Name: Reproduzierbarer 3D-Glioblastom-Migrationstest mit magnetischer Nanopartikel-vermittelter sphäroider Lokalisierung unter hypoxischen Bedingungen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-12T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Erfahren Sie einen reproduzierbaren 3D-Migrationstest für Glioblastom-Gliomasphären unter hypoxischen Bedingungen mit magnetischen Nanopartikeln. Diese Methode ermöglicht präzise Bildgebung und vergleichende Analyse invasiven Verhaltens.

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<ol><li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+at+the+crossroads%3A+Current+understanding+and+future+therapeutic+horizons%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma at the crossroads: Current understanding and future therapeutic horizons.</a> Signal Transduct Target Ther. 10 (1), 213(2025).</li>
<li>Spitzer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deciphering+the+longitudinal+trajectories+of+glioblastoma+ecosystems+by+integrative+single-cell+genomics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Deciphering the longitudinal trajectories of glioblastoma ecosystems by integrative single-cell genomics.</a> Nat Genet. 57 (5), 1168-1178 (2025).</li>
<li>Dirkse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-associated+heterogeneity+in+glioblastoma+results+from+intrinsic+tumor+plasticity+shaped+by+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Stem cell-associated heterogeneity in glioblastoma results from intrinsic tumor plasticity shaped by the microenvironment.</a> Nat Commun. 10 (1), 1787(2019).</li>
<li>Dejaegher, J., De Vleeschouwer, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDejaegher%2C+J+%22Glioblastoma%22">Glioblastoma</a>. De Vleeschouwer, S. , Brisbane (AU). (2017).</li>
<li>Restall, I., Bozek, D. A., Chesnelong, C., Weiss, S., Luchman, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live-cell+imaging+assays+to+study+glioblastoma+brain+tumor+stem+cell+migration+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live-cell imaging assays to study glioblastoma brain tumor stem cell migration and invasion.</a> J Vis Exp. (138), e58152(2018).</li>
<li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+glioblastoma+cell+culture+resource%3A+Validated+cell+models+representing+all+molecular+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22EBioMedicine%22%5BJournal%5D)">The human glioblastoma cell culture resource: Validated cell models representing all molecular subtypes.</a> EBioMedicine. 2 (10), 1351-1363 (2015).</li>
<li>Paolillo, M., Comincini, S., Schinelli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+glioblastoma+models%3A+A+journey+into+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">In vitro glioblastoma models: A journey into the third dimension.</a> Cancers (Basel). 13 (10), 2449(2021).</li>
<li>Aye, K. T. N., Ferreira, J. N., Chaweewannakorn, C., Souza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+application+of+iron+oxide+nanoparticles+%28ions+and+spions%29+in+three-dimensional+cell+culture+systems%5BTitle%5D)+AND+%22SLAS+Technol%22%5BJournal%5D)">Advances in the application of iron oxide nanoparticles (ions and spions) in three-dimensional cell culture systems.</a> SLAS Technol. 29 (3), 100132(2024).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+of+uniform+spheroid+formation+in+384-well+plates%3A+The+effect+of+medium+evaporation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomol+Screen%22%5BJournal%5D)">Reproducibility of uniform spheroid formation in 384-well plates: The effect of medium evaporation.</a> J Biomol Screen. 21 (9), 923-930 (2016).</li>
<li>Das, V., Furst, T., Gurska, S., Dzubak, P., Hajduch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaporation-reducing+culture+condition+increases+the+reproducibility+of+multicellular+spheroid+formation+in+microtiter+plates%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Evaporation-reducing culture condition increases the reproducibility of multicellular spheroid formation in microtiter plates.</a> J Vis Exp. (121), e55403(2017).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Zanoni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3d+tumor+spheroid+models+for+in+vitro+therapeutic+screening%3A+A+systematic+approach+to+enhance+the+biological+relevance+of+data+obtained%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">3d tumor spheroid models for in vitro therapeutic screening: A systematic approach to enhance the biological relevance of data obtained.</a> Sci Rep. 6, 19103(2016).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+An+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: An open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Arganda-Carreras, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trainable+weka+segmentation%3A+A+machine+learning+tool+for+microscopy+pixel+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Trainable weka segmentation: A machine learning tool for microscopy pixel classification.</a> Bioinformatics. 33 (15), 2424-2426 (2017).</li>
<li>Sayde, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+3d+culture+of+multicellular+tumor+spheroids+in+supramolecular+hydrogel+from+cancer+stem+cells+sorted+by+sedimentation+field-flow+fractionation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Reproducible 3d culture of multicellular tumor spheroids in supramolecular hydrogel from cancer stem cells sorted by sedimentation field-flow fractionation.</a> J Chromatogr A. 1736, 465393(2024).</li>
<li>Lee, S., Lim, J., Kwak, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+of+bias+in+spheroid-based+drug+screening%3A+Fabrication+method%2C+spheroid+size%2C+and+cell+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Factors of bias in spheroid-based drug screening: Fabrication method, spheroid size, and cell viability.</a> Biomed Pharmacother. 192, 118597(2025).</li>
<li>Aisenbrey, E. A., Murphy, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+alternatives+to+matrigel%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Synthetic alternatives to matrigel.</a> Nat Rev Mater. 5 (7), 539-551 (2020).</li>
<li>Barbugian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioresponsive+hyaluronic+acid-based+hydrogel+inhibits+matrix+metalloproteinase-2+in+glioblastoma+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22ChemMedChem%22%5BJournal%5D)">Bioresponsive hyaluronic acid-based hydrogel inhibits matrix metalloproteinase-2 in glioblastoma microenvironment.</a> ChemMedChem. 20 (15), e202401040(2025).</li>
<li>Carvalho, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelastic+high-molecular-weight+hyaluronic+acid+hydrogels+support+rapid+glioblastoma+cell+invasion+with+leader-follower+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Viscoelastic high-molecular-weight hyaluronic acid hydrogels support rapid glioblastoma cell invasion with leader-follower dynamics.</a> Adv Mater. 36 (50), e2404885(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>96-WELL-BIODRUCK-KIT, KLAR</td><td>Greiner</td><td>655840</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Invitrogen</td><td>00-4555-56</td><td>n/a</td></tr><tr><td>B-27 Supplement (50X), Serum&nbsp; frei ohne Vitamin A</td><td>Gibco</td><td>12587010</td><td>10%</td></tr><tr><td>Basisischer Fibroblastenwachstumsfaktor, Human&nbsp; (bFGF)</td><td>PeproTech</td><td>100-18B</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>Celldiscoverer&nbsp; 7</td><td>Zeiss</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Corning-Sphäroid-Mikroplatten</td><td>Corning</td><td>CLS4515</td><td></td></tr><tr><td>Corning-Matrigelmatrix</td><td>Corning</td><td>354234</td><td>1:100 Endverdünnung</td></tr><tr><td>Countess Automatisierter Zellenzähler</td><td>Invitrogen</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>DMEM-F12&nbsp; (500 ml)</td><td>Thermofischer</td><td>11320-074</td><td>n/a</td></tr><tr><td>Epidermaler Wachstumsfaktor Mensch (EGF)</td><td>PeproTech</td><td>AF-100-15</td><td>20&nbsp; ng/ml</td></tr><tr><td>FITC-Maus-Anti-Mensch CD44</td><td>BD Pharmingen</td><td>555478</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Greiner CELLSTAR 96 Polystyrol-Zellkultur-Mikroplatten mit F-Boden/Schornsteinbrunnen, &; Klar, schwarz, TC, steril, mit Deckel</td><td>Greiner</td><td>655090</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Thermofischer</td><td>A16198</td><td>5&micro; g/ml</td></tr><tr><td>Hoechst 33258</td><td>&nbsp; Sigma Aldrich (Merck)</td><td>861405</td><td>1&Micro; g/ml</td></tr><tr><td>NanoShuttle-PL</td><td>Greiner</td><td>657841</td><td>1.5&nbsp; &Mikro; l/10.000 Zellen</td></tr><tr><td>Penicillin – Streptomycin</td><td>Merck</td><td>P4333</td><td>1%</td></tr></tbody></table>

reproduzierbarer 3d-glioblastom-migrationstest mit magnetischer nanopartikel-vermittelter sphäroider lokalisierung unter hypoxischen bedingungen

Reproducible 3D Glioblastoma Migration Assay with Magnetic Nanoparticle Mediated Spheroid Localization Under Hypoxic Conditions

Reproduzierbarer 3D-Glioblastom-Migrationstest mit magnetischer Nanopartikel-vermittelter sphäroider Lokalisierung unter hypoxischen Bedingungen

We describe a reproducible 3D migration assay to model the migratory and invasive potential of patient-derived glioblastoma gliomaspheres from newly ...

reproducible-3d-glioblastoma-migration-assay-with-magnetic

Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

Quelle: Guyon, J., et al. Ein 3D-Sphäroidmodell für Glioblastome. J. Vis. exp. (2020)Das Video zeigt die Erstellung eines dreidimensionalen Sphäroidmodells der Tumorzellinvasion. Sphäroide werden aus menschlichen Hirntumorzellen gebildet und in eine Kollagenmatrix eingebettet. Die Tumorzellen an der Peripherie der Sphäroiden nehmen einen invasiven Phänotyp an, sezernieren Proteasen, um das Kollagen abzubauen, und dringen vor, um in die umgebende Matrix einzudringen.

Generierung eines dreidimensionalen Sphäroidmodells der Tumorzellinvasion

Quelle: Pericoli, G. et. al., Lebend-3D-Zell-Immunzytochemie-Assays des pädiatrischen diffusen Mittellinienglioms. J. Vis. Exp. (2021)Dieses Video zeigt die Live-Zellbildgebung zur Beobachtung der Migration von pädiatrischen diffusen Mittelliniengliomzellen mittels immunhistochemischer Markierung mit Anti-CD44-Antikörpern.

Immunzytochemie-basierte Bildgebung zur Visualisierung der Migration von Gliomzellen bei Kindern

Die Invasion des umgebenden normalen Gewebes ist ein definierendes Merkmal von bösartigen Tumoren. Wir stellen hier einen einfachen, halbautomatischen Mikroplatten-Assay der Invasion in eine natürliche 3D-Biomatrix zur Verfügung, der mit einer Reihe von Modellen fortgeschrittener menschlicher Krebsarten veranschaulicht wurde.

Dreidimensionale (3D) Tumor Spheroid Invasionsassay

Hier wird ein Verfahren zur Herstellung von 3-dimensionalen (3D) Sphäroid Kokultur Pankreaskarzinom-Zellen und Fibroblasten, gefolgt von Messung von Stoffwechselfunktionen mit einer extrazellulären Flux-Analyzer beschrieben.

Vorbereitung und metabolische Assay von 3-dimensionalen Sphäroid Ko-Kulturen von Pankreaskarzinom-Zellen und Fibroblasten

Hier beschreiben wir Leben-Zelle bildgebende Verfahren um die Migration und Invasion von Glioblastom Gehirn Tumor-Stammzellen im Laufe der Zeit und unter mehreren Behandlungsbedingungen quantitativ zu messen.

Live Cell Imaging-Assays Studie Glioblastom Gehirn Tumor Stammzellen Migration und Invasion

Die Auswirkungen von migrastatischen Inhibitoren auf die Gliom-Krebszellmigration in dreidimensionalen (3D) Invasions-Assays mit einem Histon-Deacetylase-Inhibitor (HDAC) sind durch eine hochauflösende konfokale Mikroskopie gekennzeichnet.

Charakterisierung der Auswirkungen von Migrastatischen Inhibitoren auf die 3D-Tumorsphäroid-Invasion durch hochauflösende Konfokalmikroskopie

Lasermikrodissektion (LMD) ist eine empfindliche und hochreproduzierbare Technik, die verwendet werden kann, um Wege aufzudecken, die Gliomheterogenität und Invasion vermitteln. Hier beschreiben wir ein optimiertes Protokoll zur Isolierung diskreter Bereiche aus Gliomgewebe mittels Laser LMD, gefolgt von transkriptomischer Analyse.

Lasercapture Mikrodissektion von Glioma Subregionen für räumliche und molekulare Charakterisierung der intratumoralen Heterogenität, Oncostreams und Invasion

Hier beschreiben wir einen einfach zu bedienenden Invasionstest für Glioblastom. Dieser Test eignet sich für glioblastom-Stammzellen. Ein Fidschi-Makro zur einfachen Quantifizierung von Invasion, Migration und Proliferation wird ebenfalls beschrieben.

Ein 3D Spheroid Modell für Glioblastom

Hier präsentieren wir einen einfach zu bedienenden Co-Kultur-Assay zur Analyse der Glioblastom-Migration (GBM) an gemusterten Neuronen. Wir entwickelten ein Makro in der FiJi-Software zur einfachen Quantifizierung der GBM-Zellmigration auf Neuronen und beobachteten, dass Neuronen die invasive Kapazität von GBM-Zellen modifizieren.

Co-Kultur von Glioblastom-Stammzellen auf gemusterten Neuronen zur Untersuchung von Migration und zellulären Interaktionen

Hier etablieren wir eine metabolische Profiling-Plattform, die dreidimensionale (3D) Gliom-Sphäroide und bildgebende Normalisierung mittels extrazellulärer Flussanalyse integriert. Dieser Ansatz ermöglicht eine genauere Bewertung der metabolischen Reaktionen von Tumoren auf medikamentöse Behandlungen und gibt Einblicke in mögliche Resistenzmechanismen.

Fortschritte bei der metabolischen Profilerstellung von dreidimensionalen Hirntumor-Sphäroiden für das Wirkstoffscreening

Erfahren Sie einen reproduzierbaren 3D-Migrationstest für Glioblastom-Gliomasphären unter hypoxischen Bedingungen mit magnetischen Nanopartikeln. Diese Methode ermöglicht präzise Bildgebung und vergleichende Analyse invasiven Verhaltens.

Reproduzierbarer 3D-Glioblastom-Migrationstest mit magnetischer Nanopartikel-vermittelter sphäroider Lokalisierung unter hypoxischen Bedingungen (Video) | JoVE Journal

Reproduzierbarer 3D-Glioblastom-Migrationstest mit magnetischer Nanopartikel-vermittelter sphäroider Lokalisierung unter hypoxischen Bedingungen

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