des tiefen zervikalen Lymphknotens, indem Sie das Lymphknotengewebe teilweise entfernen. Stellen Sie sicher, dass die Breite der Öffnung kleiner oder ähnlich dem Durchmesser der präaurikulären Gesichtsvene ist, damit der Blutfluss in der Vene nicht wesentlich beeinträchtigt wird.

Mit einer 12-0-Nylonnaht anastomosieren Sie das proximale Ende der präaurikulären Gesichtsvene-Inzision zum proximalen Ende des tiefen Halslymphknotenschnitts. Erweitern Sie weiterhin die Schnittlänge der präaurikulären Gesichtsvene bis zum distalen Ende, sodass sie etwas größer ist als die Länge des tiefen Incisus des zervikalen Lymphknotens. Anschließend führt man die Nadel sequentiell durch den äußeren Rand des tiefen zervikalen Lymphknotendurchschnitts und den inneren Rand des präaurikulären Venenschnitts, wodurch der Lymphknotendurchschnitt in den Lumen der Vene gezogen wird.

Führen Sie eine kontinuierliche Naht vom unteren bis zum oberen Rand der tiefen zervikalen Lymphknotendurchtrennung durch. Spülen Sie das Lumen noch einmal mit Heparin-Natriumlösung kurz vor Abschluss der letzten Naht, um die Bildung von Thrombusen im preaurikulären Gesichtsvenenlumen zu verhindern. Halten Sie während des kontinuierlichen Verschlusses eine angemessene Spannung auf der Naht, um einen sicheren Verschluss zu gewährleisten und ein weiteres Auslaufen zu verhindern.

Schneiden Sie das afferente Lymphgefäß durch und bewahren Sie das umgebende Gewebe, um als Nahtankerpunkt zu dienen. Mit einer 12-0-Nahtnadel wird sie etwa zwei Millimeter proximal zum Präaurikulären Gesichtsvenenschnitt eingeführt und durch die Öffnung des Venenschnitts herausgetreten. Treten Sie mit der Nahtnadel in das Gewebe nahe dem Stumpf des afferenten Lymphgefäßes ein, um das Gefäß zu fangen.

Führen Sie die Nadel in den Präaurikulären Venenschnitt und durch deren proximale Kante heraus, dann binden Sie die Naht zu, um den afferenten lymphatischen Gefäßstumpf im Lumen der Vene zu fixieren. Führen Sie den afferenten lymphatischen Gefäßstumpf vollständig in das Lumen der präaurikulären Gesichtsvene ein und richten Sie ihn in die proximale Richtung aus, um den physiologischen Abfluss aufrechtzuerhalten. Schließlich nähen Sie das umliegende Gewebe in der Nähe des Stumpfs des afferenten Lymphgefäßes an den inneren Rand der präaurikulären Gesichtsvene-Inzision, um eine äußere Fixation zu gewährleisten.

Bei der tiefen zervikalen Lymphknoten-Venen-Anastomose war der durchschnittliche Farbton der post-anastomosen hinteren Gesichtsvene bei 278,2 Grad im Vergleich zur angrenzenden vorderen Gesichtsvene mit 327,9 Grad zum blauen Ton geneigt und zeigte einen größeren Unterschied als die hintere Gesichtsvene vor der Anastomose bei 24,8 Grad. Bei der tiefen cervikalen lymphatellen Venenanastomose betrug der durchschnittliche Farbton der posterioren Gesichtsvene nach der Anastomose 282,4 Grad, was einen stärkeren Blauton als die angrenzende vordere Gesichtsvene bei 303,7 Grad zeigte, und der Unterschied war deutlicher als die hintere Vene vor der Anastomose bei 39,6 Grad. Unsere Studie bietet spezifische Referenzen und einen standardisierten Rahmen für dcLVA, einschließlich dcLNVA und dcLAVA, die sowohl spezifische Forschung als auch klinische Anwendungen unterstützen.

Wir werden zukünftig die Wirksamkeit und den Mechanismus dieses chirurgischen Eingriffs in AD-Rattenmodellen untersuchen.