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Para comenzar el experimento de medir las tasas de transpiración de las hojas de diferentes especies de plantas, primero creará una herramienta llamada potómetro, utilizando un trozo de tubo de plástico y una pipeta calibrada de cinco mililitros. Para montar el dispositivo, basta con conectar el tubo de goma a la punta de la pipeta. A continuación, sumerja el dispositivo en un cubo de agua y mueva la pipeta bajo el agua para llenar completamente el tubo, teniendo cuidado de no crear burbujas.
A continuación, cubra el extremo abierto del tubo con una pera de pipeta para mantener el agua dentro. Ahora, teniendo cuidado de no derramar agua del potómetro, use una abrazadera y un soporte para sostener el extremo tapado de la pipeta alrededor de una a tres pulgadas por debajo del bulbo de la pipeta. Luego, use una segunda abrazadera colocada más abajo en el mismo soporte para asegurar el extremo abierto del tubo de goma.
A continuación, utilice una pipeta de transferencia o un gotero para eliminar el agua del extremo abierto del tubo hasta que el nivel del agua en la parte de la pipeta del potómetro descanse en la línea cero. En este experimento, la hipótesis experimental podría ser que las hojas de especies vegetales más adaptadas a ambientes más cálidos o áridos tendrán tasas de transpiración más bajas que las de regiones húmedas o mojadas. La hipótesis nula sería que las hojas de las diferentes especies de plantas no diferirán en sus tasas de transpiración.
Para comenzar el experimento, use cuidadosamente unas tijeras para cortar el extremo del pecíolo, o tallo, de la primera hoja y luego inserte la hoja en el tubo. Luego, coloque una capa de lubricante alrededor del área donde se unen el tallo de la planta y el tubo de goma para hacer un sello hermético. A continuación, retire la pera de la pipeta y, teniendo cuidado de no perturbar la configuración, deje que el experimento se ejecute durante el período experimental adecuado, normalmente de 30 a 60 minutos.
Al final del tiempo asignado, registre el nivel del agua en la pipeta, anotando cuánto bajó el nivel en mililitros. Luego, rellene y restablezca el nivel de agua del potómetro a cero, y luego repita el procedimiento para cada una de las hojas de prueba restantes hasta que se hayan medido las tasas de transpiración de las cuatro hojas. A continuación, para determinar el área de superficie de las muestras de hojas, coloque cada hoja en una hoja de papel en blanco y trace cuidadosamente los contornos.
A continuación, recorta los contornos y registra la masa de cada trazado. Por último, recorta y pesa un cuadrado de cuatro por cuatro centímetros del mismo tipo de papel que se utilizó para hacer los trazos de las hojas. Esto actuará como una referencia con el área y el peso conocidos.
A continuación, deberá cuantificar el número de estomas por unidad de área en cada hoja. Para hacer esto, primero prepare un soporte de diapositiva pintando al menos un centímetro cuadrado de la parte inferior de cada hoja con esmalte de uñas transparente. Cuando el esmalte de uñas esté completamente seco, presione con cuidado un pequeño trozo de cinta de celofán directamente sobre cada parche y luego despegue suavemente la cinta para eliminar el esmalte pintado.
Luego, coloque cada impresión y cinta adhesiva en un portaobjetos de microscopio limpio y separado. En este ejercicio, la hipótesis alternativa podría ser que las hojas de las plantas adaptadas a ambientes más secos tendrán menos estomas por unidad de área que las hojas de las plantas adaptadas a ambientes más húmedos. La hipótesis nula podría ser que todas las especies de plantas tendrán el mismo número de estomas por unidad de área.
Para observar cada impresión bajo el microscopio, primero use un aumento bajo para encontrar las áreas de la impresión de la hoja que contienen estomas. Estos aparecerán como puntos o impresiones más oscuras. A continuación, cambie a un aumento mayor, manteniendo la ventana de visualización de la muestra centrada en el área que contiene los estomas.
Dibuja y etiqueta tus observaciones, asegurándote de etiquetar cada boceto con las especies de plantas. Luego, cuente y registre el número de estomas en el campo de visión. Debe realizar este recuento un total de cuatro veces en cuatro áreas diferentes de la impresión de la hoja y, a continuación, determinar el número promedio de estomas por área contada en la hoja.
Para calcular el número de estomas por milímetro cuadrado, coloque una regla de plástico transparente en la platina del microscopio debajo del objetivo y mida el diámetro del campo de visión. A continuación, puede utilizar este número, el diámetro o D, y la fórmula que se muestra para calcular el área del campo de visión en milímetros al cuadrado. Primero, calcule el área de la superficie del cuadrado de papel de cuatro por cuatro centímetros para obtener el número de centímetros cuadrados.
Luego, divide el peso del cuadrado de papel por el número de centímetros cuadrados que cubre para obtener el peso de un centímetro cuadrado de papel. Finalmente, para calcular el área de superficie de cada hoja, divida el peso del trazo de la hoja por el peso de un centímetro cuadrado de papel. Esto le dará el área de la hoja en centímetros cuadrados.
Ahora debes convertir este número a metros cuadrados, la unidad estándar utilizada para calcular la tasa de transpiración. Para calcular la tasa de transpiración de cada hoja, divide la pérdida total de agua que mediste en el potómetro en mililitros por el tiempo en que se realizó el experimento en minutos. Luego, divide esto por el área de la superficie de la hoja en metros cuadrados.
Haz un gráfico de barras con las cuatro especies de hojas diferentes en el eje X y sus correspondientes tasas de transpiración en el eje Y. ¿Parecen diferentes estas tasas? A continuación, agregue un segundo eje Y a su gráfico y trace el número promedio de estomas por milímetro cuadrado para cada hoja que se observó bajo el microscopio.
¿Ves una correlación entre la tasa de transpiración y el número de estomas? Si es así, ¿parece tener esto alguna relación con el entorno nativo en el que normalmente habitaría el árbol?